谢治军 薛重重 杨丽萍

(粤北人民医院血液内科，广东 韶关 512026)

自体干细胞移植(AHSCT)是指对患者进行全身照射、化疗和免疫抑制预处理后，将自体的造血干细胞经血管输注给患者，使之重建正常的造血和免疫功能[1]。AHSCT供者来源无困难，亦无移植物抗宿主病，移植相关死亡率低，而且疗效优于常规化疗。本课题分析对比AHSCT前后早期外周血淋巴细胞亚群及细胞周期变化，初步了解AHSCT后早期免疫重建过程。

1 对象与方法

1.1对象 自2006年10月-2010年12月，共有21例接受了AHSCT，其中男11例，女10例，年龄19～67岁，其中2006年10月-2008年12月间6例为回顾性研究，而2009年1月-2010年12月间15例为前瞻性研究。诊断分别为慢性髓系白血病(CML)15例，急性髓系白血病(AML)3例， 多发性骨髓瘤(MM)3例。因随访时限的不同、患者在原发病复发时退出本研究等原因，研究对象在移植后1个月时21例；3个月时21例；6个月时18例；9个月时17例。正常对照为30例健康献血员，男18例，女12例，年龄17～59岁。

1.2淋巴细胞及其亚群的检测 用Beckman-Coulter公司的EPICS-XL型流式细胞仪进行荧光抗体标记检测。取接受AHCST患者及健康志愿者的新鲜抗凝血标本，测出淋巴细胞中各淋巴细胞亚群的百分比。与血细胞计数仪联用，得出各淋巴细胞亚群百分比后乘以淋巴细胞数量，得出各淋巴细胞的绝对浓度。所用单抗为CD3、CD4、CD8、CD19、CD16、CD56，均购自Immunotech公司。

1.3淋巴细胞细胞周期的检测 取受检者肝素抗凝静脉血1 ml左右，立即用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞。使用FACS-Calibuer流式细胞仪，对样品进行单参数DNA含量分析。按细胞周期流式图所示:①S期细胞比率(SPF)：SPF(%)=[S÷(G0/G1-S+G2M)]×100%；……