黄思语， 阿尔孜古丽·吐尔逊， 邓彦超， 陈 艳,3

(1新疆医科大学公共卫生学院， 乌鲁木齐 830011； 2新疆医科大学第一附属医院临床医学研究所； 3新疆食管癌研究所；4新疆医科大学第一附属医院， 乌鲁木齐 830054)

食管癌是发生在食管黏膜层的恶性肿瘤，占所有肿瘤的2%，是世界上最常见的恶性肿瘤之一[1]。新疆是我国食管癌高发区，以哈萨克族(以下简称哈族)人群死亡率最高(88.7/10万)，远高于该地区其他民族(22.3/10万)[2]，哈族食管癌的病死率(33.90/10万)比其他少数民族高2～31倍，比全国平均病死率(14.59/10万)高2.3倍[3-4]。关于正常食管上皮细胞恶性转化，并进一步发展成食管癌的相关研究[5-6]逐渐受到了大家的重视。而成功获取体外培养的正常食管上皮细胞是研究食管上皮细胞增殖、分化及恶性转化的必要条件。国内外目前没有可供研究的哈族食管正常上皮细胞株。体外培养正常食管上皮细胞的步骤复杂，严重制约了后续的研究工作。本研究采用酶消化法并综合国内外关于正常食管上皮细胞培养的优点，在无血清培养基中培养哈族食管正常上皮细胞。旨在探讨一种更简便、细胞纯度更高的培养方法，为进行哈族食管正常上皮细胞恶性转化的研究提供可靠的工具。

1 材料与方法

1.1实验仪器和材料人正常食管上皮细胞专用培养基EpiCM-2(美国ScienCell公司)，RPMI 1640培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(美国Gibco公司)，0.25%Dispase Ⅱ酶(瑞士Roche公司)，0.25%胰蛋白酶，0.05%胰蛋白酶/0.03%EDTA，双抗(美国Hyclone公司)，DMSO(美国Sigma公司)，鼠抗人广谱角蛋白抗体(博士德生物有限公司)，二步法免疫组化检测试剂盒(中杉金桥公司)，DAB试剂盒(中杉金桥公司)。……