王文武，闵玉涛，陶 敬，马庆一

(1.中州大学 化工食品学院，郑州 450044 ；2.郑州轻工业学院 食品与生物工程学院,郑州 450002)

海藻为海产藻类植物的通称，在我国资源十分丰富。海藻中含有丰富的多糖，占其干重的50%以上。海藻多糖具有抗辐射、抗肿瘤、抗氧化及抗病毒等[1-4]多种生物活性，近年来的研究[5-6]表明，海藻多糖具有较好的降糖效果，其降糖机理是抑制α-葡萄糖苷酶的活性，延缓血糖生成。

本文采用水提法提取海藻多糖，以胰α-淀粉酶为靶酶，4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)作为底物，采用体外消化模型，研究海藻多糖对α-淀粉酶的抑制作用，探索其降糖机理。

1 材料与方法

1.1 实验材料及主要试剂

海藻：购自郑州市中药城，去杂后于40℃干燥，粉碎至40目备用；4-硝基苯-α- D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)；胰α-淀粉酶。

1.2 实验方法

1.2.1 海藻多糖的提取方法

取100g海藻粉末，加1000mL水，胶体磨处理5min，80℃下水浴提取10h，趁热抽滤，收集滤液。在滤渣中加入5倍体积的水提取5h，趁热抽滤，合并滤液。滤液离心后减压浓缩(水浴40℃)至原体积的四分之一，加3倍体积乙醇沉淀24h，离心收集沉淀，得水提海藻多糖。

1.2.2 海藻多糖的跟踪检测

1.2.2.1 定性检测

α-萘酚试验(Molisch紫环反应)：取检品的水溶液1mL，加5%萘酚试液数滴振摇后，沿管壁滴入5～6滴浓硫酸，使之分成两液层，待2～3 min后，如果两层液面出现紫红色环，证明有糖、多糖或甙类。

1.2.2.2 粗多糖得率的计算

取3套称量瓶，于105℃烘至恒重。分别取海藻多糖水溶液1mL，移入有编号的称量瓶中，于105 ℃烘至恒重，做3组平行试验。计算得率。

1.2.3 海藻多糖的初步纯化