李 峰，赵延恕

(中南大学湘雅二医院心血管内科，湖南 长沙 410011)

胱抑素C及D二聚体与冠心病病变程度相关性研究

李 峰，赵延恕

(中南大学湘雅二医院心血管内科，湖南 长沙 410011)

目的观察不同病变程度的冠心病患者血浆胱抑素C(Cyst C)和D-二聚体(DD)水平，探讨Cyst C及DD水平对冠状动脉狭窄病变程度的临床预测价值。方法选取2013年9月至2014年2月我院老干科收治的冠心病患者74例。根据冠脉造影结果将其分为单支病变组24例、双支病变组28例和三支病变组22例。根据冠状动脉Gensini评分结果将其分为轻度狭窄组25例、中度狭窄组20例和重度狭窄组29例。同时选择疑似冠心病患者22例为对照组。用ELISA法分别检测各组受试者血浆中的Cyst C和DD浓度，并应用Pearson进行相关分析。结果单支病变组、双支病变组和三支病变组患者的血浆Csyt C和DD水平均高于对照组(P＜0.05)。三支病变组的血浆Cyst C和DD浓度分别为(1.31±0.28)mg/L和(303.46±41.15)μg/L，均高于双支病变组和单支病变组(P＜0.05)；双支病变组的血浆Cyst C和DD浓度分别为(1.14±0.22)mg/L和(248.63±31.78)μg/L，均高于单支病变组的(0.93±0.17)mg/L和(215.92±32.86)μg/L(P＜0.05)。轻度狭窄组、中度狭窄组和重度狭窄组患者的血浆Csyt C和DD水平均高于对照组(P＜0.05)。重度狭窄组的血浆Cyst C和DD浓度分别为(1.35±0.23)mg/L和(293.50±39.24)μg/L，均高于中度狭窄组和轻度狭窄组(P＜0.05)；中度狭窄组的血浆Cyst C和DD浓度分别为(1.09±0.27)mg/L和(261.12±40.31)μg/L，均高于轻度狭窄组的(0.94±0.16)mg/L和(211.59±35.46)μg/L(P＜0.05)。患者的血浆Cyst C和DD水平均与冠脉Gensini积分呈正相关(r=0.514，0.476，P＜0.01)，血浆Cyst C与DD水平呈显著性正相关(r=0.743，P＜0.01)。结论冠心病患者血浆Cyst C和DD水平明显升高，随着病变支数的增加及狭窄病变程度而逐渐升高，且与冠状动脉Gensini评分具有正相关性。联合检测血浆Cyst C及DD水平可初步预测冠状动脉狭窄病变程度。

胱抑素C；D-二聚体；冠心病；Gensini评分

冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称“冠心病”)是心血管系统疾病中常见疾病，随着冠心病机制的深入研究，发现胱抑素C(Cystatin C，Cyst C)和D-二聚体(D-dimer，DD)与心血管系统疾病有密切的联系，被认为是冠心病的新的危险因素，对冠心病患者的早发现、早诊断、早治疗，减少并发症、改善预后及降低死亡率具有重要的临床意义[1-2]。本研究旨在分析不同病变程度的冠心病患者血浆Cyst C和DD水平及其相关性，探讨Cyst C及DD水平对冠状动脉狭窄病变程度的临床预测价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取中南大学湘雅二医院心内科2013年9月至2014年2月住院行冠脉造影(CAG)检查的患者74例，均符合Braunwald心脏病学(第9版)制定的诊断标准，并经CAG证实至少有一支冠状动脉(左主干、左前降支、左回旋支、右冠状动脉)及其主要分支动脉血管内径狭窄≥50%。74例患者中男性42例，女性32例，年龄平均(61.13±9.64)岁。根据其主要冠状动脉病变累及支数分为单支病变组(24例)、双支病变组(28例)及三支病变组(22例)。根据美国心脏病协会(AHA)所规定的改良Gensini积分系统对每支病变血管狭窄程度进行定量分析并评分。按Gensini积分情况(积分＜30分、30～90分、＞90分)将冠心病患者分为三组，即轻度狭窄组(25例)、中度狭窄组(20例)、重度狭窄组(29例)。选取22例疑似冠心病患者为对照组，CAG检查证实冠状动脉＜50%的狭窄。男性10例，女性12例。排除肺源性心脏病、风湿性心脏病等除冠心病外的其他心血管病；严重肝肾功能不全者；妊娠、哺乳期妇女及合并有急慢感染病史、恶性肿瘤等；近6个月有手术等。所有受试者均签署知情同意书，并经医院伦理委员会批准。

