路垚+林华娟+杨基住

摘 要：以蓖麻凝集素（RCA）为亲和配体制备亲和层析树脂，在比较2种固定载体制备亲和树脂对金花茶多糖分离效果的基础上，探讨了多糖上样量、NaCl浓度以及洗涤量对RCA-Sepharose-2B亲和树脂结合率或再生效果的影响，并采用高效液相色谱（HPLC）对亲和多糖进行分离效果分析，为将亲和层析技术应用于金花茶活性多糖的分离纯化提供科学依据。研究结果显示，相比AF-Amino-650 m树脂，RCA-Sepharose 2B亲和树脂的分离效果比较好，而且可以进行反复使用多次。多糖上样量显著影响多糖与树脂的亲和效果，多糖结合率随上样量增加呈倒U型变化，当多糖上样量为10.4 mg/g亲和层析树脂时，其亲合率最高，达到57 %左右；NaCl浓度对树脂的再生效果也有显著影响，用含0.2 mol/L NaCl的磷酸缓冲液洗涤树脂可以有效恢复树脂对多糖的亲和效果。HPLC分析结果显示分离获得的亲和活性多糖是由3种不同分子量的多糖组分组成。

关键词：金花茶 多糖 蓖麻凝集素 亲和层析 分子量

金花茶（Camellia chrysantha（Hu）Tuyama）为山茶科、山茶属、金花茶组植物，常绿灌木或小乔木；仅分布于我国广西及越南北部。因其特有的金黄花色和生理活性功能，被称为“茶族皇后”、“植物界的大熊猫”。现代研究表明，金花茶具有抗氧化[1-5 ]、抑制肿瘤生长[6-8 ]、降血脂[9-10 ]等生理活性，其中多糖被认为是重要的生理活性成分之一，但其构效关系尚不清楚。动物试验研究结果显示，金花茶粗多糖具有明显的降血脂作用[10 ]。田晓春等[11 ]采用离子交换柱层析对金花茶多糖进行分……