覃喜军涂冬萍黄 杰马小军,韦荣昌,莫长明潘丽梅. 中国医学科学院, 北京协和医学院药用植物研究所（北京 0093）；. 中国医学科学院药用植物研究所广西分所; 3 中国医学科学院药用植物研究所云南分所; 广西中医药大学

8-OH-DPAT、达泊西汀和甲基安非他明对雄性大鼠性行为的影响

覃喜军1涂冬萍1黄 杰2,4马小军1,3*韦荣昌1,2莫长明2潘丽梅2
1. 中国医学科学院, 北京协和医学院药用植物研究所（北京 100193）；2. 中国医学科学院药用植物研
究所广西分所; 3 中国医学科学院药用植物研究所云南分所; 4 广西中医药大学

目的探讨3种试剂8-OH-DPAT、达泊西汀和甲基安非他明对雄鼠性行为的影响。方法将120只具有射精经历的雄鼠随机分为 4组，每组30只，分别为对照组、8-OH-DPAT、达泊西汀和甲基安非他明给药组。分别给予雄鼠注射生理盐水、8-OH-DPAT（0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg 腹腔注射）、达泊西汀（30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg 腹腔注射）、甲基安非他明（0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg 腹腔注射）一次，注射时间分别为实验前20min、1h、15min。然后与发情良好的雌鼠1:1合笼，用摄像机录像观察并记录他们发生性行为特征指标。各组实验重复3次。结果与对照组相比，0.5mg/kg、1.0mg/kg 8-OH-DPAT有显著性差异（P＜0.05），减小骑跨、插入、射精潜伏期及射精后间隔期，增加射精次数和提高交配效率，进而促进雄鼠性行为。达泊西汀各剂量组均对雄鼠射精有显著性的抑制作用（P＜0.05），延长射精潜伏期及射精后间隔期，减少射精次数及降低交配效率。0.5mg/kg安非他明对雄鼠性行为有显著性的促进作用（P＜0.05），减小骑跨、插入潜伏期和射精后间隔期，增加射精次数，但1.0mg/kg安非他明延缓雄鼠射精，而到2.0mg/kg时几乎完全抑制雄鼠性行为。结论 5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT促进雄鼠射精。选择性5-HT再摄取抑制剂（SSRI）达泊西汀延迟射精的发生，可用于早泄的治疗。精神兴奋剂甲基安非他明对性行为的影响与剂量有关。

8-OH-DPAT; 达泊西汀; 甲基安非他明; 大鼠; 性行为, 动物

5-羟色胺受体激动剂和选择性5- 羟色胺再摄取抑制剂（SSRI ）类抗抑郁药无论是对男性射精障碍还是两性性高潮都有明显的作用和影响[1]。8-OH-DPAT是5-羟色胺1A受体特异性激动剂。8-OH-DPAT减少雄鼠插入次数和减小射精潜伏期，促进雄性雄鼠射精[2-4]。其作用机制尚不明确，已知8-OH-DPAT刺激（突触前，抑制性）5-羟色胺1A受体，可阻碍5-羟色胺释放进入突触，促进射精[5]。达泊西汀是一个新型短效的选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（SSRI），用于治疗早泄。该药物的作用机制被认为是神经元的5-羟色胺再摄取抑制及5-羟色胺的活性增强[6]。达泊西汀具有独特的药代动力学和药效学特点，在很短的时间内（大约1h）血药浓度达到最大，且迅速消除（30mg和60mg初始半衰期为1.2h），过24h后其血药浓度小于峰值的5%[7]。当早泄的男性慢性服用达泊西汀时，射精延迟[8]。甲基安非他明，即甲基苯丙胺，俗称“冰毒”，是一种高度上瘾的精神兴奋剂。据吸毒者的报告认为注射或者吸食冰毒会增强性欲、性唤起和性快感[9-11]。然而，长期吸取冰毒也可以导致男性性功能下降，结果导致无法完全勃起，射精和性高潮延迟[12,13]。此外，冰毒的滥用通常与抑制性行为或者性冲动有关[9,14]，以及增加HIV感染有关[14,15]。最新的研究表明，低剂量的冰毒不会干扰性功能，但也许会导致性行为的不适应[16]。这3种试剂都是与参与性行为调节最主要的两种神经递质多巴胺和5-羟色胺紧密联系的。因此，研究这3种试剂的药理对人类的生殖生理具有重要的意义。

