唐建 罗清礼

甲状腺相关眼病(thyroid associated ophthalmopathy，TAO)是以眼外肌和眶脂肪组织增多为特征的自身免疫性疾病。眼眶脂肪组织增多不但与突眼程度相关，而且能分泌多种脂肪细胞因子。眼眶组织中的前脂肪成纤维细胞属于成纤维细胞的一个亚型，在体外培养的适当条件下能分化为脂肪细胞[1]，在脂肪组织增生中起着重要作用。瘦素(Leptin)作为特异性的脂肪细胞因子，由Zhang等[2]于1994年发现其基因定位并命名，通过受体及多种神经肽通路发挥生物学效应，除了作用于下丘脑来控制摄食、能量消耗外，还具有调节炎症反应、促进细胞增殖等作用。本研究利用手术时获得的TAO患者和正常人眼眶脂肪组织样本，以及体外培养的TAO患者与正常人眼眶前脂肪成纤维细胞诱导分化得到的脂肪细胞，采用实时荧光定量PCR检测Leptin mRNA的表达情况，探索其在TAO发病机制中的意义。

1 材料与方法

1.1组织来源TAO患者的眼眶脂肪组织取自眼眶减压术中，共8例8眼，所有患者均符合TAO的诊断标准[3]，排除其他免疫性、肿瘤性疾病；正常人眼眶脂肪组织取自13例(13眼)去眼袋术中，亦排除其他免疫性、肿瘤性疾病。入选的TAO患者和正常人群性别比例、年龄、身体质量指数间差异均无统计学意义(均为P>0.05，见表1)。本研究通过本院医学伦理委员会的批准，组织取样获得患者的同意并签署知情同意书。

表1 入选的TAO患者与正常人群的基线比较

1.2主要试剂与仪器TrizolTMRNA分离液(美国Gibco公司)，DMEM/F12培养液(美国Gibco公司)，酶联免疫检测仪(美国Thermolab公司)，CO2培养箱(美国Forma Scientific公司)，GeneAmp PCR System 9600(美国PE公司)，FTC2000实时荧光定量PCR仪(加拿大枫岭公司)。