程丽娟乐治平易 航* 何纯斌杨 明文万江

（1 南昌大学，江西 南昌 330000；2 江西济民可信药业有限公司，江西 宜春 336000）

阿归养血颗粒油状物β-环糊精包合工艺研究

程丽娟1乐治平1易 航2* 何纯斌2杨 明2文万江2

（1 南昌大学，江西 南昌 330000；2 江西济民可信药业有限公司，江西 宜春 336000）

目的 应用多指标综合评分法结合正交设计，优选阿归养血颗粒油状物β-环糊精最佳包合工艺。方法 以包合物油利用率、包合物含油率、包合物收得率为考察指标，经多指标综合评分法结合正交设计，考察油状物/β-环糊精（mL/g）、包合时间、包合温度、乙醇/油状物（%）等因素，最终确立阿归养血颗粒油状物β-环糊精最佳包合工艺。结果 最佳包合工艺：即油状物/β-环糊精为1∶10，包合温度为40 ℃，乙醇/油状物为20%，包合1 h。结论 采用多指标评分法结合正交设计优选得到阿归养血颗粒油状物最佳包合工艺，为阿归养血颗粒制备及相关研究提供了一定理论依据。

阿归养血颗粒；油状物；β-环糊精；包合

阿归养血颗粒是由当归、川芎、阿胶、党参、白芍等药材加工制成的颗粒剂，具有补气养血之功效，主要用于面色萎黄，头晕乏力，肌肉消瘦，经闭，赤白带下等症状。然而该颗粒油状物气味较浓，刺激性较强，不利于患者服用，且成分易受温度和光照影响，不稳定。本研究应用β-环糊精将上述油状物进行包合处理，采用多指标综合评分法结合正交实验设计，优选得到阿归养血颗粒油状物β-环糊精最佳包合工艺。

1 仪器与材料

XL-250两级胶体磨（温州精密仪表机床厂），挥发油测定器（上海玻璃仪器厂），DF-101S型集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义市英峪予华仪器厂），BT25S型电子分析天平（德国Startorius公司），KQ-250VDB型双频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

2 方法与结果

2.1 包合物制备方法的考察[1-2]

2.1.1 饱和水溶液法：取适量的β-环糊精，加入一定量的蒸馏水，在规定温度下配制成饱和水溶液。另取上述油状物适量，用适量无水乙醇溶解，缓慢加入上述饱和水溶液中，保温搅拌一定时间，使成混悬态，冷藏24 h，抽滤，得白色沉淀物，用石油醚清洗，干燥，即得。

2.1.2 超声波法：取适量的β-环糊精，制成规定温度下的饱和溶液，定量加入无水乙醇溶解的上述油状物，置超声波清洗器中按规定时间超声处理，冷藏24 h，抽滤，得白色沉淀物，用石油醚清洗，干燥，即得。

2.1.3 胶体磨法：取适量β-环糊精，置胶体磨中，加入一定量的蒸馏水，在规定温度下缓慢定量加入上述无水乙醇溶解的上述油状物，按规定时间研磨，冷藏24 h，抽滤，得白色沉淀物，用石油醚清洗，干燥，即得。

2.2 挥发油空白回收率实验：精密量取挥发油1 mL，置500 mL圆底烧瓶中，加蒸馏水200 mL。按照《中国药典》（2010年版）一部附录页挥发油测定法项下甲法测定。测得挥发油的回收率为77%。回收率（%）=测得挥发油量/加入挥发油量×100%。包合物得收率=包合物重量/β-环糊精+投入挥发性重量×100%。包合物油利用率=包合物中挥发性成分量/投入挥发性重量×100%。以上结果见表1。

表1 3种包合方法的结果比较

以上结果表明，超声波法和胶体磨法包合效果较好，从生产成本以及生产操作考虑，后者实用，且快速、简便，适合工业化生产。因此，我们选用胶体磨法作为阿归养血颗粒中包合物的制备方法。

2.3 胶体磨法包合工艺的优化

2.3.1 正交实验设计：本研究主要考察了影响包合效果的关键参数油与β-环糊精的配比、研磨时间、溶解油的乙醇用量以及包合温度等因素，设置3个水平，采用L934正交实验设计表，以包合物油利用率、包合物含油率和收得率为评价指标，设定其加权系数分别为0.4、0.4、0.2，采用综合加权评分法，优选包合最佳工艺。正交设计因素水平表见表2。