虽然国外对这3种试剂影响性行为的研究已有些报道，但主要是在慢性给药方面的研究，所用的剂量皆有不同，而一次性给药对性行为是否有影响却缺乏研究，而且国内尚无中文文章报道此类研究内容。因此，本实验将这3种试剂进行一次性给药，研究对雄鼠性行为是否影响以提供一定的医学用药依据及借鉴。

材料和方法

一、材料

（一）实验动物

9周龄已具备射精能力雄鼠120只，平均体重（300±20）g，雌鼠120只，平均体质量（220±20）g（北京维通利华实验动物技术有限公司提供）。所有动物均分笼饲养于标准动物房，以国家标准啮齿类动物饲料饲养，自由饮食，给予规律光照（12h:12h），室内相对湿度45%～50%，室温（22±2）℃。

（二） 药品和器械

苯甲酸雌二醇2mg/mL、黄酮体20mg/mL（浙江仙琚制药股份有限公司生产，药品准字号分别为H41021503和H41021493），8-OH-DPAT（8-hydroxydi-propylaminotetralin，sigma公司生产），达泊西汀(Dapoxetine，(+)-(S)-N, N-dimethyl-(a)-[2-(1-naphthalenyloxy) ethyl]-naphthalenyloxy) ethyl]-benzenemethanamine hydrochloride，Sigma公司生产)，盐酸甲基安非他明（Methamphetamine，中国药品食品鉴定研究院提供）。高清晰数码录像系统（DVR H.264），行为学观察笼（药用植物研究所生理教研室自制），常规手术器械一套。

二、方法

（一）建立雌鼠发情模型

根据文献给雌鼠进行去势手术。在雌鼠去势手术2周后，分别在交配实验前48h和4h皮下注射苯甲酸雌二醇（estradiol benzoate）20μg 和黄体酮（progesterone）500μg（分别以0.1mL的香麻油溶解，并且混合后在60℃水浴加热1h）来诱导雌鼠发情[17,18]。

（二）性行为观察

实验随机分为4个组：8-OH-DPAT组、达泊西汀组、安非他明组和对照组。时间安排在晚上19：00～22：00，行为观察室用红色的灯光照明，调好灯光和录像。给予雄鼠交配前20min腹腔注射8-OH-DPAT（0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg）；1h腹腔注射达泊西汀（30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg）；15min腹腔注射甲基安非他明（0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg）；对照组注射生理盐水，各组均注射1次。将雄鼠放入观察笼适应15min，然后将已发情良好的雌鼠轻轻地放入笼中（1:1合笼），观察其在40min内的交配行为（如雄鼠10min后还无性行为不作记录）。参考Anders和Lumley等文献，主要观察并记录各组雄鼠的骑跨潜伏期（Mounting Latency, ML）、插入潜伏期（Intromission Latency, IL）、射精潜伏期（Ejaculation Latency, EL）、射精后间隔期（post ejaculatory interval latency, PEI）、骑跨次数（Mounting Frequency, EF）、插入次数（Intromission Frequency, IF）、射精次数（Ejaculation Frequency, EF）和交配效率（Copulation efficiency，射精次数/插入次数）[17,19]。各组实验重复3次。综合Anders、Lumley和田二坡等实验，对雄鼠性行为特征如下描述：骑跨，雄鼠嗅雌鼠的肛门生殖器区，然后骑跨雌鼠但阴茎还无插入或第一次插入雌鼠阴道；插入，雄鼠阴茎插入雌鼠阴道，此时雄鼠的背成弓形，前爪紧紧抱着雌鼠的背部，插入一次或连续两次后下来，动作迅速，多次插入，每次插入后都会舔自己的阴茎；射精，多次插入后，雄鼠出现剧烈的颤动及阴茎深入插入，前肢紧紧抱着雌鼠过程持续达数秒钟然后慢慢张开，下来后会趴着不动；射精后雄鼠会有一个长达数分钟的不应期[17-19]。

