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慢性肾脏病与非肌性肌球蛋白重链9基因多态性的相关性

2014-03-21王彩丽刘丽萍李增艳

肾脏病与透析肾移植杂志 2014年5期
关键词:研究

王彩丽 刘丽萍 李增艳

我国慢性肾脏病(CKD)患病率横断面调查结果显示>18岁人群中有1.2亿CKD患者,但知晓率仅为12.5%[1],CKD起病隐匿,58.7%~89.7%的患者是通过筛查发现的[2],在临床上若能找到一种基因与CKD的发病、进展相关,又与高血压、蛋白尿、肾功能损害等临床表现相关,为早期诊断CKD提供理论基础,以便早期诊断、早期治疗CKD。

近年来用分子生物学的方法探讨慢性肾脏病的发病机制,特别是利用全基因组关联分析(GWAS),已经取得了令人振奋的进展,其中一个最显著和最有前途的基因是非肌性肌球蛋白重链9基因(MYH9)。国外研究初步证实MYH9基因多态性与非裔美国人非糖尿病肾病具有相关性,也影响欧裔美国人的肾功能[3-6],但研究很少涉及其他种族和地区,本研究初步探讨我国CKD患者与MYH9基因多态性的相关性。

对象和方法

对象选取在包头医学院第一附属医院肾内科住院的CKD患者301例作为CKD组,诊断符合NFK-K/DOQI标准,按照MDRD[7]及EPI-CKD[8]公式估算肾小球滤过率(eGFR)并进行CKD分期。非CKD组294例,为体检健康者。用EDTA-K+管采集所有研究对象晨起空腹外周静脉血2 ml,-40℃冰箱保存。记录CKD患者发病年龄、性别、血压、24h尿蛋白定量、血清肌酐(SCr)、eGFR、原发病,晨起空腹静息未服药状态下测量血压。

所有研究对象均自愿参加,并签知情同意书,该项目经本院伦理委员会批准。

采用盐析法从外周血中提取DNAMYH9基因总序列(chromosome:NCBI36:22:35006673:35114558:-1)primer 3在线设计引物由大连宝生物工程公司合成,DNAMAN设计酶切位点以基因组DNA为模版进行PCR扩增(表1)。PCR反应体系:DNA模板2 μl,10×buffer 1.25 μl,上下游引物各0.25 μl,dNTP 0.25 μl,Taq酶0.5 μl,双蒸水8 μl。扩……

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