南楠，刘西京，侯安国（1.深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院，广东 深圳 518055；.云南中医学院中药学院，昆明 650500）

板蓝根为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根，具有清热解毒、凉血利咽之功效[1]。长期以来，研究人员对板蓝根的药效物质基础进行了大量的研究，部分研究认为板蓝根中的游离氨基酸是有效成分[2-3]。2010年版《中国药典》（一部）也对板蓝根中游离氨基酸进行了定性鉴别[4]。笔者在研究中发现，板蓝根中多肽含量较高，经人工胃肠液消化后，通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法检测发现，板蓝根多肽被降解成小分子多肽，而不是降解成游离氨基酸。整体药理试验也表明，板蓝根多肽有抗流感病毒的作用（另文发表），因此多肽可能为板蓝根的主要物质基础之一，故有必要对板蓝根多肽的提取工艺进行优化。笔者采用正交试验，以新版国家标准凯氏定氮法和2，2′-联喹啉-4，4′-二甲酸二钠盐（BCA）法测定多肽含量，考察提取溶剂、提取时间、溶剂用量对多肽提取的影响，并对这两种测定方法进行比较。

1 材料

1.1 仪器

KDN-04 A型半自动凯氏定氮仪（上海贝特仪电设备厂）；Multiskan spectrum全波长酶标仪（美国Thermo公司）；96孔板（美国康宁公司）；MF1-A10超纯水机（美国Millipore公司）；5180 R高速离心机（德国Eppendorf公司）。

1.2 药材

板蓝根，2011年10月购自甘肃，经湖南省中医研究院刘春海副研究员鉴定为真品。

1.3 试剂

BCA蛋白浓度测定试剂盒（增强型，碧云天生物技术研究所）；其他化学试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 药材的提取

板蓝根药材适当粉碎，过40目筛，称取50 g，按试验安排在常温下进行浸取。……