一种基于光纤倏逝波生物传感器检测单核细胞增生李斯特氏菌方法的建立
2014-06-13刘金华孟日增聂丹丹王玮琳王浩天
刘金华,刘 韬,孟日增,聂丹丹,王玮琳,王浩天
(1.吉林出入境检验检疫局,吉林 长春130062;2.吉林大学药学院,吉林 长春130021)
单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogens,LM)是一种重要的食源性致病菌,他能引起人类和动物李斯特氏菌病。人和动物感染LM可引起单核细胞增多症、脑膜炎、败血症和流产,严重威胁人类健康和社会经济的发展[1,2]。该菌可通过眼睛及破损皮肤、粘膜进入体内而造成感染,该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖,也是冷藏食品中威胁人类健康的主要病原菌之一,因此,在卫生微生物检验中是一种重要的检测目标[3]。目前LM常用的检测方法一般以生化培养鉴定、血清学检测等为主[4]。光纤生物传感器是激光技术和现代低消耗的光纤技术共同发展的产物,是目前应用较为广泛的生物传感器之一[5,6]。本研究基于光纤倏逝波生物传感器技术建立一种快速、高效检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法,该方法为LM的卫生检验提供一种新的技术手段。
1 材料与方法
1.1 实验菌株
产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,ATCC13124)、绵羊李斯特氏菌(listeria ivanovii,ATCC19119)、英诺克李斯特氏菌(listeria innocua,ATCC19119)、金 黄 色 葡 萄 球 菌 (Staphylococcus aureus,ATCC25923)、肠炎沙门氏菌(salmonella enteritidis,ATCC13076)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,ATCC13311)、大 肠 埃 希 菌(Escherichia coli,ATCC25922)、蜡 样 芽 胞 杆 菌(Bacillus cereus,ATCC11778))、单核细胞增生李斯 特 氏 菌 (Listeria monocytogens,LM,ATCC19111)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni,ATCC33291)等均为本实验室保存菌种。
1.2 主要仪器与试剂
光纤生物传感器,聚苯乙烯光纤均由中国科学院长春光学精密机械研究所提供。LM多克隆抗体、LM单克隆抗体、纳米量子点CdFe标记的抗LM的多克隆抗体均由本实验室制备,磷酸盐缓冲液……
