王立英 刘伟 唐志琴 段继慧

抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病诊断中的价值

王立英 刘伟 唐志琴 段继慧

作者单位：300192 天津市，天津市第一中心医院检验科

目的 分析自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）患者抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）谱检测结果，评价ANA谱在诊断AID中的应用价值。方法选择2012年5月－2013年5月于我院就诊的AID患者513例，非AID患者353例，并对其ANA谱的检测结果进行回顾性分析。结果系统性红斑狼疮组抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗SM抗体、抗SSA抗体、抗rRNP抗体阳性率均高于对照组，且差异均有统计学意义（P均<0．05）；混合性结缔组织病组抗U1RNP抗体、抗SSA抗体阳性率均高于对照组，且差异均有统计学意义（P均<0．05）；干燥综合征组抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性率均高于对照组，且差异均有统计学意义（P均<0．05）；进行性系统性硬化病组抗SCL－70抗体、抗CENP－B抗体阳性率均高于对照组，且差异均有统计学意义（P均<0．05）；多发性肌炎／皮肌炎组抗JO－1抗体阳性率高于对照组，且差异有统计学意义（P<0．05）。当抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗rRNP抗体和抗dsDNA抗体同时阳性时，系统性红斑狼疮组阳性率显著高于混合性结缔组织病组，且差异有统计学意义（P<0．05）。结论ANA谱检测对AID的诊断及鉴别诊断有重要价值。

自身免疫性疾病；抗核抗体谱；诊断

自身免疫性疾病（autoimmune disease，AID）是一种与自身免疫密切相关，血清中可出现多种自身抗体并由此引起多系统多脏器受累的多样化疾病，又称风湿性疾病。如系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE），混合性结缔组织病（mixed connective tissue disease，MCTD），干燥综合征（Sjogren＇s syndrome，SS），进行性系统性硬化病（progressive systemic sclerosis，PSS），多发性肌炎／皮肌炎（polymyositis and dermatomyositis，PM／DM）等［1］。AID临床表现错综复杂，任何年龄均可发病，发病过程中常导致组织和器官的损伤。AID患者在细胞免疫和体液免疫方面都有很多异常，多种自身抗体的出现对AID的发病和诊断具有重要意义，有些自身抗体不仅存在于一种AID中，也可存在于几种AID中［2，3］。检测这些自身抗体有助于AID的诊断和鉴别诊断，本文研究对2012年5月至2013年5月我院513例AID患者血清中的多种自身抗体检测结果进行回顾性分析，以探讨抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）谱对不同AID的诊断及鉴别诊断价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料选取2012年5月－2013年5月于我院就诊的AID患者513例，女457例，男56例；年龄15～79岁，平均年龄（42．3±11．1）岁。其中SLE患者91例，MCTD患者319例，SS患者77例，PSS患者5例，PM／DM患者21例，每种疾病诊断均符合美国风湿病协会诊断标准［4］。对照组选取我院同期非AID住院患者353例，女122例，男231例；年龄17～85岁，平均年龄（46．7±13．2）岁。其中不同肾病患者109例，不同血液病患者116例，皮肤病患者63例，甲状腺疾病患者37例，糖尿病患者18例，慢性肝炎患者10例。

