岳 崟，郝 靖，杜天宇，王丽梅

(武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北武汉430023)

紫苏(Perilla frutescens Britt.)属于唇形科紫苏属植物，其梗、叶和果实均可入药。据《本草纲目》记载，紫苏具有行气活血，清热利湿，消痰，降气，平喘，调和中气，益五脏，治霍乱，补虚痨，润肠之功效［1］。紫苏叶具有宣肺化痰，解表散寒，解鱼蟹毒，行气和中，安胎的功效［2］。紫苏还具有很高的利用价值，可食、药两用，具有抗肿瘤、抗微生物、降低血糖、解毒的功效［4，6］，在我国种植广泛，历史悠久。根据紫苏的功能主治，结合中医理论和临床用药，表明紫苏叶有一定的健胃消食作用;但是紫苏叶健胃消食促进肠胃健康的机理尚未明确，也缺乏相应的科学依据。为进一步探讨紫苏叶提高胃肠消化吸收的作用，本文选择紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物，采用动物建模，通过观察计算大鼠小肠碳末推进百分率与胃液总酸排出量来证实紫苏叶的健胃消食、促进肠道蠕动吸收的作用，并探讨紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物中发挥功能的重要成分，为开发紫苏叶解毒消食剂等药品、保健品提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 原料与试剂

紫苏叶，石油醚(A.R)、乙醚(A.R)、95%乙醇(A.R)、A1(NO3)3(A.R)、NaNO2(A.R)、NaOH(A.R)等。

1.1.2 实验动物

SPF级SD大鼠124只，体重为(200±20)g，雌雄各半，华中科技大学同济医学院(实验动物学部)提供，动物许可证号SCXK2010-0009。

饲养条件:饲料为标准大鼠饲料，华中科技大学同济医学院(实验动物学部)提供。独立送风净化笼具IVC，温度维持在18—25℃，相对湿度维持在40-70%，工作照度150—300L×，动物照度15—20L×，昼夜明暗交替时间12/12 h，自由饮食、水。

1.1.3 实验仪器

分析天平，梅特勒-托利多仪器(山海)有限公司出品;超声波破碎仪KQ2200V，昆山市超声仪器有限公司出品;冰箱 三洋科龙SC-230LP，中国广东三洋科龙冷柜有限公司;电热鼓风干燥箱DHG-9145A型，上海一恒科学仪器有限公司出品;水蒸气蒸馏装置，武汉龙翔化玻有限公司;气质联用仪 Agilent 7890A/5975C，美国Agilent公司;紫外可见分光光度计Unico WFZ UV-2100，柯仪器有限公司;旋转蒸发仪RE-52A，海亚荣生化仪器厂;循环水真空泵SHZ-Ⅲ，上海亚荣生化仪器厂;HH-6数显恒温水浴锅，国华电器有限公司出品;恒流泵HL-2，上海青浦沪西仪器厂;微波萃取仪，深圳市科工达设备有限公司;冷冻干燥仪 RLPHA1-4，德国Martin Christ公司。

1.2 实验方法

1.2.1 紫苏叶石油醚提取物的制备

依据《中医药大辞典》中石油醚提取物的制备方法［7］:紫苏叶倒进专用容器，紫苏叶用95%乙醇提取，将其提取物用少量95%的乙醇溶解，然后加入硅藻土进行搅拌至均匀状态，之后将其置于水浴上挥干溶剂，得到硅藻土混合物。然后取针管(玻璃)一支，在针管下部放滤纸，把上一步骤中硅藻土混合物的粉末置于针管中，加入10—20 mL的石油醚匀速流洗，当提取液的颜色接近无色时停止。溶剂浓缩挥发后便得紫苏叶的石油醚提取物。

1.2.2 紫苏叶乙醇提取物的制备

根据邹培标［8］等人的研究方法并结合实验操作将紫苏叶乙醇提取物的制备方法优化为:取干燥的紫苏叶2—5 g，研磨粉碎，用70%乙醇回流提取3次，然后合并过滤液，减压浓缩得到3000 mL过滤液，然后离心，留上清液，乙酸乙酯萃取3次，后合并萃取液，减压浓缩得到紫苏叶乙醇提取物。

