大肠杆菌Nissle 1917鞭毛蛋白部分高变区功能初步研究
2014-04-13朱国强
杨 颖,朱 军,朱国强
(1.扬州大学兽医学院,扬州 225009;2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)
大肠杆菌Nissle 1917鞭毛蛋白部分高变区功能初步研究
杨 颖1,2,朱 军1,2,朱国强1,2
(1.扬州大学兽医学院,扬州 225009;2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,扬州 225009)
初步研究大肠杆菌Nissle 1917(E. coli Nissle 1917,EcN)鞭毛蛋白(Flagellin, FliC)高变区的功能,为探讨其作为表面展示系统的可行性打下基础。以EcN无质粒克隆(EcN was cured of its 2 cryptic plasmids pMUT1 and pMUT2 resulting in EcNc)为实验菌株,分别构建2个鞭毛蛋白基因(f iC)高变区859-888位、829-858位的缺失突变株和回补菌株。分析突变区域对EcNc的生长性能、生化特性、运动性及抗原性等方面的影响。结果显示:EcNc、两个缺失株和回补株的生长特性无明显差异,且三者生化试验结果一致。缺失突变株在半固体培养基上不能运动,而回补株均恢复了原运动性;缺失突变株均不与H1单因子血清发生凝集,而互补菌株均能产生与EcNc一致的凝集反应。表明高变区的这两个区域尽管不影响菌株的生长性能和生化特性,但与EcN的运动性及抗原性密切相关。这为进一步探索EcN鞭毛展示技术的研究提供了一定的数据。
大肠杆菌Nissle 1917;鞭毛蛋白;高变区
鞭毛蛋白(flagellin, FliC)是鞭毛的主要结构蛋白,不同血清型大肠杆菌中的fliC基因有差异。FliC N端和C端高度保守,存在于鞭毛丝的轴心,是鞭毛发挥佐剂活性的重要部位;而中间区域暴露于鞭毛表面,在长度和组成上呈现高度变化,形成不同的抗原表位,这个区域被称为“高变区”[1,2]。全部或部分缺失鞭毛蛋白高变区会使鞭毛的抗原性降低,但不会影响其佐剂活性[3]。……