1.2 方法

1.2.1 标本采集与分离采集所有受试者清晨空腹静脉血3 ml，静置30 min后，以离心半径10 cm，3500 r／min离心8 min分离血清。

1.2.2 ANA谱检测ANA谱检测采用欧蒙免疫印迹法，试剂盒为德国欧蒙公司生产，严格按照操作说明书进行检测。首先，按比例稀释血清进行抗原抗体反应，然后加入酶标抗体进行反应，最后加入显色剂显色，结果以出现一条黑色标志线判为阳性。

1.3 统计学处理采用SPSS 19．0统计软件对数据进行分析，计数资料比较采用卡方检验，以P＜0．05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同AID组患者与对照组患者ANA谱检测结果91例SLE患者抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗SM抗体、抗SSA抗体、抗rRNP抗体阳性率分别为46．2%（χ2＝152．986）、37．4%（χ2＝121．343）、35．2%（χ2＝122．474）、19．8%（χ2＝67．141）、60．4%（χ2＝133．904）、28．6%（χ2＝78．116）高于对照组，差异均有统计学意义（P均＜0．05）。319例MCTD患者抗U1RNP抗体、抗SSA抗体阳性率分别为48．9%（χ2＝207．408）、32．0%（χ2＝63．928）高于对照组，差异均有统计学意义（P均＜0．05）。77例SS患者抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性率分别为75．3%（χ2＝182．543）、39．0%（χ2＝105．651）高于对照组，差异均有统计学意义（P均＜0．05）。PSS组5例患者抗SCL－70抗体、抗CENP－B抗体阳性率分别为40．0%（χ2＝93．589）、20．0%（χ2＝12．743）高于对照组，差异均有统计学意义（P均＜0．05）。21例PM／DM患者抗JO－1抗体阳性率为19．0%（χ2＝42．886）高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05），见表1。

2.2 抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗rRNP抗体同时阳性时，SLE组与MCTD组阳性结果比较当抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗rRNP抗体四种抗体同时阳性时，SLE组阳性率显著高于MCTD组阳性率，差异有统计学意义（χ2＝29．666，P＜0．05），见表2。

3 讨论

AID是一种与自身免疫关系密切的疾病，在患病过程中，既有T细胞参与的细胞免疫，也有B细胞活化产生的体液免疫，多种自身抗体的出现使其临床表现复杂多样，寻找与AID诊断密切相关的血清学指标十分重要。ANA谱正是对血清中的多种自身抗体进行检测，目前，ANA谱已包括抗细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞分裂周期蛋白等不同临床意义的三十余种自身抗体［5］。ANA见于多种AID，因此，检测ANA谱对AID的诊断及鉴别诊断具有重要意义及应用价值。

表1 不同AID组患者与对照组ANA谱阳性率检测结果比较［n（%）］

表2 SLE组与MCTD组抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗rRNP抗体同时阳性的阳性率比较［n（%）］

SLE患者免疫调节异常，在细胞凋亡过程中，吞噬细胞不能完全吞噬染色质断裂所释放的核酸，从而可产生多种ANA。本文研究结果显示，SLE患者多种自身抗体阳性率均高于对照组，且差异有统计学意义，与上述观点一致。抗SM抗体是酸性糖蛋白，几乎仅见于SLE患者血清中，因其特异性高，是目前公认的诊断SLE的血清标志性抗体，阳性率为5%～30%［6］。本文研究结果显示，仅SLE组抗SM抗体阳性率为19．8%，其余AID组均为阴性，表明抗SM抗体对SLE的诊断具有较高的特异性。抗dsDNA抗体是SLE高度特异性抗体，已作为SLE的诊断标准之一［5］。本文研究结果显示，SLE组抗dsDNA抗体阳性率为46．2%，显著高于对照组，抗dsDNA抗体的表达也可随有效药物治疗后降低甚至转阴。抗核小体抗体在SLE患者血清中为主要自身抗原，近年的研究［7］已得到证实，SLE患者核小体过度释放，不但使同源B细胞产生抗核小体抗体，而且还可引起抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体的形成。有研究［8］表明，抗核小体抗体检测对SLE的诊断具有越来越重要的意义。本文研究结果显示，抗核小体抗体阳性率在SLE组中最高，为35．2%，其次为MCTD组（8．5%）。本文研究还发现，抗核小体抗体阳性可出现在抗dsDNA抗体检测阴性患者血清中，也可出现在抗SM抗体、抗组蛋白抗体检测为阴性的患者血清中，提示抗核小体抗体在疾病的诊断中可以弥补其他抗体的不足。

