林玉芳　谢倩　陈清西

摘 要 橄榄的苦涩味及药用成分都与多酚类物质密切相关。本试验利用高效液相色谱法测定橄榄果实中的多酚组分。结果表明：橄榄中主要的多酚物质为鞣花酸，其次是芦丁、没食子酸甲酯、金丝桃苷。不同地区、品种（株系）之间多酚组分含量不相同。‘马坑22号和‘霞溪本所含的鞣花酸含量最高，分别达2 484.633、2 214.457 mg/100 g；芦丁含量最高为‘檀头和‘霞溪本，分别为490.137、478.545 mg/100 g。

关键词 橄榄；高效液相色谱；多酚类化合物

中图分类号 S667.5 文献标识码 A

橄榄作为药食两用的果品，其中所含的橄榄多酚是重要的药效功能成分。据悉，橄榄多酚具有解酒护肝、抗菌、抗炎镇痛、抑制血糖升高、增加骨密度、抗乙肝病毒等作用[1]，橄榄中的多酚主要有没食子酸、没食子酸甲酯、短叶苏木酚、金丝桃苷以及鞣质类多酚化合物等。因其自身的营养保健功能，橄榄中的多酚物质已被广泛应用于食品、生化制药以及日常化妆品等各项高科技领域。鞣花酸作为国外正在大力开发的药物和保健食品，具有抗突变、抗癌变、抗菌、抗病毒等作用[2-4]。芦丁被广泛应用在临床诊治中，具有抗脂质过氧化、抗自由基活性、抗急性胰膜炎、抗病毒等作用[5-6]。金丝桃苷是多酚类化合物中的黄酮醇苷类物质，具有广泛的药理作用，包括镇痛作用、抗氧化、保肝以及抗乙肝病毒等，具有良好的发展应用前景，倍受重视[7-9]。

之前关于橄榄多酚的研究仅仅局限于没食子酸总量以及黄酮总量等的研究，除何志勇[10]对一个品种的橄榄多酚进行纯化鉴定外，橄榄各个品种的多酚类化合物组分研究还未曾见过报道。本试验利用HPLC法对福建省若干橄榄品种（株系）多酚类化合物进行分析，确定各个品种中橄榄多酚组分差异，为今后橄榄的开发利用提供针对性的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 材料 从福建省各个地区选取20个橄榄品种（株系），均为露地栽培。选择成熟度一致、无病虫、无畸形的橄榄果实，进行清洗、去核、-40 ℃冷藏等前处理，然后进行真空干燥，干燥果肉用多功能粉碎机磨成粉末，过80目筛，置于-40 ℃冰箱中备用。各个橄榄品种（株系）见表1。

1.1.2 试剂 所用试剂甲醇、乙腈均为色谱纯；水为双蒸水；标样绿原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、鞣花酸、短叶苏木酚、没食子酸、金丝桃苷、山萘酚、没食子酸甲酯、芦丁、槲皮素等均为色谱纯。

1.2 方法

1.2.1 多酚类化合物的提取 精确称取0.1 g橄榄干粉，用1 mL甲醇提取，10 min后于9 000 g，4 ℃下离心15 min，重复3次，合并上清液于5 mL容量瓶中，用甲醇定容，以0.45 μm微孔有机膜过滤备用。

1.2.2 HPLC分析 用高效液相色谱（Hitachi L-2000，四元梯度洗脱，自动进样器）检测橄榄果实多酚类化合物组分。色谱柱：Agilent C18柱（150 mm×4.6 mm），为日立UV-VIS L2419紫外检测器，配有EZ Chrom Elite D-2000工作站。流动相由A、B 2相组成，A相为水/乙酸（100/0.5，V/V），B相为乙腈，流速为1 mL/min，进样量20 μL，洗脱梯度见表2。

1.3 统计分析

试验数据采用Excel与SPSS 17.0软件进行处理。

2 结果与分析

2.1 橄榄多酚组分差异分析

从橄榄酚类化合物的HPLC色谱图（图1、图2）可知，图中显示提取物中有12种酚类组分，其中出峰时间为11.88 min的组分吸收信号最强，在部分品种中，含量高达90.41%，确定为橄榄提取物的主要酚类物质。通过比较橄榄各酚类组分与各个标样的HPLC出峰时间，可以确定出峰时间为11.88 min的酚类组分为鞣花酸，由此初步推断，橄榄中的主要酚类物质为鞣花酸。