1.2.3 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠肠

将64只大鼠随机分为8组(每组8只，灌胃剂量按生药量计算并且由大鼠体重决定):阴性对照组(给药生理盐水)、阳性对照组灌食健胃消食片(1.4 g/kg)，紫苏叶石油醚提取物高剂量组(60 g/kg)、中剂量组(30 g/kg)和低剂量组(15 g/kg)，乙醇提取高剂量组(30 g/kg)、中剂量组(20 g/kg)与低剂量组(10 g/kg)。给药前对各组大鼠进行称重，确定各自灌胃剂量，阴性对照组给予生理盐水、阳性对照组给予健胃消食片，每天给药1次，连续灌胃10 d，最后一天给药后立即称重，小鼠禁食24 h后，用5%的活性阿拉伯胶(0.2 ml/20 g)混悬液灌肠，经过20 min后将其处死，剖腹后取出肠管，铺平，测量幽门至回盲部位与幽门至炭末前沿的距离，用以下公式计算碳末推进率，并分析数据。

1.2.4 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠胃液分泌的影响

将56只SD大鼠随机均分成7组，每组八只，灌胃给药，给药剂量按体重折合。分为:紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物大、中、小剂量组和阴性对照组(灌胃生理盐水)。每天灌胃给药1次，连续6 d。第6 d灌胃结束后，禁食24 h(不禁水)，将大鼠结扎幽门，十二指肠再次给药(1次)，然后缝合大鼠腹壁切口。2 h后，拆线并开腹结扎贲门，取胃并倾出内容物，将内容物离心后记录胃液总量。取离心后的上清液1 mL，加入酚红指示剂1滴，用20 mmol/L的NaOH进行中和滴定，记录消耗的NaOH液量，最后计算总酸度和总酸排出量。

总酸度(nmol/L)=滴定所用NaOH体积×2%.

总酸排出量(μmol/L)=总酸度×每小时胃酸量.

1.3 统计学分析

2 实验结果与分析

2.1 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠肠蠕动的影响

由实验结果可以看出，与阴性对照组相比，阳性对照组、紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物各剂量组大鼠的碳末推进长度与碳末推进百分率均明显增高，并且各剂量组中，紫苏叶石油醚提取物中剂量组与大剂量组以及紫苏叶乙醇提取物高剂量组大鼠的碳末推进长度与碳末推进百分率与阴性对照组相比差异极显著(P＜0.01))。而与阳性对照组相比，只有紫苏叶石油醚提取物中剂量组与大剂量组以及紫苏叶乙醇提取物高剂量组大鼠的碳末推进长度与碳末推进百分率有明显增加。更有意思的是，各剂量组中只有紫苏叶石油醚提取物大剂量组与紫苏叶乙醇提取物低剂量组的大鼠小肠总长度显著长于阴性对照组，表明一定剂量的紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物可以影响小肠长度。实验结果表明紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物可以促进大鼠肠蠕动(见表1)。

表1 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠肠蠕动的影响±s，n=8)

表1 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠肠蠕动的影响±s，n=8)

注:*与阴性对照组比较，有显著性差异(P＜0.05)，＊＊有极显著性差异(P＜0.01);#与阳性对照组比较，有显著性差异(P ＜0.05)。

组别 剂量/g·kg－1 碳末推进长度/cm 小肠总长度/cm 推进百分率/%阴性对照组组1.4 33.68 ±3.40 98.00 ±5.41 34.40 ±4.1阳性对照组 1.4 44.46 ±3.11* 101.40 ±4.62 43.85 ±3.7*石油醚提取物低剂量组 15 71.28 ±4.02＊＊# 99.30 ±5.60 71.78 ±4.6＊＊#石油醚提取物中剂量组 30 64.59 ±2.70＊＊# 98.80 ±3.09 65.37 ±2.9＊＊#石油醚提取物高剂量组 60 44.13 ±5.40* 106.40 ±3.27* 41.48 ±4.7*乙醇提取物低剂量组 10 48.45 ±2.91* 100.60 ±4.16* 48.16 ±3.77*乙醇提取物中剂量组 20 51.40 ±3.40* 99.90 ±3.25 51.45 ±3.08*乙醇提取物高剂量组 30 66.85 ±4.90＊＊# 108.60 ±3.08 61.56 ±3.78＊＊#

2.2 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠胃液分泌的影响

实验结果显示，与阴性对照组相比，各组的胃液总量，除了紫苏叶石油醚提取物低剂量组与紫苏叶乙醇提取物小剂量组没有明显变化外，其余各剂量组大鼠胃液总量均有极明显增加。在各组总酸度的比较中可以看出，与阴性对照组相比，各剂量组的大鼠的胃液总酸度均显著提高，其中紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物各剂量组大鼠的胃液总酸度与阴性对照组相比差异极显著。而在各组大鼠胃液总酸排出量的比较中，只有紫苏叶石油醚提取物中剂量组、大剂量组，紫苏叶乙醇提取物高剂量组、中剂量组极高于阴性对照组，其他剂量组与阴性对照组相比没有显著性差异。

