陈少英 黄振强 顾巍

乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一。流行病学统计数据显示，全世界每年有115万例新发患者[1]。近年我国乳腺癌的发病率呈上升及年轻化的趋势。由于恶性肿瘤的发生、发展与癌细胞的异常增殖密切相关，故目前对于乳腺肿瘤的研究越来越多着眼于肿瘤相关基因的表达与肿瘤的恶性发展和转移的影响。既往研究表明，胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白1 (IMP1)可调控多种与细胞黏连和迁移相关基因的表达水平，从而提高细胞的极性和定向移动能力[2]。有研究发现，在IMP1阴性的野生型乳腺癌细胞MDA231中转入IMP1基因，能有效抑制MDA231细胞的迁移和侵袭[3]。对于IMP1对肿瘤细胞增殖的影响，目前笔者尚未见相关报道。为此，本研究应用经绿色荧光蛋白(GFP)标记的人乳腺癌MDA231-GFP细胞，观察转入与未转入IMP1基因的MDA231-GFP 细胞株的体外生长情况，旨在探讨IMP1对人乳腺癌细胞增殖的影响。

材料与方法

一、实验材料

人乳腺癌细胞株MDA231-IMP1-GFP和MDA231-GFP均由美国爱因斯坦医学院提供。

二、主要试剂和仪器

胎牛血清购于美国Sigma公司，DMEM培养基、胰蛋白酶购于美国Gibco公司，四甲基偶氮唑盐(MTT)染色液购于武汉博士德生物工程有限公司。主要仪器包括CO2培养箱(美国Kendro公司)、倒置显微镜(日本Olympus公司)和酶标仪(美国Molecular Devices公司)。

三、实验方法

1.细胞计数板计数法

取对数生长期的MDA231-IMP1-GFP细胞和MDA231-GFP细胞，用0.25%胰蛋白酶消化，用10%胎牛血清DMEM培养液制成细胞悬液。显微镜下计数并调整细胞浓度至2.5×105个/孔，接种于6孔培养板中，每孔2 ml。将6孔培养板置于37℃、5%CO2培养箱培养。……