郭文玲，薛　原，曾晓虹

(福建医科大学附属第一医院风湿血液科，福州 350005)

ChinJAllergyClinImmunol，2014，8(3)：211- 215

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus， SLE)是一种自身免疫介导的弥漫性结缔组织病，可出现动静脉血栓形成等症状。抗磷脂抗体综合征(antiphospholipid antibody syndrome， APS)亦为自身免疫性疾病，临床上主要表现为反复动静脉血栓形成和病态妊娠等，APS患者血清学中检查可特征性地出现抗磷脂抗体。其中，抗β2糖蛋白I(anti-β2-glycoprotein I，aβ2GPI)抗体已被证实与APS相关的血栓形成密切相关。

SLE患者体内也常可检出aβ2GPⅠ抗体，且aβ2GPⅠ抗体与血栓形成的严重程度密切相关。但是，在aβ2GPⅠ抗体阳性的SLE患者中，仅部分患者发生血栓栓塞，经历APS病程。那么，aβ2GPⅠ抗体在未发生临床血栓事件的SLE患者体内是否具有致病作用，已经引起临床工作者质疑。本研究同时检测SLE患者aβ2GPI的IgA、IgG、IgM等3类抗体水平，分析其与SLE患者发生临床血栓事件之间的关系，探讨aβ2GPI在SLE血栓形成中的临床意义。

对象和方法

对象

福建医科大学附属第一医院风湿血液科的SLE患者和原发性APS患者，SLE诊断符合1997年美国风湿病协会修订标准。常规实验室检测aβ2GPⅠ抗体阳性：IgA、IgG和IgM 3类总aβ2GPⅠ抗体，间隔6周且2次以上为阳性，水平呈中、高度升高。纳入患者需排除传统血栓栓塞易患因素(高血脂、高血压、高血糖、骨折、长期卧床、严重低蛋白血症、大量使用利尿剂和心房纤颤)，以及可能引起aβ2GPⅠ抗体一过性升高的可疑因素(肝炎病毒感染和肿瘤)等。血栓栓塞由造影、多普勒超声、影像学或组织病理学证实。

分组

aβ2GPⅠ抗体阳性的原发性APS患者纳入PAPS组。SLE患者根据临床是否发现血栓事件分为SLE-非血栓组(SLE-non-APS组)和SLE-血栓组(SLE-APS组)。

将所有发生临床血栓事件的患者(SLE-APS组+PAPS组)中发生动脉血管栓塞事件者纳入APS-A组，发生静脉血管栓塞事件者纳入APS-V组。

方法

标本采集与储存：清晨空腹抽取所有受试者静脉血3～5 ml，室温放置约1 h。普通离心机3 500 rmin离心约20 min，留取血清并保存于-20℃冰箱。

检测指标与方法：应用酶联免疫吸附实验方法检测aβ2GPI的IgA、IgG、IgM 3类抗体水平。试剂盒由上海联硕生物科技有限公司提供。

统计学处理

结　　果

一般情况

共纳入82例患者，SLE患者64例，原发性APS患者18例(PAPS组)。PAPS组患者年龄32～76岁，平均(49±10)岁。64例SLE患者中，SLE-non-APS组52例，年龄18～71岁，平均(38±14)岁；SLE-APS组12例(12/64，18.75%)，年龄32～58岁，平均(42±9)岁。SLE-non-APS组与SLE-APS组比较，以及SLE-APS组与PAPS组比较年龄差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

所有发生临床血栓事件患者(SLE-APS组+PAPS组)共30例，其中APS-A组23例，年龄32～76岁，平均(46±10)岁；APS-V组7例，年龄32～59岁，平均(46±11)岁。APS-A组与APS-V组年龄差异无统计学意义(P>0.05)，有可比性。

aβ2GPⅠ抗体表达

SLE-APS组aβ2GPI-IgA、aβ2GPI-IgM血浆水平明显低于SLE-non-APS组，差异有统计学意义(P<0.05)，aβ2GPI-IgG血浆水平比较差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。SLE-APS组和PAPS组aβ2GPI-IgA、aβ2GPI-IgG、aβ2GPI-IgM血浆水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)(表1)。

血栓事件与aβ2GPⅠ抗体表达

SLE-APS+PAPS组aβ2GPI-IgA、aβ2GPI-IgM血浆水平明显低于SLE-non-APS组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组aβ2GPI-IgG水平差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。

表1　各组aβ2GPⅠ抗体表达比较

Table 1　Comparison of expression of anti-β2-glycoprotein I antibody in each group　(×10-8 molL)

表1　各组aβ2GPⅠ抗体表达比较

分组nIgAIgGIgMSLE⁃APS组1213±04a15±0310±02bSLE⁃non⁃APS组5218±0916±0615±07PAPS组1810±0415±0411±06SLE⁃APS+PAPS组3011±04b15±0311±05cAPS⁃A组2311±0414±03d12±05eAPS⁃V组711±0317±0307±01

SLE-APS：系统性红斑狼疮-血栓；SLE-non-APS：系统性红斑狼疮-非血栓；PAPS：原发性抗磷脂抗体综合征；APS-A：SLE-APS组和PAPS组中发生动脉血管栓塞事件者；APS-V：SLE-APS组和PAPS组中发生静脉血管栓塞事件者；与SLE-non-APS组比较，aP=0.002，bP=0.000，cP=0.001；与APS-V组比较，dP=0.043，eP=0.000

