陈 雪 许 娟 亓文波

(1.泰山医学院，山东 泰安 271016; 2.泰山医学院附属泰山医院，山东 泰安 271000)

研究发现存在动脉粥样硬化病变的人群易致骨量的丢失，同时，骨质疏松人群较非骨质疏松人群更易发生动脉粥样硬化病变，提示骨质疏松和动脉粥样硬化之间可能存在着共同危险因素。

临床研究显示，氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)在整个动脉粥样硬化(AS)形成和发展过程中起了重要作用[2]。ox-LDL是血浆中LDL经动脉壁细胞氧化后产生多种活性醛类，再与LDL 载脂蛋白(apoB)中赖氨酸残基结合形成的产物[3]，可被巨噬细胞的清道夫受体识别而快速摄取，促进巨噬细胞形成泡沫细胞，从而促进动脉粥样硬化的发生。而骨代谢的过程是依靠骨再建完成的。骨再建主要受破骨细胞(osteoclast cell, OC)的骨吸收与成骨细胞(osteoblast， OB)的骨形成之间相互作用、相互制约[5]。破骨细胞是目前发现的体内唯一专职骨吸收的细胞[6]。破骨细胞的活性改变是导致各种代谢性骨病的主要原因。目前少有研究观察ox-LDL对破骨细胞的影响。本实验就ox-LDL与破骨细胞增殖、分化的关系进行研究。

1 材料和方法

1.1材料 小鼠破骨前体细胞RAW264.7(凯基)；抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色试剂盒(Sigma公司)；胎牛血清(杭州四季青公司)；小鼠重组细胞核因子kB 体活化因子配基(Sigma公司)。

1.2方法

1.2.1透析膜的处理 将剪下的30 cm的透析膜于过量的10 mmol/L的NaHCO3中浸泡并煮沸约5分钟，在10 mmol/L的乙二胺四乙酸(EDTA)中煮沸4分钟。用三蒸水冲洗数次。置于20%～50%乙醇溶液中，4℃的冰箱保存备用。

1.2.2LDL的制备及氧化 通过密度梯度离心法从正常人的血清中制得LDL提取液，并储存在含有0.01%乙二胺四乙酸(EDTA)的磷酸盐缓冲液中。……