丁安明，陈雅琼，Zahid Hussain，康 乐，张蕴睿，崔萌萌，王 倩，孙玉合*



烟草GA代谢相关基因和的克隆和表达分析

丁安明1,2，陈雅琼1,2，Zahid Hussain1,2，康 乐1,2，张蕴睿1,2，崔萌萌1，王 倩1，孙玉合1*

（1.中国农业科学院烟草研究所，烟草行业烟草基因资源利用重点实验室，青岛 266100；2.中国农业科学院研究生院，北京 100081）

为了解赤霉素（gibberellic acids, GA）在烟草生长发育中的作用，本研究利用同源克隆和RACE技术分离了3个烟草种GA代谢相关基因和的6条序列，对其进行了序列比对和进化分析；并利用荧光定量表达分析研究了其在林烟草和普通烟草中的表达谱。结果表明，相关基因在烟草属和茄科作物中保守性很高；普通烟草中克隆的和可能起源于绒毛状烟草。表达分析表明，和在林烟草生长发育早期和茎伸长期分别在叶和茎中的表达量显著高于其他组织。

烟草；赤霉素；荧光定量表达分析

赤霉素（gibberellic acids, GA）是调节植物生长发育的一类重要的二萜类激素，作用于植物整个生命周期，包括种子萌发、茎的伸长、开花诱导、花药发育及种子和果实的生长等[1-2]。目前，植物中GA的代谢途径已经基本确定，由C20前体牻牛儿牻牛儿基焦磷酸（geranylgeranyl diphoaphate, GGDP）经一系列酶催化生成[3]。该代谢途径的第一步和第二步催化反应在植物叶绿体内完成，由古巴焦磷酸合酶（ent-copalyl pyrophosphate synthase, CPS）和内根-贝壳杉烯合酶（ent-kaurene synthase, KS）催化GGDP形成内根-贝壳杉烯。编码CPS和KS两种酶的基因分别为和，并已在拟南芥、水稻、豌豆等植物中进行了克隆和功能验证分析[4-8]。Sun等[5]从拟南芥野生型分离了全长cDNA，证实该基因的产物为CPS，并用35S标记将该酶定位于叶绿体。……