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大鼠海马组织RNA、DNA和蛋白质共提取方法的研究

2014-06-28胡丽丽赵小鸽王爱英

西安交通大学学报(医学版) 2014年2期
关键词:海马

胡丽丽,赵小鸽,倪 磊,王爱英,杨 娟,

(西安交通大学医学院:1. 遗传学与分子生物学系;2.环境与疾病相关基因教育部重点实验室、生物医学基础研究中心, 陕西西安 710061)

各种动物模型建立后,研究人员通常期望能够从DNA、RNA以及蛋白质水平对某一特定的组织或部位进行深入的研究。 但是,所研究的动物具有个体差异性,采用不同的动物分别进行DNA、RNA以及蛋白质3个水平的研究极有可能出现实验结果的不一致性;其次,所研究的特定部位通常具有不可分割性,或者动物的组织材料量较少,不足以分别进行DNA、RNA以及蛋白质3种物质的提取。因此,如果同时从某一特定的组织或部位提取DNA、RNA以及蛋白质这3种物质进行后续检验分析,将提高实验结果的一致性和准确性。

海马区又名海马回、海马体或大脑海马,是位于脑颞叶内的一个部位的名称。人有两个海马,分别位于左右脑半球。海马属于大脑边缘系统的组成部分,与学习记忆密切相关[1-2];其参与调节衰老引起的自主神经系统、免疫系统和神经内分泌系统的活动[3];也是大脑中与抑郁症密切相关的结构之一[4]。此外,在各种应激模型中,海马与HPA轴及糖皮质激素密切关联[5-6]。

本研究以单侧海马组织为材料采用Trizol法,分别从上层水相、中间相和有机相中制备总RNA、基因组DNA 和总蛋白质。通过聚合酶链式反应(PCR)对Trizol法提取海马基因组DNA的效果和试剂盒提取效果进行比较,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法将Trizol法对海马蛋白的提取效果和传统的蛋白裂解液裂解法进行比较,分析Trizol法的优势。……

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