刘畅 徐东波 钟殿胜

目前,全世界范围内肺癌的发病率和病死率居各类恶性肿瘤之首[1].大部分肺癌患者诊断时已是晚期而丧失了手术机会,也因此无法获得手术标本[2].约70%的肺癌患者是靠小的活检标本和/或细胞学切片标本诊断的,并且这些小标本是仅有的可用于突变检测的材料[3,4].经典的DNA直接测序法可检测所有已知和未知突变,被称为表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变检测的"金标准",但其灵敏度较低,对样本所含肿瘤细胞数量要求较高,仅能对含量大于30%的突变基因进行检测[5],当其用于小标本检测时,会使其假阴性率大幅增加[4,5].因此,相当一部分本可以从EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitor, EGFRTKI)获益的患者仍不能被检出.随着介入影像学和微创活检技术的进展,如支气管内超声引导下经支气管针吸活检术(endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration, EBUS-TBNA),应用小标本进行临床病理检测的趋势势必会延续[6].近些年来随着分子水平技术的发展,涌现出一些检测基因突变更为灵敏的方法,如应用特异性探针的实时定量聚合酶链式反应(TaqMan PCR assay)、扩增阻滞突变系统技术(amplified refractory mutation system, ARMS)、聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(PCR-single-strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)、变性高效液相色谱分析(denaturing highperformance liquid chromatography, dHPLC)和高分辨率熔解曲线分析(high-resolution melting analysis, HRMA)等[7-10].但这些方法或因其价格昂贵,操作复杂,耗时长,对实验环境、操作人员水平及设备要求高,尚未广泛应用于临床.免疫组织化学染色法较分子水平的检测手段价格低廉,操作简便、迅速,可在几乎所有病理实验室开展.因此,对突变特异性抗体的免……