解毒消癥饮对肝癌侧群细胞增殖和相关因子表达的影响
2014-05-05陈旭征黎金浓胡海霞魏丽慧廖联明杜建
陈旭征 黎金浓 胡海霞 魏丽慧 廖联明 杜建
解毒消癥饮对肝癌侧群细胞增殖和相关因子表达的影响
陈旭征 黎金浓 胡海霞 魏丽慧 廖联明 杜建
目的从肝癌干细胞角度探讨解毒消癥饮抑制肝癌的机制。方法解毒消癥饮乙酸乙酯提取物(EE-JXY)体外干预Hep3B细胞后采用MTT检测细胞存活率;平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力;流式细胞仪分析细胞中侧群(SP)细胞的含量;RT-PCR检测干细胞相关基因CD133、Oct4、Nanog和Sox2 mRNA的表达。不同浓度组细胞存活率值比较采用单因素方差分析。结果与空白组相比,EE-JXY剂量和时间依赖性抑制Hep3B细胞的存活,0.25 mg/ml浓度干预24 h后,抑制率达34.37﹪(P< 0.01)。克隆形成能力也受到明显抑制(吸光度从0.45±0.06下降至0.29±0.03,P< 0.05)。EE-JXY组SP细胞的含量显著降低(从2.27﹪下降至0.8﹪),CD133、Oct4、Nanog和Sox2 mRNA的表达均受到抑制。结论EE-JXY能显著抑制Hep3B细胞的增殖,可能的机制与其下调干细胞相关因子CD133、Oct4、Nanog、Sox2 mRNA的表达及SP的比例,干扰肝癌干细胞自我更新有关。
解毒消癥饮;肝肿瘤;干细胞
古代医家认为恶性肿瘤的发生多是由阴精亏损、热毒蕴结,阻塞于经络脏腑所致。故清泄里热,消除热毒是治疗恶性肿瘤热毒证候的关键。解毒消癥饮主要由具有寒凉解毒之功效的白花蛇舌草、夏枯草、山慈菇和苦参组成,应用于术前,或无法手术或放化疗的晚期肿瘤患者。临床研究证实术前联合解毒消癥饮治疗肝癌患者,能显著提高其6、12、24及36个月的累计生存率,降低2年的复发率,有效控制肝癌的复发和转移[1]。因此,进一步从分子水平深入研究该方抗肝癌复发转移的机理,对提高肝癌的治疗水平有重要意义。
前期研究发现解毒消癥饮能显著下调肝癌皮下移植瘤体干细胞相关因子CD133和c-kit的表达水平,可能具有干扰肝癌干细胞自我更新的作用[2]。本文建立人肝癌细胞株Hep3B的培养体……
