徐文莉，廖长征，陈思祖

（深圳市龙岗中心医院中心实验室，广东 深圳 518116）

N末端脑钠肽前体、淋巴细胞亚群与原发性高血压的相关性研究

徐文莉，廖长征，陈思祖

（深圳市龙岗中心医院中心实验室，广东 深圳 518116）

目的探讨原发性高血压(EH)患者N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)及淋巴细胞亚群等指标变化情况。方法328例高血压确诊患者按照分级标准进行分组，其中EH1级组115例，EH2级组109例，EH3级组104例；以120例同期健康体检者作为对照组。采用电化学发光免疫分析测定NT-proBNP水平和流式细胞仪分析CD3+、CD4+、CD8+、CD19+水平，组间进行比较。结果高血压组血清中NT-proBNP、CD4+/CD8+、CD19+水平较健康对照组明显升高（P＜0.05），其中EH3级组升高最显著；CD3+、CD4+、CD8+细胞明显低于正常对照组(P＜0.05)，EH3级组降低最显著。NT-proBNP水平与CD3+、CD4+、CD8+等指标均呈显著负相关(r=-0.951，r=-0.973，r=-0.955；P均＜0.01），与CD19+细胞（B细胞）、CD4+/CD8+呈显著正相关(r=0.934，r=0.98；P均＜0.01)。结论EH患者的血压的临床分级与NT-proBNP、CD3+、CD4+、CD8+、CD19+的水平密切相关，并可能参与EH的病理生理过程。

原发性高血压；N末端脑钠肽前体；淋巴细胞亚群

我国人群数据监测显示，心脑血管死亡人数占总死亡人数的40%以上，其中高血压是首位危险因素，每年300万心血管死亡中至少一半与高血压有关，但其具有可控性，血压的合理控制将大大减少心脑血管疾病的发生[1]。有研究表明原发性高血压(Essential hypertension，EH)与神经内分泌因素有密切的联系，而脑钠肽(Brain natriuretic peptide，BNP)作为重要神经内分泌因子之一，已日益受到临床工作者的关注。BNP是一种心室激素，其浓度可以反映心室的充盈压，同时，BNP作为心脏旁分泌激素，其浓度目前已经被公认为评估心力衰竭的生物学指标，近几年研究发现BNP与原发性高血压有相关性[2]。近年来的研究表明，细胞免疫功能紊乱是高血压发病机理之一，而免疫功能的紊乱可导致自身免疫反应及炎症反应的发生，其在原发性高血压中发生、发展中起着重要的作用[3]。本文通过对原发性高血压患者血浆BNP水平及淋巴细胞亚群的测定，了解其在该病中的临床价值，以便为临床病情进展、疗效观察提供简单可靠的临床指标。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2011年1月至2013年5月在我院心内科门诊及住院患者328例，男性170例，女性158例，年龄36～77岁，平均(56.7±10.2)岁，所有患者均符合2010年《中国高血压防治指南》的高血压诊断标准。根据该指南中高血压的诊断和临床分级标准进行分类，高血压1级(EH1级)组115例，高血压2级(EH2级)组109例，高血压1级(EH3级)组104例；选择同期来我院的健康体检者120例作为对照组，男性58例，女性62例，年龄45～65岁，平均(54.2±11.0)岁，两组间年龄、性别差异均无统计学意义(P＞0.05)，排除肝、肾功能异常，感染、呼吸衰竭等干扰情况。

1.2 试验方法

1.2.1 血压的测定 用台式水银血压计，平静休息15 min，患者取坐位测量左上臂肱动脉血压，连续测量3次，取其平均值。

1.2.2 NT-proBNP的测定 所有受试者均空腹采血3 ml，及时分离血清，-20℃冰箱保存，测定时室温平衡30 min，采用电化学发光的测定，仪器和试剂为罗氏公司全自动电化学发光仪E170及其配套试剂。

1.2.3 淋巴细胞亚群的测定 荧光标记抗体CD3-FITC、CD4-PE、CD8-PE、CD19-PE、Ig-FITC和Ig-PE以及流式细胞仪Facscalibur购于美国BD公司。受试者空腹静脉采血1 ml(EDTA抗凝)，取100 μl和10 μl单抗混合，室温孵育20 min，加入红细胞裂解液500 μl，震荡混匀、避光15 min，2 h内上流式细胞仪检测。采用Simunset自动软件对样品进行获取及分析。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0软件进行统计学处理，计量资料符合正态分布的采用均数±标准差()表示，采用单因素方差分析(ANOVA)及Pearson相关性分析；不符合正态分布时，可进行对数变换后组间比较采用单因素方差分析或采用Kruskal-Wills H检验，变量进行对数转换，若转换后仍不能满足正态性，则采用Spearman秩相关性分析，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同血压级别NT-proBNP和免疫指标的比较 高血压患者中NT-proBNP随着血压级别的上升而升高，组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。即随EH患者的疾病严重程度而增加，高血压组CD3+、CD4+、CD8+细胞明显低于正常对照组，并随血压级别的升高而降低；CD19+、CD4+/CD8+明显高于对照组，并随血压级别的升高而升高，见表1。

表1 高血压组与正常对照组NT-proBNP及免疫指标的比较()

表1 高血压组与正常对照组NT-proBNP及免疫指标的比较()