1.2 检测方法 应用ELISA法检测血浆Cyst C和DD水平。

1.2.1 试剂与仪器 Cyst C和DD定量测定试剂盒(上海雅吉生物科技发展公司)；日立7600-020全自动生化仪(日本日立集团)；全自动酶标仪(汇松MB530)；血管内造影导管(日本泰尔茂株式会社)。

1.2.2 主要方法和指标 取空腹静脉血5 ml注入EDTA抗凝管，3 000 r/min离心15 min，分离血浆置于-80℃冰箱，Cyst C和DD应用双抗体夹心法测定。Cyst C测定操作步骤:(1)标准品的稀释与加样、置37℃温育30 min、洗涤、加酶：每个孔加入酶标试剂50µl，但不加入空白孔。37℃温育30 min、洗涤、显色：每个孔先加入显色剂A 50µl，再加入显色剂B 50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 min。每个孔加入终止液50µl，450 nm波长依序测量各孔的OD值并计算。DD测定同Cyst C测定。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差()表示，采用t检验；计数资料以频数表示，采用χ2检验；应用Pearson分析其相关性。以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组血浆Cyst C和DD水平比较 单支病变组、双支病变组和三支病变组的血浆Cyst C和DD水平均高于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。三支病变组血浆Cyst C和DD的浓度高于双支病变组和单支病变组(P＜0.05)；双支病变组血浆Cyst C和DD的浓度均高于单支病变组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 各组血浆Cyst C及DD水平比较()

表1 各组血浆Cyst C及DD水平比较()

注：a表示与正常对照组比较，P＜0.05；b表示与单支病变组比较，P＜0.05；c表示与双支病变组比较，P＜0.05。

对照组(n=22)单支病变组(n=24)双支病变组(n=28)三支病变组(n=22) 0.75±0.14 0.93±0.17a1.14±0.22ab1.31±0.28abc172.21±24.64 215.92±32.86a248.63±31.78ab303.46±41.15abc

2.2 冠脉不同Gensini积分的各组血浆Cyst C和DD水平比较 轻度狭窄组、中度狭窄组和重度狭窄组血浆的Csyt C和DD水平均高于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。重度狭窄组血浆Cyst C和DD的浓度均高于中度狭窄组和轻度狭窄组(P＜0.05)；中度狭窄组血浆Cyst C和DD的浓度均高于轻度狭窄组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 冠脉不同Gensini积分的各组血浆Cyst C和DD水平比较()

表2 冠脉不同Gensini积分的各组血浆Cyst C和DD水平比较()

注：a表示与正常对照组比较，P＜0.05；b表示与单支病变组比较，P＜0.05；c表示与双支病变组比较，P＜0.05。

对照组(n=22)轻度狭窄组(n=25)中度狭窄组(n=20)重度狭窄组(n=29) 0.77±0.14 0.94±0.16a1.09±0.27ab1.35±0.23abc172.21±24.64 211.59±35.46a261.12±40.31ab293.50±39.24abc

2.3 冠心病患者Cyst C和DD水平与冠脉Gensini积分的相关性 通过Pearson相关分析显示，Cyst C水平与冠脉Gensini积分呈正相关(r=0.514，P＜0.01)，见图1。通过Pearson相关分析显示，DD水平与冠脉Gensini积分呈正相关(r=0.476，P＜0.01)，见图2。