研究［9］表明，抗rRNP抗体与中枢神经系统、肾脏受累有关。动物实验［10］表明，抗dsDNA抗体、抗核小体抗体与早期狼疮肾炎的形成有密切关系。抗组蛋白抗体虽不具有诊断特异性，但有学者［11］认为可参与狼疮肾炎的发病。由本文研究结果可以看出，抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗rRNP抗体、抗dsDNA抗体四种抗体同时阳性出现在SLE组的几率比MCTD组高出很多，预示SLE患者发生狼疮肾炎的可能性较高。这与学者Bruner等［12］的研究报道相一致。

本文研究结果显示，抗U1RNP抗体阳性率在MCTD组为48．9%，SLE组为28．6%，SS组为6．5%，PM／DM组为4．8%，表明抗U1RNP抗体是MCTD的特异性抗体，阳性率最高，同时，其对SLE诊断也具有一定辅助意义。

抗SSA抗体、抗SSB抗体是SS的特异性抗体，本文研究结果显示，抗SSB抗体阳性率在SS组最高为39．0%，抗SSA抗体在SS组、SLE组阳性率分别为75．3%、60．4%，与陆俊忠等［13］报道抗SSA抗体阳性率在SS组、SLE组中分别为72．5%、64．0%，抗SSB抗体在SS组中为42．5%的结果基本一致，说明抗SSB抗体是SS特异性抗体。抗SSB抗体仅在少数SLE患者中出现，阳性率为10%～15%。本文研究中，SLE组抗SSB抗体阳性率为9．9%。抗SSA抗体与抗SSB抗体常同时检测出，联合检测对提高SS的诊断有重要意义。

本文研究结果显示，PSS组抗SCL－70抗体阳性率为40．0%，在其他AID组和对照组极少阳性，表明抗SCL－70抗体是PSS标志性抗体［5］，提示抗SCL－70抗体检测对PSS诊断有重要价值。本文研究中PSS组抗SCL－70抗体阳性率结果低于文献［14］报道的66．7%，考虑可能与本文研究样本量较少有关，应加大样本量进行进一步检测。抗CENP－B抗体是局限型PSS特异性抗体，阳性率平均为30%，在其他AID阳性率小于5%［15］。本文研究结果显示，PSS组抗CENP－B抗体的阳性率为20．0%，而SLE组、MCTD组、SS组阳性率均小于5%，需要特别指出的是抗CENP－B抗体与抗SCL－70抗体很少同时检测出，抗CENP－B抗体也不能用于弥漫性硬皮病的诊断。

抗JO－1抗体多为PM／DM的血清标志性抗体，阳性率为20%～30%，抗体的效价与疾病的活动性相关。本文研究结果显示，PM／DM组抗JO－1抗体阳性率为19．0%，其他AID组几乎阴性，提示抗JO－1抗体对PM／DM的诊断具有较高的特异性。

总之，靶抗原的不同造成多种自身抗体的出现，ANA谱检测十多种自身抗体的高表达对帮助诊断AID提供了依据，具有很好的应用价值。有些自身抗体可存在于几种AID中，联合检测可提高试验的敏感性和阴性预测值，可提高诊断准确率。本文研究血清ANA谱检测仅是自身抗体中的一小部分，正确认识ANA系列中每一项抗体的价值意义，对AID的诊断及鉴别诊断具有重要的指导作用。

1 叶任高，陆再英，主编．内科学．第5版．北京：人民卫生出版社，2001，891－892．

2 Heidenreich U，Mayer G，Herold M，et al．Sensitivity and specificity of autoantibody tests in the differential diagnosis of lupus nephritits．Lupus，2009，18：1276－1280．

3 吴东海．风湿病的实验室检查．中华内科杂志，1998，37：353－354．

4 叶冬青，主编．红斑狼疮．第1版．北京：人民卫生出版社，2006，480－504．

5 Tang X，Huang Y，Deng W，et al．Clinical and serologic correlations and autoantibody clusters in systemic lupus erythematosus：a retrospective review of 917 patients in South China．Medicine（Bactimore），2010，89：62－67．

