番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的实验研究
2014-08-22周迎春高洁嫦
陈 婧 刘 彬 周迎春 高洁嫦△
1广州医科大学附属第四医院中医科,广州 511447
2广州医科大学附属第二医院心内科,广州 510260
3南方医科大学南方医院中医科,广州 510515
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一个复杂的病理生理过程,其形成的最早期特征是泡沫细胞的出现。抑制泡沫细胞形成甚至逆转泡沫化已成为预防AS和治疗冠心病的重要研究方向。番石榴叶为桃金娘科植物番石榴PsidiumguajavaL的干燥叶,是岭南地区传统中药,中医理论认为其性平,味甘涩,归脾、胃、大肠、肝经,具有止泻、止血、止渴等功用。现代药理研究[1-2]表明,番石榴叶除抗炎、降血糖、降血脂等作用外,其主要活性成分之一的黄酮类化合物对于防治AS同样具有良好疗效[3],然而其作用机制仍未十分明确。本实验利用THP-1单核-巨噬细胞源性泡沫细胞模型作为研究对象,观察番石榴叶总黄酮对泡沫细胞形成的影响及其作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
THP-1购自美国模式菌种收集中心,ox-LDL与CCK-8试剂盒购自广州奕源生物科技有限公司,佛波酯(PMA)购自Merck公司,番石榴叶总黄酮(纯度55.22%)由南方医科大学中医药学院实验室提供,总胆固醇测定试剂盒购自温州东瓯津玛生物科技有限公司,Rabbit polyclonal to LOX-1(一抗)购自Abcam公司,HRP标记的羊抗兔(二抗)购自武汉博士德生物工程有限公司。
1.2 方法
1.2.1 THP-1细胞培养及泡沫细胞模型建立 THP-1细胞用含10%FBS的RPMI 1640完全培养液,置于37 ℃,5%CO2培养箱中培养。细胞密度控制在106个/ml,每2 d换液1次,采用直接传代法,每4 d传代1次。传至3~5代后用于建模。加入100 ng/ml的PMA,培养48 h,诱导成巨噬细胞……