图1 冠心病患者DD与Gensini积分相关性散点图

图2 冠心病患者Cyst C与Gensini积分相关性散点图

2.4 血浆Cyst C水平与DD水平的相关性分析 经线性相关分析冠心病患者血浆Cyst C水平与DD水平呈显著性正相关(r=0.743，P＜0.01)。

3 讨论

Cyst C是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员之一，无组织特异性，几乎来源于机体所有有核细胞中，可持续、恒定地表达。有研究表明，Cyst C参与调控细胞内外蛋白质的分解，可引起细胞外基质和内弹性膜的降解增多，侵入内膜的单核巨噬细胞和血管平滑肌增多，并可影响脂质代谢，导致动脉粥样硬化的发生。Cyst C还可影响中性粒细胞的迁移，参与炎症反应，参与血管壁、细胞外基质生成和降解的平衡过程[3-4]。本次研究结果可见，冠心病患者不同病变冠脉支数组Cyst C浓度明显高于对照组，且随着病变冠脉支数增加，Cyst C逐渐升高。冠心病患者按照冠脉狭窄程度分组具有相同的趋势。提示在冠心病患者中血浆Cyst C浓度明显升高。经Pearson相关分析发现，Cyst C水平与冠脉Gensini积分呈正相关关系(P＜0.01)，表明Cyst C水平与冠脉病变的狭窄严重程度相关，Cyst C与冠心病的发生、发展过程有密切联系。主要由于Cyst C作为一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，可直接影响动脉粥样硬化的生成、发展以及破裂。在该过程中，炎症反应和血管壁的重塑是形成动脉粥样硬化的基础，炎症细胞释放炎症因子促进内皮细胞表达过多的组织蛋白酶，坏死组织也从溶酶体中释放出大量的组织蛋白酶，机体代偿性升高Cyst C浓度，维持促组织蛋白溶解和抗组织蛋白溶解的平衡。Cyst C还参与炎症的调节过程，具有增强中性粒细胞的趋化和吞噬能力，促进动脉粥样斑块的进展[5-6]。Cyst C参与了心血管疾病的病理过程，可作为评估冠心病患者冠状动脉病变程度的一项生化指标。

DD是在凝血酶及凝血因子XIII的共同作用下形成的交联纤维蛋白，经纤维溶解酶降解后的终产物之一。DD由交联蛋白D区的α、β、γ组成，其相对分子质量为184 000～202 000 kD，与E片段形成稳定的DD/E片段。DD既可以反映机体的纤维溶解活动，并且又可以反映机体的凝血功能。近年来研究表明，冠状动脉病变的发生、发展过程与血栓的形成和纤维功能亢进相关。机体体内有血栓病变且继发纤维功能亢进时，血液中的DD水平升高，血浆中的DD浓度升高被认为是新鲜血栓形成和体内血液高凝状态的一种体现[7-8]。本次研究结果中，冠心病患者血浆DD水平明显高于对照组，并随着病变范围的增大和程度的加重而升高，且与冠心病呈正相关。冠状动脉内皮细胞受损，胶原暴露，内源性凝血途径或(和)外源性凝血途径启动，生成的凝血酶水解纤维蛋白原形成纤维蛋白单体，纤维蛋白单体聚合形成纤维蛋白多聚体。同时，也继发性引起纤维溶解系统功能的亢进，也就直接导致了血浆中DD浓度的升高[9-10]。本次研究也证实冠心病组血浆Cyst C水平与DD水平呈显著性正相关，因此，联合检测血浆Cyst C及DD水平可初步预测冠状动脉狭窄病变程度。本次研究还需要进一步增加样本量研究血浆中Cyst C及DD水平与冠心病的关系，血浆Cyst C和DD虽然与冠心病有着密切的联系，但Cyst C及DD水平是作为冠心病的致病因子还是冠心病发生的一种伴随现象，还需进一步研究。

综上所述，冠心病患者血浆Cyst C和DD水平明显升高，随着病变支数的增加及狭窄病变程度而逐渐升高，且与冠状动脉Gensini评分具有正相关性。联合检测血浆Cyst C及DD水平可初步预测冠状动脉狭窄病变程度。

[1]Cakar MA,Gunduz H,Varim C,et al.Correlation between D-dimer levels and coronary artery reperfusion in acute myocardial infarction patients after thrombolytic treatment[J].Blood Coagul Fibrinolysis,2013,24(6):608-612.

[2]杨友新,刘 丽,覃 明.胱抑素C、超敏C反应蛋白与血尿酸在急性冠脉综合征中的变化探讨[J].海南医学,2011,22(14):98-99. [3]包海林.81例冠心病患者血清胱抑素C检测分析[J].检验医学与临床,2010,7(24):2725-2726.