三、统计学分析

结 果

一、8-OH-DPAT对雄鼠性行为的影响

由表1可知，与对照组相比，腹腔注射0.5mg/kg、1mg/kg 8-OH-DPAT均使雄鼠骑跨潜伏期、插入潜伏期和射精潜伏期显著性地缩短，骑跨次数和插入次数减少，雄鼠射精次数与对照组相比增加了一倍，交配效率也提高了将近一倍，各组射精后间隔期都无显著性差异。然而2mg/kg 8-OH-DPAT组的雄鼠骑跨次数明显地减少，射精潜伏期和射精后间隔期减小，其他却无明显的差异。

二、达泊西汀对雄鼠性行为的影响

由表2可知，与对照组相比，60mg/kg达泊西汀对雄鼠性行为的影响最为显著：延长骑跨、插入、射精潜伏期和射精后间隔期，减少射精次数，而骑跨和插入次数无明显影响。但是30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg达泊西汀均使雄鼠交配效率降低了。

表2 各组雄鼠注射达泊西汀后性行为的比较

三、甲基安非他明对雄鼠性行为的影响

由表3可知，与对照组相比，0.5mg/kg甲基安非他明促进雄鼠性行为，骑跨、插入和射精潜伏期、射精后间隔期都有明显的缩短，骑跨和射精次数增加。随着剂量加大，安非他明会抑制雄鼠性行为，1.0mg/kg的剂量使雄鼠射精潜伏期明显延长，而到2.0mg/kg剂量时，雄鼠几乎不会和雌鼠发生交配行为。此外，对照、0.5mg/kg、1.0mg/kg 3个组的雄鼠交配效率均没有显著性差异。

表3 各组雄鼠注射甲基安非他明后性行为的比较

讨 论

8-OH-DPAT是5-羟色胺1A受体激动剂的一种。5-HT是一种重要的单胺神经递质，其和另外一种神经递质多巴胺似乎都参与调节性高潮及两性动物的性行为，5-羟色胺似性行为的刹车[5]。关于8-OH-DPAT相关的研究已有些报道，8-OH-DPAT（0.25mg/kg S.C.）减少雄鼠射精前插入次数和缩短射精潜伏期而促进性行为[20]。如果直接向雄鼠内侧视前区进行显微注射8-OH-DPAT，也会减小骑跨、射精潜伏期和射精后间隔期[3]。本实验表明8-OH-DPAT（0.5mg/kg、1mg/kg 腹腔注射）对雄鼠射精行为具有显著性的影响，通过减少射精前插入次数、数量和射精潜伏期从而促进雄鼠射精，且提高了交配效率，而剂量2.0mg/ kg时，与对照组相比，除了骑跨次数射精潜伏期和射精后间隔期外，其余各项都无明显差异。由此可知，随着剂量的增大，8-OH-DPAT的药效作用效果反而会减小。

使用选择性5-羟色胺重摄取抑制剂（SSRIs）将提高突触内5-羟色胺水平抑制射精，可能还抑制性驱力[21]，由此SSRIs类药物常用于临床治疗早泄。目前我们实验数据表明，在给予正常雄鼠腹腔注射60mg/kg达泊西汀后，雄鼠性行为表现为：骑跨、插入、射精潜伏期及射精后间隔期延长，射精次数减少。2012年Clement等给予早泄模型雄鼠急性口服300mg/kg达泊西汀，首次证明了达泊西汀急性疗效可以延迟早泄的雄鼠射精，此外还发现达泊西汀延缓射精的作用与降低射精相关脑部网络的神经元活动有关，如Fos表达[8]。达泊西汀通过抑制5-HT转运体，能有效地抑制5-HT摄取，提高突触间隙5-HT浓度，从而抑制射精。但是临床试验发现达泊西汀对患者有不良反应，多数是中度[22]。由此看来，本组实验的雄鼠在注射达泊西汀后，交配效率降低可能是此原因造成的。