6 葛文亮．抗核抗体谱的检测在自身免疫性疾病诊断中的价值．放射免疫学，2008，21：383－384．

7 Bruns A，Blass S，Hausdorf G，et al．Nucleosomes are major T and B cell autoantigens in systemic lupus erythematosus．Arthritis Rheum，2000，43：2307－2315．

8 马悦，邓春艳，徐国莉，等．抗核小体抗体在系统性红斑狼疮诊治中的应用价值．2008，12：135－136．

9 郭辉，李荣山，罗静．抗核小体抗体与抗双链DNA在狼疮肾炎血清的表达及其临床意义．临床医药实践，2009，18：814－816．

10 张道强，谭建华．抗核抗体及特异性抗核抗体谱检测在自身免疫性疾病中的意义．医学检验与临床，2009，20：59－61．

11 徐兆珍，贾秀志．抗核抗体系列检测对狼疮性肾炎进行鉴别诊断的临床意义．2011，34：73－76．

12 Bruner BF，Guthridge JM，Lu R，et al．Comparison of autoantibody specifities between traditional and bead－based assays in a large diverse collection of patients with systemic lupus erythematosus and family members．Arthritis Rheum，2012，64：3677－3686．

13 陆俊忠，付启云，张迎梅，等．抗核抗体、抗ENA抗体谱联合检测对诊断弥漫性结缔组织病的意义．中国实验方剂学，2011，17：238－239．

14 何建伟，李静，程江，等．抗核抗体谱检测在弥漫性结缔组织病诊断中的价值．中国全科医学，2011，14：1968－1969．

15 Mahler M，You D，Baron M，et al．Anti－centromere antibodies in a large cohort of systemic sclerosis patients：comparison between immunofluorescence，CENP－A and CENP－B ELISA．Clin Chim Acta，2011，412：1937－43．

（本文编辑：陈淑莲）

The value of antinuclear antibody series in autoimmune diseases diagnosis

WANG Li－ying，LIU Wei，TANG Zhi－qin，et al．Department of Clinical Laboratory，Tianjin First Center Hospital，Tianjin 300192，China

ObjectiveTo evaluate the value of antinuclear antibody（ANA）series tests in the diagnosis of autoimmune diseases（AID）．Methods513 cases AID patients and 353 cases without AID patients were selected from May 2012 to May 2013．And results of ANA series tests in these patients were analyzed retrospectively．ResultsThe positive rates of anti－dsDNA antibody，anti－histone antibody，anti－nucleosomes antibody，anti－SM antibody，anti－SSA antibody，anti－rRNP antibody in systemic lupus erythematosus（SLE）group were all higher than those of control group，and the differences all had statistical significance（Pall＜0．05）．The positive rates of anti－U1RNP antibody and anti－SSA antibody in mixed connective tissue disease（MCTD）were all higher than those of control group，and the differences all had statistical significance（Pall＜0．05）．The positive rates of anti－SSA antibody and anti－SSB antibody in primary Sjogren＇s syndrome group，and anti－SCL－70 antibody and anti－CENP－B antibody in progressive systemic sclerosis group，and anti－JO－1 antibody in polymyositis and dermatomyositis group were all higher than those of control group，and the differences all had statistical significance（Pall＜0．05）．The positive rate of anti－histone antibody，anti－nucleosomes antibody，anti－rRNP antibody and anti－dsDNA antibody all together positive in SLE group was higher than that of MCTD group，and the difference had statistical significance（P＜0．05）．ConclusionANA series tests have great significance in the discrimination diagnosis and diagnosis of the AID．

Autoimmune disease；Antinuclear antibody series；Diagnosis

10.3969／j.issn.1674－7151.2014.02.006

2014－04－01）