[4]DandanaA1,Gammoudi I,ChalghoumA,et al.Clinical utility of serum cystatin C in predicting coronary artery disease in patients without chronic kidney disease[J].J Clin Lab Anal,2014,28(3): 191-197.

[5]郭瑞霞,张 晓,朱记法,等.血清胱抑素C水平与冠心病严重程度的关系[J].实用医学杂志,2011,27(24):4432-4434.

[6]Doganer YC,Aydogan U,Aydogdu A,et al.Relationship of cystatin C with coronary artery disease and its severity[J].Coron Artery Dis,2013,24(2):119-126.

[7]林 毅.冠心病患者血浆D-二聚体水平测定的临床意义[J].临床医学,2010,30(10):29-30.

[8]Akgul O,Uyarel H.D-dimer:a novel predictive marker for cardiovascular disease[J].Int J Cardiol,2013,168(5):4930-4931.

[9]张露远,张 炎,周金芳,等.不同溶栓效果患者纤维蛋白原及D-二聚体的动态变化研究[J].海南医学,2014,25(2):203-205.

[10]Cosmi B,Legnani C,Tosetto A,et al.Comorbidities,alone and in combination with D-dimer,as risk factors for recurrence after a first episode of unprovoked venous thromboembolism in the extended follow-up of the PROLONG study[J].Thromb Haemost,2010,103 (6):1152-1160.

Correlation of cystatin C and D-dimer with the lesion extent of coronary heart disease.

I Feng,ZHAO Yan-shu.

Department of Cardiovascular Internal Medicine,Second Xiangya Hospital of Central South University,Changsha 410011,Hunan,CHINA

ObjectiveTo observe the plasmatic cystatin C(Cys C)and D-dimer(DD)level of coronary heart disease(CHD)patients with different lesion extent,and to explore the clinical predictive value of Cys C and DD on CHD lesions.MethodsSeventy-four CHD patients in the department of old cadre between September 2013 and February 2014 were selected.According to the result of coronary angiography,they were divided into One-vessel lesion group(24 cases),Two-vessel lesion group(28 cases)and Three-vessel lesion group(22 cases).According to the Gensini score,they were divided into mild stenosis group(25 cases),moderate stenosis group(20 cases)and severe stenosis group(29 cases).22 CHD suspected cases were enrolled as the control group.The plasmatic Cys C and DD levels were measured by ELISA,and their correlation was analyzed by Pearson.ResultsThe plasmatic Cys C and DD of each CHD group(One-vessel lesion group,Two-vessel lesion group and Three-vessel lesion group)were higher than those of the control group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentrations of Three-vessel lesion group were(1.31±0.28)mg/L and(303.46±41.15)μg/L,both higher than those of the Two-vessel lesion group and One-vessel lesion group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentrations of Two-vessel lesion group were (1.14±0.22)mg/L and(248.63±31.78)μg/L,higher than those of One-vessel lesion group[(0.93±0.17)mg/L and (215.92±32.86)μg/L],P＜0.05.The plasmatic Cys C and DD of mild stenosis group,moderate stenosis group,moderate stenosis group were higher than those of the control group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentration of severe stenosis group were(1.35±0.23)mg/L and(293.50±39.24)μg/L,higher than those of the moderate stenosis group and mild stenosis group(P＜0.05).The plasmatic Cys C and DD concentration of moderate stenosis group were (1.09±0.27)mg/L and(261.12±40.31)μg/L,higher than those of the mild stenosis group[(0.94±0.16)mg/L and (211.59±35.46)μg/L],P＜0.05.Patients'average plasmatic Cys C and DD level were positively correlated with coronary Gensini score(r=0.514,0.476,P＜0.01).And the Cys C level was positively correlated with the DD level(r=0.743,P＜0.01).ConclusionThe plasmatic Cys C and DD level in CHD patients increased significantly,they could increase gradually with the increase of lesion vessel and stenosis and they were positively correlated between the Gensini score of coronary artery.Combined detection of plasmatic Cys C and DD levels could predict the lesion extent of coronary artery stenosis.

Cystatin C;D-dimer;Coronary heart disease;Gensini score

R541.4

A

1003—6350（2014）24—3655—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.24.1424L

2014-06-30)

赵延恕。E-mail：474121494@qq.com