由安非他明实验可知，雄鼠交配前15min腹腔注射一次，0.5mg/kg低剂量促进雄鼠射精，表现为骑跨、插入、射精潜伏期和射精后间隔期减小，然而随着剂量加大，1.0mg/kg安非他明具有明显的抑制性行为作用，到2.0mg/kg时，雄鼠几乎不会与雌鼠发生交配行为，而低剂量安非他明对雄鼠阴茎勃起、骑跨和插入次数无影响作用。Frohmader等[16]的研究已表明，在交配实验前30min腹腔注射安非他明会降低雄鼠交配数量及减小性行为起始潜伏期。给予无性经历的雄鼠反复注射d-amphetamine（1.5mg/kg，IP）10次，3周注射药后，经过处理的雄鼠表现为骑跨、插入潜伏期缩短及交配比率升高，发生性行为加速[23]。另外，Meth使用者（男性或女性）报告称吸食冰毒可增强性欲、性奋和性快感[9]。甲基安非他明增加多巴胺的传递是通过阻断多巴胺转运及增加囊泡多巴胺的释放来实现的，然而安非他明剂量越大，就会产生过多的多巴胺，反而会抑制雄鼠性行为[16]。因此，在一次性注射2.0mg/kg安非他明后，几乎所有雄鼠都不与雌鼠发生性行为。

综上所述，8-OH-DPAT促进雄鼠发生性行为，达泊西汀延迟雄鼠射精，而剂量低的甲基安非他明促进雄鼠性行为，剂量大则会抑制性行为。

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（2014-05-20收稿）

Effects of 8-OH-DPAT, dapoxetine and methamphetamine on sexual behaviors of male rats

Qin Xijun1, Tu Dongping1, Huang Jie2,3, Ma Xiaojun1*, Wei Rongchang1,2, Mo Changming2, Pan Limei2
1. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Science , Peking Union Medical College, Beijing 100193, China; 2 Guangxi Branch of Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Science; 3. Yunnan Branch of Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Science; 4 Guangxi University of Chinese Medicine

Ma Xiaojun, mayixaun10@163.com

ObjectiveTo investigate the effects of 8-OH-DPAT,Dapoxetine and Methamphetamine on sexual behavior of male rats.MethodsOne hundred and twenty adult male rats who have experienced ejaculation were divided into four groups includingthe control(30 rats), 8-OH-DPAT group(30 rats), Dapoxetine group(30 rats) and Methamphetamine groups(30 rats), rats in which group respectively received one time injection of 0.9% sodium chloride, 8-OH-DPAT (0.5mg/ kg, 1.0mg/kg, 2.0mg/kg S.C.), Dapoxetine (30mg/kg, 45mg/kg, 60mg/kg S.C.), Methamphetamine (0.5mg/kg, 1.0mg/kg, 2.0mg/kg), and the injection time points were set at 20min, 1h, 15min before experiment. Then male rats were lived with good estrus female mate, sex characteristic index was recorded by a video camera. Each group experiment was repeatedthree times.ResultsCompared with control group, 0.5mg/kg and 1.0mg/kg 8-OH-DPAT by intravenous injection both existed in signif cant difference (P<0.05). They produced facilitation of the male rat sexual behavior, characterized by a decrease in mount, intromission, ejaculation latency and post-ejaculatory interval, by increase in ejaculation frequency and improvement in copulation eff ciency; All doses of Dapoxetine had signif cant inhibition to ejaculation in male rats (P<0.05), as evidenced by extension in ejaculation latency and post-ejaculatory interval, reduction in ejaculation frequency and copulation eff ciency; Methamphetamine (0.5mg/kg S.C.) promoted remarkably sexual behavior in male rats (P<0.05), as observed by decrease in mount, intromission, ejaculation latency and post-ejaculatory interval, increase in mount and ejaculation frequency. However, 1.0mg/kg Methamphetamine delayed ejaculation and 2.0mg/kg Methamphetamine almost completely inhibited sexual behavior in male rats.ConclusionThe agonist of 5-HT1A 8-OH-DPAT facilitates and serotonin reuptake inhibitor (SSRI) dopoxetine delays ejaculation in male rat, which the latter can be used for treatment in premature. The effects of psychostimulant Meth amphetamine on sexual behavior in male rat are does-dependent.

8-OH-DPAT; Dapoxetine; Methamphetamine; rats; sexual behavior, animal

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.09.002

R 339.2

*通讯作者, E-mail: mayixaun10@163.com