郭 荣， 申小娜， 李 博， 陈 艳， 张渝疆

(1新疆医科大学， 乌鲁木齐 830011； 2新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心， 乌鲁木齐 830002； 3中国疾病预防控制中心， 北京 102206)

鼠疫(Plague)是一种由鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis,简称鼠疫菌)引起的一种自然疫源性疾病,是一种古老但至今为止仍严重威胁人类健康的烈性传染病。20世纪80年代之后，在全球范围内鼠疫疫情呈明显上升趋势[1]。鼠疫免疫学诊断是鼠疫防治工作中的重要环节,是快速、敏感诊断鼠疫的方法之一。近年来，由于DNA疫苗能够诱导出较好的体液免疫和细胞免疫而日益受到重视[2]。YopD是耶尔森氏菌属特异蛋白，是由70 kb的毒力质粒-pCD1编码的，该编码质粒保守且对耶尔森氏菌毒力的发挥起到重要作用。YopD具有调节或转运 Yops定位攻击靶细胞的功能[3-4]。正是由于上述外膜蛋白的作用，使巨噬细胞不能有效吞噬病原体从而造成耶尔森氏菌仅在感染早期维持细胞内寄生，而在以后阶段主要是在细胞外存活和繁殖的现象。另有研究发现，重组的 YopD 抗原免疫小鼠能抵抗鼠疫耶尔森氏菌 C12 株(无荚膜) 的攻击(但不能抵抗同等剂量的有荚膜鼠疫耶尔森氏菌的攻击)[5]。有关研究认为，YopD可作为潜在的诊断靶点[6]。本研究选取鼠疫菌重要功能蛋白YopD进行克隆表达，为鼠疫潜在诊断靶点及新型疫苗的选择奠定基础。

1 材料与方法

1.1菌株与载体质粒以云南玉龙鼠疫菌株(D106004)DNA为聚合酶链式反应-PCR的模板(由中国疾病预防控制中心传染病预防控制所鼠疫室提供)，表达质粒pET-32a(+)和感受态菌株E.coliBL21(DE3)分别购自Novagen和TaKaRa公司。……