从表3的橄榄多酚组分含量可以看出，所测20个品种（株系）中，含量最高的基本都为鞣花酸，在124.43～2 484.63 mg/100 g之间，占总多酚物质的90.41%～17.11%，其中以‘马坑22号和‘霞溪本含量最高，‘南安1号含量最低。其次是芦丁和没食子酸甲酯，含量分别在110.23～490.14 mg/100 g、73.63～185.94 mg/100 g之间。从表3还可以看出，香豆酸、山萘酚和短叶苏木酚在各个品种中含量很少，几乎检测不出；而槲皮素在部分品种中也几乎没有，如‘上丈21号和‘长营株系。各个品种中多酚类组分含量均不相同，所占总多酚比例也不尽相同，由此可以推测，橄榄中所含多酚组分的比例与橄榄口感、风味等关系密切。

2.2 橄榄多酚及品种聚类分析

2.2.1 橄榄多酚类组分聚类分析 根据橄榄多酚组分聚类分析可知（图3），鞣花酸自成一类，无相似项；芦丁和没食子酸甲酯聚为一类，即为相似水平类；其他多酚组分聚为同一类，相似程度较高。

2.2.2 橄榄品种聚类分析 从20个橄榄品种（株系）的聚类距离和先后步骤可以看出（图4），D1和B1（‘马坑22号、‘霞溪本）在各个多酚组分含量上相似水平较高，首先聚为一类；D2和D4（‘惠圆、‘檀头）聚为一类，即二者为相似水平类；其次是A1、A3、C1、D3、D7、E1、C4聚为一类，同为相似类；最后剩下的9个品种聚为一类。

3 讨论与结论

橄榄的苦涩味及药用成分均与其所含多酚类物质密切相关。根据何志勇[10]报道，橄榄果实中主要的酚类化合物为没食子酸，其次为鞣花酸。陈岗[11]报道，橄榄中主要酚类物质是芦丁。本研究发现，橄榄中主要的多酚物质是鞣花酸。关于鞣花，已在石榴皮[12]、葡萄[13]、乌帕[14]以及红木莓、草莓等[15]植物中提取得到。本试验中，‘马坑22号和‘霞溪本所含的鞣花酸含量最高，达2 484.633、2 214.457 mg/100 g，可作为鞣花酸提取来源进行工业化生产。

本试验研究还得出，在20个橄榄品种中，芦丁含量相对较高，最高的为‘檀头和‘霞溪本，含量分别为490.137、478.545 mg/100 g，在所测品种中，所有橄榄的芦丁含量均远高于同是药食两用的桑葚芦丁含量（51.05 mg/100 g）[16]，可见，橄榄也可作为芦丁工业化生产的原料。没食子酸甲酯含量相对较高的是‘上丈21号，为199.527 mg/100 g，最低的是‘惠园，为61.958 mg/100 g，目前对没食子酸甲酯的药效研究较少，主要在工业上进行合成[17]，因此有必要对橄榄中的没食子酸甲酯进行深入研究，以确定其药效作用。

在橄榄中，因品种不同，金丝桃苷含量高低相差较大，最高的可达236.517 mg/100 g（‘攀岐18号），而最低含量仅为12.082 mg/100 g（‘惠圆），可见不同品种之间，金丝桃苷含量差异显著，应根据不同需要对不同品种进行有针对性的开发利用。

不同的橄榄所含的多酚组分不同，即使含量很少的香豆酸、槲皮素、山萘酚以及短叶苏木酚等也都呈现不一样的差异，且各个组分在药理作用上均有所差别，无法判定品种的优劣，应对橄榄的药理及食用价值进行判断，并有针对性地进行分析研究，以确定橄榄今后的加工及药物开发利用方向，为其提供一定的研究基础。目前，关于橄榄中多酚组分的具体药效尚未进行试验认证，因此今后可进一步对橄榄各个多酚组分进行小白鼠试验，以明确橄榄多酚的具体药理作用，为更好地利用其奠定良好的基础。

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