蔡明辉 杨新颖 姜宝红 滕福康 潘雁 毛锋 申屠阳

原发性支气管肺癌（以下简称肺癌）远处转移最常见的途径是淋巴扩散，约占50%，成为影响总体疗效的主要原因[1]。研究[2]表明，表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）高表达的肿瘤患者易出现转移，EGFR与血管内皮生长因子（vascular epidermal growth factor, VEGF）在肺癌组织中的高表达呈正相关并促进肺癌的侵袭和转移[3]。EGFR与VEGF表达的正相关，似乎隐约提示EGFR在肺癌新生淋巴管的生成中可能发挥了一定的作用，而EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR tyrosine kinase inhibitor, EGFR-TKI）是否具有抑制淋巴管新生和肺癌淋巴转移作用，迄今均未见报道，本文拟对此进行初步探索研究。

1 资料和方法

1.1 研究对象 细胞株及细胞培养：实验所用细胞株由中国科学院上海药物研究所培养并保存于液氮中。细胞株（NCI-H1975）培养于RPMI-1640培养液，内含10%胎牛血清、L-谷氨酰胺2 mmol/L、青霉素100 IU/mL和链霉素100 μg/mL。所有细胞均于37oC，5%CO2常规培养。实验动物：BALB/cA裸小鼠，雌性，4周-5周龄，体重（17±2）g，由中国科学院上海药物研究所提供，生产合格证编号：SCXK（沪）2008-0017；使用合格证编号：SYXK（沪）2008-0049。实验分2组，每组动物数为5只。

1.2 实验方法 取生长旺盛期的瘤组织剪切成1.5 mm3左右，在无菌条件下，接种于裸小鼠右侧腋窝皮下。裸小鼠皮下移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至100 mm3-200 mm3后将动物随机分组。BIBW2992（Gilotrif，阿法替尼）20 mg/kg组，每天口服给药1次，连续给药3周。溶剂对照组则给等量0.5%CMC-Na（羧甲基纤维素钠）。整个实验过程中，每周2次测量移植瘤直径，同时称量小鼠体重。给药3周后处死小鼠，完整取下移植瘤，石蜡包埋，准备下一步免疫组化实验。……