不同pH值对人胚肺二倍体成纤维细胞MRC-5生长的影响
2014-05-21陈通威山西康宝生物制品股份有限公司长治046011通讯作者mailctw001126com
陈通威,赵 鹏(山西康宝生物制品股份有限公司,长治 046011;通讯作者,E-mail:ctw001@126.com)
细胞生物学、免疫学以及分子生物学是现代生物学三大前沿学科,细胞培养技术是细胞生物学研究领域中最常用的方法之一。尤其是在生物医药领域,许多基因工程药物、疫苗等都离不开最基本的细胞培养技术,人二倍体细胞系的建立使人用疫苗得到了长足的发展[1]。目前,人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)被国内外很多科研单位和细胞培养工作者使用[2,3]。
在体外培养细胞时,培养液的pH值过高或过低均会对细胞生长产生不利影响。戴永祥等曾经报道过 MRC-5 生长适宜的 pH 值为 7.4[4],本文对MRC-5的生长pH值范围进行了扩展研究,找出了适宜MRC-5细胞生长的最佳pH值范围。在细胞培养过程中,细胞代谢产物的积累会改变培养液的pH值,故常用缓冲液或二氧化碳调节细胞培养液pH值,本文使用7.5%的碳酸氢钠溶液来调节细胞培养液的pH值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞 人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5),购自美国标准生物品收藏中心(ATCC),经自行建库后备用,51万个/ml。
1.1.2 主要设备、器材与试剂 生化培养箱,黄石市恒丰医疗器械有限公司。pH计,赛多利斯科学仪器(北京)有限公司。倒置显微镜,重庆奥特光学仪器有限责任公司。超净工作台,北京西泰科隆仪器技术有限公司。数显恒温三用水箱,金坛科兴仪器厂。高温电子灭菌炉,SANYO。高压蒸汽灭菌器,SANYO。渗透仪,WESCOR。T25细胞培养瓶,Nucn。细胞计数板,玉环县求精医用仪器厂。
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