杜凡，周佰林，张红征，李焕斌，文正伟，王玲，张琦

（温州医科大学 核医学教研室，浙江 温州 325035）

随着DNA重组和基因转移技术的逐步成熟，钠/碘转运体（sodium/iodide symporter，NIS）作为人类肿瘤的一种治疗基因，被广泛地转染到多种肿瘤细胞中，如甲状腺髓样癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌等[1-4]，并成功地使转染的肿瘤细胞具有摄碘功能。扩展碘131（131I）在非甲状腺癌中的治疗是NIS最具前景的研究领域之一。我们设想将转基因技术与放射性核素治疗相结合，将人钠/碘转运体（hNIS）基因转染至人结肠癌SW480细胞中，使SW480细胞获取摄131I能力，然后利用131I的辐射生物效应，达到杀伤肿瘤细胞的目的，即研究131I应用于结肠癌治疗的可能性，为下一步的动物体内实验提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 细胞： SW480细胞购于上海中科院细胞库；已转染空白质粒（pcDNA3.1+）的SW480细胞和已转染hNIS基因（pcDNA3.1+-hNIS）的SW480细胞，由温州医科大学核医学教研室转染并检测[5]。

1.1.2 主要试剂：131I购于中国原子高科有限公司。Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购于凯基生物科技公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及分组：将细胞分为重组质粒（pcDNA3.1+-hNIS）转染组（转染组）、空白质粒（pcDNA3.1+）转染组（空白质粒组）和空白对照组。以10%血清1640培养基，37 ℃、5% CO2培养箱中培养，长满培养瓶85%～90%时传代。

1.2.2 体外摄131I实验：①用λ计数器测各组细胞本身的cpm值，即本底值。②6孔板培养各组SW480细胞24 h，每孔加含有15μCi131I的培养基1 mL，37 ℃、5% CO2培养箱中培养。测24 h的瞬时摄131I率。③6孔板培养各组SW480细胞，分别于4、8、16、24、36、48 h用胰酶消化提取细胞测cpm值。④同时保留一管含有15μCi培养液1 mL，λ计数器测它不同时段的cpm值。测不同时段摄131I能力变化。……