表2 阿归养血颗粒油状物包合正交设计因素水平表

2.3.2 包合物的制备：按照正交设计表的要求，取适量β-环糊精，置胶体磨中，加入2倍量的蒸馏水，碾匀，在规定温度下缓慢定量加入无水乙醇溶解的上述油状物，按规定时间研磨，冷藏24 h，抽滤，得白色沉淀物，用石油醚清洗，40 ℃真空干燥，即得。正交实验设计及结果见表3。

由结果可知，以综合评分值为考察指标，采用极差直观分析显示影响因素大小A＞C＞D＞B，方差分析结果表明，因素A、C、D对综合评分值具有显著影响。根据K值，因素A应选3，因素C应选3，因素D应选2。综合上述分析，确定最佳工艺为A3C3D2B1，即油状物/β-环糊精为1∶10，包合温度为40 ℃，乙醇/油状物为20%，包合1 h。

表3 正交试验设计及结果

表4 综合评分法方差分析

2.3.3 胶体磨法包合工艺的验证：按优选的最佳包合工艺条件A3C3D2B1，即油状物/β-环糊精为1∶10，包合温度为40 ℃，乙醇/油状物为20%，包合1 h，进行3次验证试验，测得结果见表3。结果表明该制备工艺稳定可靠。

表5 验证试验结果

将验证所得的包合物，加入适量石油醚萃取出其中的油状物，挥去乙醚，适量甲醇溶解，作为供试液；另取未包合的阿归养血颗粒油状物，加入适量甲醇溶解，照薄层色谱色谱法[3]实验，吸取上述溶液各10 μL，点于同一块硅胶G薄层板上，以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（4∶1∶1∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视。发现包合物中的油状物和未包合的油状物斑点一致，表明二者成分一致，阿归养血颗粒油状物包合后成分未发生改变。

3 讨 论

本研究对3种常见的包合方法进行了考察，出于工业上生产要求综合考虑，我们选择胶体磨法作为该产品的包合方法。阿归养血颗粒油状物气味较浓，刺激性较强，如果不进行包合，不利于患者服用，且成分易受温度和光照影响，不稳定。本研究采用多指标综合评分法结合正交设计优选得到阿归养血颗粒油状物最佳包合工艺，即油状物/β-环糊精为1∶10，包合温度为40 ℃，乙醇/油状物为20%，包合1 h。验证实验表明该工艺稳定可靠，克服了阿归养血颗粒传统生产工艺的缺点，提高了药物稳定性和疗效，为今后阿归养血颗粒临床运用及相关科学研究提供了合理的科学依据。

[1] 张爱军,朱宁,杨安东.川芎超临界流体CO2萃取挥发油β-环糊精包合物制备工艺研究[J].中国中药杂志,2004,29(1):39-41.

[2] 景明,李季文,吴红彦.复方甘草片挥发性成分β-环糊精包合工艺的研究[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(3):27-29.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:附录ⅥB34-35.

Extracting Process of Aguiyangxue particles by the Continuous Counter-current Equipment

CHENG Li-juan1,LE Zhi-ping1, YI Hang2*, HE Chun-bin2, YANG Ming2, WEN Wan-jiang2
(1 Nanchang University, Nanchang 330000, China; 2 Jimin Kexin Pharmaceutical Co., Ltd. Yichun 336000, China)

Objective To optimize the β-cyclodextrin inclusion process of Aguiyangxue particles under the application of multi-index comprehensive evaluation method combined with orthogonal experiment design. Methods Using the indexes of the rate of utilization of inclusion oil and the content of inclusion oil and the amount of the inclusion to investigate the oil-like substances/β-cyclodextrin(mL/g), inclusion time, inclusion temperature and ethanol/ oil-like substances(%),and then to establish the optimical β-cyclodextrin inclusion process. Results The optimum β-cyclodextrin inclusion process: the oillike substances/β-cyclodextrin(mL/g) is 1∶10, inclusion temperature is 40 ℃, and inclusion time is 1 h, ethanol/ oil-like substances (%) is 20%. Conclusion The β-cyclodextrin inclusion process of Aguiyangxue particles after the multi-index scores conbined with orthogonal experiment design provides a scientific basis for the clinical use.

Aguiyangxue particles; Oil-like substances; β-cyclodextrin; Inclusion

R283.6

：B

：1671-8194（2014）31-0014-02

*通讯作者:E-mail: yihang08@163.com