动、静脉血栓形成与aβ2GPⅠ抗体

APS-A组aβ2GPI-IgM血浆水平高于而aβ2GPI-IgG血浆水平APS-V组，差异均有统计学意义(均P<0.05)；两组aβ2GPI-IgA血浆水平差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。

讨　　论

SLE是继发性APS的典型代表，aβ2GPⅠ抗体是SLE患者体内常见的自身抗体。aβ2GPⅠ抗体阳性的SLE患者中仅部分发生血栓/栓塞。为准确评估aβ2GPI的IgG，IgM，IgA 3类抗体在未发生临床血栓事件和并发临床血栓事件的SLE患者，以及发生临床血栓事件的非SLE患者中的不同表达情况及意义，本研究对象筛选时尽可能排除传统易患因素和可能引起aβ2GPⅠ抗体一过性升高的可疑因素。

抗磷脂抗体是一种针对各种负电荷磷脂-蛋白复合物的自身抗体或同种抗体，主要包括抗心磷脂抗体、狼疮抗凝物和aβ2GPⅠ抗体。曾经认为，上述自身抗体结合于带负电荷的磷脂。但是研究表明，这些抗体不是结合于带负电荷的磷脂，而是磷脂结合蛋白。现在普遍认为，APS中最重要的靶抗原是β2糖蛋白I(β2-glycoprotein I，β2GPI)或β2GPI-磷脂结合复合物，β2GPI才是导致血栓病态和致死的主要介质，而aβ2GPⅠ抗体比抗心磷脂抗体和狼疮抗凝物在血栓形成患者中更具有特异性。在动物实验中，研究人员从APS患者中分离出aβ2GPⅠ抗体，注入小鼠体内，结果示小鼠血栓形成的发病率明显增加[1-3]。Arad等[4]发现，纯化的自身抗体以剂量依赖的方式增加血栓大小。然而，aβ2GPⅠ抗体阳性的SLE患者中仅部分发生血栓/栓塞。本研究64例aβ2GPⅠ抗体阳性的SLE患者中，只有12例患者发生临床血栓事件，阳性率为18.75%。根据aβ2GPⅠ抗体重链免疫原性不同，其可分为IgA、IgG、IgM 3类，目前国内外对这3类抗体的研究尚不多见。有研究认为，aβ2GPI-IgA在SLE患者中出现频率很高[5-7]。研究人员检测了SLE患者和健康对照组的抗心磷脂抗体和aβ2GPⅠ抗体发现，SLE患者aβ2GPI-IgA和抗心磷脂抗体阳性率明显高于健康对照组[5]。Lakos等[8]评估了33例APS患者，发现59.3%的患者aβ2GPI-IgA。Lee等[9]分析了270例SLE患者aβ2GPI的特异性，IgG、IgM和IgA类aβ2GPⅠ抗体的阳性率分别为38.1%、13.7%和34.8%。Mehrani和Petri[10]的研究显示，IgG、IgM和IgA类的aβ2GPⅠ抗体阳性率依次为5.4%、15.8%和20.2%；且另外分析发现，IgM类(28.9%)和IgA类(22.2%)aβ2GPⅠ抗体常见。关于这3类抗体与血栓关联性的研究较少，且研究结果和理解尚未取得一致，甚至存在结论相反的情况。有学者认为，aβ2GPI-IgA与血栓病史明显相关[5-6]。但是，有的研究却支持与血栓/栓塞发生相关的主要是aβ2GPI-IgG[11]。这或许是由于多数调查研究是回顾性的，且实验方法和条件往往不同，研究个体间存在其他血栓性疾病危险因素。

本实验研究结果显示，SLE患者中未发生临床血栓事件患者aβ2GPI-IgA、aβ2GPI-IgM血浆表达水平显著高于发生血栓事件的患者，aβ2GPI-IgG血浆水平与后者差异无统计学意义；未发生临床血栓事件的患者aβ2GPI-IgA、aβ2GPI-IgM 浓度亦高于发生临床血栓的患者，两组患者的aβ2GPI-IgG浓度无明显差异。这提示，aβ2GPⅠ抗体的存在或浓度水平并不是SLE血栓形成的必然相关因素，且本研究也不支持IgA、IgM和IgG类aβ2GPⅠ抗体在诱发SLE并发临床血栓事件中有明确差异性。

研究人员对IgA、IgG和IgM 3类aβ2GPⅠ抗体与血栓事件发生的关联性尚未得到一致结论。但也有人提出，3类aβ2GPⅠ抗体与动脉血栓事件和静脉血栓事件的关联性不同。部分专家认为，IgM类抗体和动脉血栓形成有关，而IgG类抗体则和静脉血栓形成相关[12]。Mehrani和Petri[10]的研究显示，IgA和IgG类抗体和静脉血栓形成有明显相关性，且IgG类抗体和静脉血栓的关联性更强，但IgM类抗体与动、静脉血栓形成均无显著关联。本研究发现，无论有无SLE基础免疫性疾病，在发生临床血栓事件的患者中，发生静脉血栓事件的患者aβ2GPI-IgG水平显著高于发生动脉血栓事件的患者，而aβ2GPI-IgM浓度明显低于后者，两组患者aβ2GPI-IgA水平无明显差异。本研究结果更支持aβ2GPI-IgG和静脉血栓关联，aβ2GPI-IgM和动脉血栓形成有关的结论。

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