腺相关病毒及慢病毒载体对骨髓间充质干细胞基因转染效率的比较
2014-05-08苏玉金赵育梅顾漪
苏玉金,赵育梅,顾漪
·基础研究·
腺相关病毒及慢病毒载体对骨髓间充质干细胞基因转染效率的比较
苏玉金,赵育梅,顾漪
目的比较腺相关病毒(AAV)载体和慢病毒(LV)载体在间充质干细胞(MSCs)基因转染中的效率。方法密度梯度离心法分离培养MSCs,HE染色、Nestin免疫荧光染色鉴定,BrdU标记观察增殖情况。分别包装AAV与LV假病毒颗粒,并感染MSCs,通过β-gal染色和绿色荧光蛋白检测,分别计算两者的转染效率。结果MSCs成功从骨髓分离。AAV载体介导的基因转染率为49.1%,LV载体的转染率为91.4%(P<0.01)。结论LV载体介导的基因转染方法转染效率更高。
基因转染;腺相关病毒载体;慢病毒载体;骨髓间充质干细胞
[本文著录格式]苏玉金,赵育梅,顾漪.腺相关病毒及慢病毒载体对骨髓间充质干细胞基因转染效率的比较[J].中国康复理论与实践,2014,20(12):1117-1121.
骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)是造血微环境的重要组成成分,可以分泌多种与造血有关的正负调控因子,发挥调控造血的作用。本世纪初发现BMSCs具有干细胞的特征,且具有多向分化的潜能,属于多能干细胞[1]。在体外特定培养条件下,BMSCs可以分化为成骨细胞[2]、软骨细胞、脂肪细胞[3]以及成肌细胞等间充质细胞,因此人们亦将之称为间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)[4];近年来发现,MSCs还可以分化为星形胶质细胞、少突胶质细胞与神经元[5-6]。由于具有多向分化潜能,而且可以自体取材、自体移植,无免疫排斥反应,所以BMSCs细胞是基因治疗潜在的理想工具,在细胞与基因治疗中有着广阔的应用前景[7]。
基因疗法有多种形式,可以将基因直接引入体内,也可以通过运载细胞携带治疗基因,通过细胞移植来治疗疾病。……