注：与对照组，aP=0.000，bP=0.02；与EH1级组比较，cP=0.000，dP=0.04；与EH2级组比较，eP=0.000。

组别对照组EH1级组EH2级组EH3级组F值P值CD19(%) 8.17±0.69 13.4±0.65a19.07±0.79ac25.68±0.50ace40.856 0.000例数120 115 109 104 NT-proBNP(pg/ml) 75.49±1.44 103.28±1.16a193.89±1.25ac295.72±1.75ace57.256 0.000 CD3(%) 68.27±1.10 60.04±1.11a52.35±0.79ac46.61±0.82ace27.357 0.000 CD4(%) 43.14±1.11 38.04±0.73a33.98±1.14ac26.41±0.57ace22.275 0.002 CD8(%) 36.29±0.97 28.13±0.71a22.74±0.92ac1.70±0.08ace35.268 0.000 CD4/CD8(%) 1.19±0.05 1.35±0.06ab1.50±0.08ae15.57±0.70ace17.893 0.003

2.2 NT-proBNP和免疫指标间的相关性 高血压组血浆NT-proBNP水平与CD3+、CD4+、CD8+等指标均呈显著负相关(r=-0.951，r=-0.973，r=-0.955；P均＜0.01)，与CD19+细胞(B细胞)、CD4+/CD8+呈显著正相关(r=0.934，r=0.98；P均＜0.01)。

3 讨论

原发性高血压是常见的慢性病，也是心脑血管疾病最主要的危险因素，其中脑卒中、心肌梗死、心力衰竭及慢性肾脏等主要并发症不仅仅致残、致死率高，而且严重消耗医疗和社会资源，给国家和家庭造成沉重负担。国内外的实践证明，降低高血压患者的血压水平，可以明显减少脑卒中及心脏病事件，显著改善生存质量，有效降低疾病负担，寻找与疾病发生有关的早期预测因素和潜在的病理机制，对于探讨早期诊断和早期干预有着重要的临床意义。

脑钠肽在正常人中的水平很低且非常稳定，在心室负荷过重或心脏扩大时，心肌内储存的脑利钠前肽即被释放并很快分解为具有内分泌活性的BNP，从而很好地反映心室的功能状态[4]。本文结果表明，高血压患者的血浆NT-proBNP明显高于对照组，并随EH1级组、EH2级组、EH3级组的收缩压和舒张压的增加而增加，从而显示高血压患者的血浆NT-proBNP水平与EH患者的血压升高的程度和靶器官的损害程度密切相关，能够反映EH患者的严重程度。

近年来，免疫在原发性高血压发病机制的作用越来越受到人们的重视。研究证实淋巴细胞对体内一切体液和细胞免疫反应类型及强度都有着重要的调节作用。本文研究显示，高血压患者CD4+细胞、CD8+细胞明显低于对照组，而CD4+/CD8+比值明显升高，可见CD8+细胞比CD4+细胞下降更显著，免疫功能的失衡可能导致B细胞功能的增强，进而分泌抗体增强，导致抗原-抗体复合物的形成，激活补体引起血管内皮损伤，参与高血压的发生和发展[5]。研究结果显示B细胞数量明显高于对照组，与上述的推测相吻合。已有文献报道，外周血IgG、C3与原发性高血压的严重程度密切相关[6]。

炎症在高血压的发生、发展以及对靶器官的损害中起着重要作用，而高血压通过其血流动力学刺激又可促进炎性反应。越来越多的证据表明以炎症细胞浸润为特征的血管炎症时高血压进展的重要机制[7-8]，其特征是淋巴细胞和单核细胞在内皮下的聚集，造成免疫功能的紊乱，产生和释放多种活性因子，激活心肌的细胞外基质形成细胞，引起胶原形成及代谢异常，并可导致心肌实质细胞的变性、坏死或亚细胞结构变化等，从而引起一系列病理生理变化，导致心功能的改变，从而引起NT-proBNP分泌的增加，这与本研究的试验结果一致。可见高血压患者存在免疫调节紊乱，在降压的过程中应重视患者体内的免疫调节功能，以有效的降低血压及防治靶器官的损害。

综上所述，NT-proBNP代表高血压对机体的负荷，淋巴细胞可作为高血压患者体内免疫状态的一种客观指标，联合检测可以对疾病病情的发展提供有效的依据。

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Relationship between N-terminal pro-brain natriuretic peptide,lymphocyte subpopulation and essentialhypertension.

XU Wen-li,LIAO Chang-zheng,CHEN Si-zu.Central Laboratory Shenzhen Longgang Center Hospital, Shenzhen 518116,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the change of N-terminal pro-brain natriuretic peptide and lymphocyte subpopulation in essential hypertensive patients.MethodsTotally 328 hypertensive patients were divided into three groups according to the standard of classification:grade 1 hypertensive(115 patients),grade 2 hypertensive(109 patients)and grade 3 hypertensive(104 patients).As the same time 120 normal controls were enrolled as control group. CD3+、CD4+、CD8+、CD19+level and serum NT-proBNP concentration were measured by flow cytometry and electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA).ResultsNT-ptoBNP,CD4/CD8and CD19+levels in 328 patients with EH were significantly higher than those in the controls(P＜0.05)and they were increased with the increases of blood pressure,but CD3+,CD4+and CD8+levels were significantly lower(P＜0.05)than the control and they were decreased with the increases of blood pressure.NT-proBNP level was negatively correlated with CD3+,CD4+and CD8+(r=-0.951,r=-0.973,r=-0.955;P＜0.01),and was positively correlated withand(r=0.934,r=0.98;P＜0.01).ConclusionNT-proBNP,were closely correlated with EH stage and probably involved in the pathophysiological process of EH.

Essential hypertension;N-terminal pro-brain natriuretic peptide(NT-proBNP);Lymphocyte subpopulation

R544.1

A

1003—6350（2014）23—3486—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.23.1362

2013-10-12)

徐文莉。E-mail：gzsd123@163.com