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厚朴酚对急性肺损伤大鼠肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β的影响

2014-09-13王雪冰

中国老年学杂志 2014年24期
关键词:实验

王雪冰

(辽宁省肿瘤医院中西医结合科,辽宁 沈阳 110042)

在脂多糖(LPS)所导致的脓毒症中,可并发多器官损伤,而肺脏是最易受损伤的靶器官,急性肺损伤(ALI)出现最早,发生率也最高;ALI也是加速病人死亡的重要原因之一〔1〕。ALI不仅仅是细菌感染直接作用的结果,抗炎/抑炎失衡、失控性炎症反应贯穿着脓毒症ALI始终,促炎细胞因子如肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6等的合成与过度释放,可以直接造成肺组织细胞损害。本研究观察厚朴酚对LPS引导的脓毒症ALI大鼠促炎介质TNF-α、IL-1β的抑制作用,并观察其对ALI的保护作用。

1 材料与方法

1.1动物分组及实验用药 健康雄性Wistar大鼠,体重250~300 g,共40只。购自中国医科大学实验动物中心。将40只大鼠随机分为对照组、ALI组、厚朴酚低剂量组,厚朴酚高剂量组4组各10只。实验用药包括:厚朴酚、LPS(美国Sigma公司),0.9%生理盐水,10%水合氯醛。

1.2动物模型制备 大鼠于实验前禁食12 h,自由饮水。采用腹腔内注射LPS(10 mg/kg)建立脓毒症模型,再注入少量生理盐水,总注射量为2 ml/kg;对照组予腹腔注射生理盐水2 ml/kg;厚朴酚组,分别予厚朴酚4、8 μg/kg溶解在二甲亚砜溶液中,在LPS造模前30 min腹腔内注射。各组于造模后6、12、24 h,分别取血1 ml,于术后24 h,各组大鼠分别予水合氯醛(3 mg/kg)腹腔注射麻醉固定于手术板上处死动物,留取标本待检测。

1.3标本的采集与处理 各组大鼠分别于处死前6、12、24 h尾静脉抽血1 ml用于ELISA等检测,血标本经3 000 r/min 离心5 min,分离血浆置-80℃低温冰箱保存。实验24 h后处死大鼠后,取右肺上叶病理组织学检查,即HE染色。

1.4指标检测 TNF-α、IL-1β含量用大鼠ELISA试剂盒(美国Sigma 公司)检测,严格按说明书步骤进行。……

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