由实验结果可以看出，紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物能够提高大鼠胃液分泌，提高大鼠胃液总量，总酸排出量与总酸度，具有健胃消食的作用。但是值得注意的是，不同剂量的紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠的胃液分泌情况起着不同的作用，这位进一步研究紫苏叶的健胃消食作用提供了依据(见表2)。

表2 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠胃液分泌的影响±s，n=8)

表2 紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物对大鼠胃液分泌的影响±s，n=8)

注:与阴性对照组比较，*P＜0.05差异显著，＊＊P＜0.01差异极显著。

组别 剂量/g·kg－1 胃液总量/mL 总酸度/mmol·L－1 总酸排出量/mmol·L －1阴性对照组1.4 1.21 ±0.22 42.30 ±5.58 35.54 ±5.20石油醚提取物低剂量组 15 1.53 ±0.28 68.45 ±6.18* 41.09 ±4.90石油醚提取物中剂量组 30 3.04±0.31＊＊ 101.46±4.70＊＊ 78.71±4.81＊＊石油醚提取物大剂量组 60 3.76±0.32＊＊ 121.04±4.37＊＊ 86.7±4550＊＊乙醇提取物低剂量组 10 1.53 ±0.18 64.48 ±6.04* 39.98 ±4.20乙醇提取物中剂量组 20 2.33±0.29＊＊ 89.84±5.60＊＊ 85.67±3.71＊＊乙醇提取物高剂量组 30 3.38±0.20＊＊ 92.8±16.4＊＊ 72.08±3.89＊＊

3 讨论

肠胃的运动功能是人体消化系统中主要的生理功能之一。健全的胃肠运动不仅能够运送食糜，推动肠道内的细菌和其产物的排出，而且对胃肠道而言，还能起着非特异免疫的防御作用。医学病例指出，手术、创伤、放疗、化疗、等严重感染的应激状态下，大多数患者常常会出现腹胀腹痛、恶心呕吐等胃肠反应，这种反应属于肠胃动力障碍的表现。对于病人而言，在早期服用药物恢复胃肠道正常功能对其疾病的恢复与预防至关重要。近年来的研究发现，导致胃肠动力障碍的原因很多，促进胃肠动力的西药往往治标不治本，效果欠佳，而中药治疗具有较好的临床效果，尤其是近年来紫苏叶制剂在临床上的应用效果显著，其发展前景非常广阔［9］。紫苏具有很高的利用价值，在我国种植广泛历史悠久。研究显示紫苏具有解表散寒与行气和胃等功效可用于治疗风寒感冒，咳嗽呕吐，妊娠期呕吐和鱼蟹等食物中毒。紫苏叶具有润肠通便，宣肺化痰，解表散寒，健胃健脾之功效，其中发挥作用的关键物质是紫苏叶中的紫苏醛、紫苏酮、香薰酮、紫苏烯、类苯丙醇、反柠檬醛等物质，它们可以通过影响机体的生理功能来影响肠胃排空，蠕动［10］，有研究对紫苏叶中的主要成分进行分析，并且将其归类［11］，并发现其中较为引人注目的是醛酮类物质与亚麻酸［12-13］。由本实验结果看也看出，紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物各剂量组大鼠的小肠碳末推进百分率均显著增高，证明紫苏叶可以促进大鼠肠道蠕动，增强大鼠的健胃消食功效，并且在A组实验中我们发现不同剂量的石油醚提取物与乙醇提取物发挥不同的药效，其中紫苏叶乙醇提取物大剂量组与紫苏叶石油醚提取物中剂量的效果最好。在B组实验中，我们看出只有紫苏叶石油醚提取物大、中剂量组与紫苏叶乙醇提取物的大、中剂量组发挥极好的效果。总结实验结论，说明一定剂量的紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物能够提高大鼠的肠胃功能，而紫苏叶石油醚提取物与乙醇提取物含0.3%—0.7%的挥发油，其中主要成分为柠檬烯、紫苏醛与紫苏酮等，它们是发挥作用的关键成分，但是其如何促进胃肠健康，还有待进一步进行研究。目前紫苏叶的提取物现已被广泛应用于医药、保健、美容、食品和防腐剂等行业，其前景极其可观，本实验不仅为进一步研究紫苏叶的药效量效关系提供了依据，为以后深入研究其机制提供理论依据，也为研究新的健胃消食药物、保健品等提供研究基础。

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