孟建宇，才航，刘佳杰

（内蒙古农业大学生命科学学院应用与环境微生物实验所，内蒙古呼和浩特010018）

蒙古口蘑菌丝体最适生长条件初探

孟建宇，才航，刘佳杰

（内蒙古农业大学生命科学学院应用与环境微生物实验所，内蒙古呼和浩特010018）

对蒙古口蘑菌丝体不同条件的培养进行了初步研究。结果表明，蒙古口蘑菌丝体在室温暗光培养，pH6.0～7.0时生长最好，最适pH值为pH6.0。

蒙古口蘑；菌丝体；生长条件

蒙古口蘑（Tricholoma mongolicum）俗称口蘑、白蘑，属于伞菌目白蘑科，是我国北方草原出产的名贵野生食药兼用菌，菇类上品[1-2]。然而由于草原退化及人为过度采集等原因，其生境受到破坏，产量不断下降。蒙古口蘑的人工驯化栽培虽已成功[3]，但至今尚未获得实质性的突破，因此，保护和研究开发这一珍贵资源无疑具有重要的学术价值和广阔的应用前景[4]。蒙古口蘑菌丝体是产生活性物质的基础，有促进多种植物生长的效应[5-7]，含有较丰富的多糖活性物质[8]，从蒙古口蘑菌丝体中分离到的凝集素TML-1和TML-2具有抗肿瘤、抗病毒和降血压等多方面的生物活性和生理功能[9-11]。如能把蒙古口蘑加以系统开发，以更容易液体培养的菌丝体代替资源匮乏的野生子实体，用来研制各种营养保健食品[12]及药膳，将具有极高的经济效益和社会效益。本文对蒙古口蘑菌丝体的培养条件做了初步研究，旨在为更好地开发蒙古口蘑提供一些基础资料。

1 材料与方法

1.1 材料

蒙古口蘑（Tr-12）分离自锡林浩特市。

1.2 培养基

PDA培养基[13]：马铃薯200 g切块，煮沸30min后用纱布过滤，加入蔗糖20 g、琼脂20 g（固体培养基用），定容至1 000mL，pH 6～7。

1.3 菌丝体的培养

将蒙古口蘑Tr-12菌种接种到PDA固体培养基上，20℃[14]恒温培养7 d。等到其产生大量的孢子后先用无菌水洗下孢子，之后将孢子悬浮液接种于PDA液体培养基中（装液量为100mL/250mL，接种量2%）。按照以下条件培养：条件Ⅰ：室温下光照10 h/d，光照强度2 000 lx，条件Ⅱ：自然光照培养，（条件Ⅲ：室温暗光培养，条件Ⅳ：室温自然光照培养9 d后置4℃冰箱暗光培养。

1.4 pH对菌丝体生长的影响

调整PDA固体培养基的pH值分别为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0。分别接种蒙古口蘑Tr-12于不同pH值的PDA固体培养基上，隔时测定不同pH条件下生长的菌落的直径，计算菌丝体的生长倍数。

1.5 菌丝生长量和总糖含量的测定

将不同pH条件下培养的蒙古口蘑菌丝体样品过滤，在烘箱内80℃干燥4 h后测定菌丝体干重。测定培养基滤液的pH值，并用DNS法[8]测定滤液的含糖量。

2 结果

2.1 不同pH对蒙古口蘑菌丝体生长的影响

通过测定不同固体培养基培养阶段的菌丝体生长倍数，我们发现当pH6～7时，蒙古口蘑菌丝体生长的最好，见图1。

图1 不同pH值下菌丝体生长量的变化Fig.1 Effects of pH on the grow th of mycelium

从图1上可看出，当pH6～7时菌丝体生长量的变化明显优于pH7～8。在液体培养基培养60天后，测定菌丝体的生长量，结果见图2。

图2 不同pH值对菌丝体生长量的影响Fig.2 Effects of pH on the growth of mycelium

图2显示在pH6～7时菌丝体生长最快。

2.2 液体培养前后pH的变化

用不同pH的培养基培养蒙古口蘑菌丝体，培养前后的pH变化见表1。

当初始pH为4～6.3时，培养后pH有所升高，当初始pH为6.9～8.0时，培养后pH有所降低，可见蒙古口蘑菌丝细胞对外界pH的反应在一定范围内有调节作用，使其向着适宜生存的pH变化。

表1 不同pH值的培养基培养培养前后pH值的变化Table1 The change of pH after cultivation by media of different pH

2.3 不同培养条件对菌丝体生长量的影响

在pH6的PDA液体培养基中培养蒙古口蘑菌丝体，观察不同的培养条件对菌丝生长的影响。结果表明：在室温暗光培养（条件Ⅲ）时菌丝长势最好。对各条件作方差分析时差异显著，F=10.9＞F0.01。

2.4 菌丝量与糖的消耗

将培养好的菌丝体样品溶液过滤干燥后得到菌丝量，同时测定滤液的总糖含量算出其消耗量（消耗量=初始总糖量-滤液总糖量），见图3。

图3 菌丝量与糖的消耗Fig.3 The relationship between grow th of mycelium and consumption of sugars

从图3可以看出，随着菌丝的增殖，糖的消耗增大，根据生物统计的回归结果为y=0.113 5b+2.15x，b= 2.15，r=0.95。对b进行t检验（t=17.2＞t0.01）表明，蒙古口蘑菌丝体对糖的利用为显著关系。

3 结论

培养基的pH值是影响珍稀食用菌菌丝体增殖的主要因素之一[15]。通过实验发现，初始pH6～7是其最适pH范围，pH6是其最适pH；菌丝的增殖与糖的消耗呈正相关。不同的食用菌在不同生长阶段对光照的需求不一，目前普遍认为食用菌的菌丝体生长不需要光照[16]。实验发现，蒙古口蘑菌丝体在室温暗光（条件Ⅲ）培养时生长最好。

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Primary Study on the Optimal Culture Conditions of Mycelium of Tricholoma mongolicum

MENG Jian-yu，CAI Hang，LIU Jia-jie
（Institution for Applied and Environmental Microbiology of Life Sciences College，Inner Mongolia Agricultural University，Hohhot 010018，Inner Mongolia，China）

The culture conditions of mycelium of Tricholoma mongolicum was primary studied.The results showed that the mycelium of Tricholoma mongolicum grew best at room temperature and dark light condition.The growth rang of pH was between pH 6.0and pH 7.0 where as the optimal pH was determined tobe6.0.

Tricholoma mongolicum；mycelium；culture conditions

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.16.003

2014-03-23

内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJ10054）

孟建宇（1977—），男（汉），副教授，硕士，研究方向：资源与应用微生物学。