王鑫昱，陈红梅，吴敏

(浙江中医药大学附属广兴医院中药房，杭州 310006)

无比山药丸中山茱萸和五味子具有抗炎、抗氧化、抗衰老、抗休克、保护肝脏、降血糖和调节人体免疫力等作用［1-10］，无比山药丸主要活性成分为腺苷、马钱苷、五味子醇甲等。对于该制剂，原质量标准收载于《中药部颁标准》第九分册，但仅有理化鉴别，无含量检测。为了更好地控制该制剂质量，笔者在本实验中建立反相高效液相色谱(RP-HPLC)法同时对上述3种活性成分进行含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器 HP-1100美国Agilent高效液相色谱仪(美国Agilent公司);Agilent 1100系列柱温箱;Agilent 1100可变波长检测器;Aglient 1100系列泵系统;pa2251电子分析天平(德国赛多利斯);Centrifuge 5430R型高速离心机(USA，Eppendorf);4020P超声波清洗器(Korea，JAC Company)。

1.2 试药 腺苷、马钱苷和五味子醇甲对照品(中国食品药品检定研究院，批号分别为110879-200202，111640-201005，110857-200709，使用前用五氧化二磷干燥12 h，均按照100%计算，含量分别为8.92 mg，10.11 mg，6.13 mg);无比山药丸(杭州胡庆余堂药业有限公司，每丸9 g，批号:120911，121032和130104);甲醇为色谱纯;水为Mili-Q纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Agilent Zorbax-C18柱(4.6mm ×250mm，5 μm);流动相为甲醇(A)-0.1%磷酸溶液，流速为1.0mL·min－1;检测波长254 nm;柱温:35℃;梯度洗脱条件:0～15min，8%A;15～26min，25%A;26 ～40min，70%A。

2.2 混合对照品溶液的配制 分别取五氧化二磷为干燥剂减压干燥12 h以上的腺苷、马钱苷和五味子醇甲对照品适量，精密称定，置量瓶中，用50%甲醇定容成浓度分别为 0.603，0.575，0.081 5 mg·mL－1对照品储备液，分别精密量取各储备液1.0，1.0和2.0mL至10mL量瓶，以50%甲醇定容至刻度即得。

2.3 供试品溶液的制备 取供试品15丸(批号:120911)，研细，取约1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶，精密量取50%甲醇50mL，称定质量后，超声处理40min，冷却至室温，再次称定质量，用50%甲醇补足失重，摇匀，高速离心10min，取上清液作为供试品液。……