陈爱东 朱正日 陈东麟

海藻多糖对肝癌小鼠的相关因子作用

陈爱东 朱正日 陈东麟

目的 研究海藻多糖对肝癌小鼠模型中TNF-a和VEGF表达的影响，从而分析该药物的临床应用价值。方法 采用接种H22肝癌细胞株的种植瘤小鼠模型，通过灌胃给药大、中、小剂量的海藻多糖对其体内肿瘤细胞生长的影响，阳性组给予猪苓多糖，模型对照组给予相同体积的0.9%氯化钠注射液。ELISA法检测对肝癌小鼠模型外周血血清中TNF-a和VEGF含量的影响。结果 海藻多糖各剂量组均对肝癌细胞生长有抑制作用，能够提高肝癌小鼠外周血血清中TNF-a及减少VEGF的含量，此现象以中剂量为佳。结论 海藻多糖在小鼠体内具有抑制肝癌小鼠模型癌细胞增殖和扩散的作用。

海藻多糖；TNF-a；VEGF；肝癌

肝癌是我国常见的腹部好发的恶性肿瘤，平均患病年龄为43.7岁。肝癌恶性程度既高又发展迅速，若不积极治疗或者治疗方案不妥，患病后生存年限不超过半年。肝癌早期无症状，一旦发病表现出病理特征，大部分已是晚期，因此，给疾病的诊治带来了很大的困难，这也是其病死率高的另一因素，鉴于以上该疾病的特点，探寻一种能够针对发病后，对其转移和恶化有极大遏制作用的一种良药，通过外界药物的干预延长患者生存时间和控制癌细胞转移[1]。

1 材料与方法

1.1 药品和试剂 海藻多糖（青岛大学医学院制备）；肝素钠（灵泰药业提供）；猪苓多糖；TNF-a和VEGF测试剂盒（哈尔滨海霞试剂公司）。

1.2 实验动物 SPF级健康昆明种小鼠，体重（20.0 ±2.0）g，雌雄各半，H22肝癌细胞种鼠。

1.3 仪器 电子天平（上海科技发展公司）；电热恒温水浴锅（四川泰阳仪器公司）；微量移液器（成都仪器厂）；TD5M-WS型台式低速离心机（北京宏远医疗器械公司）。

1.4 实验方法 将接种了H22肝癌细胞株的小鼠40只小鼠随机分为五组，每组8只，分别对小鼠进行灌胃给药。药物为海藻多糖大（200 mg/kg）剂量组、中（100 mg/kg）剂量组、小（50 mg/kg）剂量组，阳性组给猪苓多糖100 mg/kg，模型对照组给予相同体积的0.9%氯化钠注射液，连续给药15 d。最后给药当天将小鼠处死，眼球取血，检测血清中TNF-a和VEGF含量。海藻多糖对小鼠外周血血清TNF-a和VEGF的测定（ELISA法）。

1.5 统计学分析 采用SPSS 18.0软件处理，计量数据由（±s）表示，样本比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

由表1实验数据可得，海藻多糖大、中、小剂量组对肿瘤均有抑制作用，使TNF-a的含量升高，同时使VEGF含量下降，以中剂量组最为明显，差异有统计学意义（P＜0.01）。

表1 海藻多糖对肝癌小鼠外周血清中TNF-a和VEGF含量的影响(±s)

表1 海藻多糖对肝癌小鼠外周血清中TNF-a和VEGF含量的影响(±s)

注：与阳性组比较*P＜0.01

组别 剂量[mg(kg·d)]TNF-a(μg/ml) VEGF(μg/ml)模型照组 - 23.0±1.5*3.4±0.4*阳性组 100 31.0±1.3*1.4±0.3*低剂量组 50 25.3±1.7*1.6±0.4*中剂量组 100 27.6±1.8*1.7±0.4*高剂量组 200 26.9±1.4*1.6±0.4*

3 讨论

海藻多糖是多糖的混合物[2]。目前的研究主要集中于其所包含的糖单元及含量层次上。其重要功能大致有对机体免疫器官的调节作用、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗菌抗炎等。有资料记载，抗肿瘤作用主要是由于其可以激活机体的免疫系统，提高机体自身的抗肿瘤能力，释放肿瘤杀伤的生物因子，间接起到控制肿瘤增长和转移的效果。

猪苓多糖[3]早已应用于抗肿瘤领域中，本实验中，通过复制H22肝癌疾病模型，对照比较不同剂量对肿瘤动物的体内相关因子检测进一步判断海藻多糖拮抗癌细胞增殖的效果，结果表明，海藻多糖各剂量组对肿瘤均有抑制作用，数据显示可以使TNF-a的含量升高，同时使VEGF含量不同程度下降，以中剂量组最为明显，结合TNF-a和VEGF对肿瘤生长和转移的生物学效应可以得出，该药物对肝癌的发生发展有一定的影响，希望通过更多的实验证实其具体机制。

[1] Bazan JF,Bucon KB,Hardiman G,et al.A new class of membranebound chemokine with a CX3C motif[J].Nature,2007(385):640-644.

[2] 季宇彬,高世勇,张秀娟,等.羊栖菜多糖抗肿瘤作用及其作用机制的研究[J].中国海洋药物杂志,2004(4):7-7.

[3] 徐红薇,李波,田景先.猪苓多糖与IL-2协同诱导PBMC杀伤肿瘤细胞活性的实验研究[J].中国免疫学杂志,1998,14(2):109- 111.

R322.4+7

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1673-5846(2014)07-0227-02

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