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(浙江工业大学 药学院，浙江 杭州 310014)

反义寡核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotide，ASODN)是根据核酸杂交原理设计，能够选择性抑制特定基因表达的核苷酸序列[1].ASODN以其安全性高，设计简便，合成容易，能特异性地作用于异常基因的特点，已在基因治疗领域取得飞速发展.然而，ASODN不能穿过生物膜进入靶部位与靶分子结合，限制了它的临床应用.如何有效地将基因药物传递至细胞内已成为基因治疗广泛应用急需解决的瓶颈问题之一[2].非病毒类载体由于具有ASODN携载率高、免疫原性低、易大量制备等优点，已成为近年来ASODN载体研究开发的主要方向之一.脂质体具有良好的生物相容性﹑低毒性以及表面可修饰的特性，近年来已成为非病毒基因载体的首选[3].与病毒载体相比，脂质体的转染效率明显偏低.为了提高脂质体的细胞摄取效率，常对其表面进行修饰.八聚精氨酸(R8)是在TAT49-57寡肽的基础上，筛选出的具有较强穿膜能力的膜活性肽，经其修饰的载体入胞效率可显著提高[4].基于以上研究成果，在普通脂质体中插入硬脂酰-R8，并对其理化性质和入胞效率进行评价，以期获得高效低毒的非病毒基因载体.

1 仪器与材料

1.1 仪 器

REV-52CS型旋转蒸发仪(上海雅荣生化设备仪器有限公司)；ELWD0.3 T1-SNCP三目倒置相差显微镜(Nikon)；SpectraMax M2e多功能酶标仪(美国分子仪器公司)；SHB-IIIA循环水式多用真空泵(河南省太康科教器材厂)；DelsaNano激光粒度测定仪(Beckman公司)；JY92超声细胞粉碎机(宁波新芝科技研究所)；GL-88D涡旋混合器(江苏海门其林贝尔仪器制造有限公司)；……