肝动脉灌注化疗抑制肝癌血管生成的研究*
2014-08-21郑惊雷梁力建王在国陈刘镇胡夏荣叶振伟
郑惊雷 梁力建 王在国 陈刘镇 胡夏荣 叶振伟
肝动脉灌注化疗是肝癌常用的区域灌注化疗方法,目前常作为肝癌术后治疗和不能切除的晚期肝癌治疗的重要手段。既往的研究提示经肝动脉区域灌注化疗可显著提高肝脏组织药物浓度,同时达到减少药物在外周血和全身其他部位分布[1]。化疗药物抑制肿瘤血管生成是抗肿瘤的重要机制,本文以5-Fu为化疗代表药物,通过对肝癌大鼠进行肝动脉区域灌注化疗,研究其对肿瘤血管生成的影响,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 试剂与药品 兔抗鼠CD34多克隆抗体,VEGF多克隆抗体,武汉博士德有限公司生产。DAB显色试剂盒,SP即用型试剂盒,PBS缓冲液,福州迈新有限公司生产。5-FU由南通精华制药公司提供,批号:070402,规格10 mL:0.25 g。
1.2 肿瘤细胞株和实验动物 CBRH-7919大鼠肝癌细胞株,中山大学细胞保藏中心提供。(1)BALB/c雄性裸鼠2只,17.1~19.6 g重,作种鼠皮下接种肿瘤细胞。(2)Wistar雄性大鼠18只,(120±15)g重,作肝内种植肿瘤用。上述动物均为SPF(无特定病原)级,由中山大学动物中心提供。
1.3 方法
1.3.1 大鼠肝癌模型的建立 将培养好的大鼠肝癌细胞注射于裸小鼠背部皮下,2周后成瘤并取出,切成l mm×l mm×1 mm瘤块。然后采用肝内隧道植入法将瘤块接种于Wistar大鼠肝左叶。手术当天始腹腔注射氢化可的松2 mg/只/d×5 d。术后密切观察造模后荷瘤大鼠的生物学行为、死亡情况等。
1.3.2 实验分组及给药 造模2周后,将18只荷瘤大鼠按照随机数字表法分为对照组(不作任何处理)、外周静脉组经尾静脉注射)、肝动脉组(经胃十二指肠动脉插管至肝动脉给药),6只/组。……
