牡丹雄蕊多糖的提取工艺研究
2014-03-21周远明郑国生马传利史美丽
周远明,刘 帅,郑国生,马传利,史美丽
(青岛农业大学,山东青岛266109)
牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)为芍药属木本植物,其根皮即牡丹皮是一种重要的中药材,俗称“丹皮”,药效显著,研究较多[1-9]。我国民间有将牡丹雄蕊制成雄蕊茶饮用的习惯,因其具有降糖、降血脂和降血压等效果,也逐渐引起了人们的关注。
多糖是牡丹中重要的化学成分之一,在机体免疫调节、降血糖、抗衰老等方面有较强活性[10]。目前尚未见牡丹雄蕊多糖的研究报道。作者在此采用热水法从牡丹雄蕊中提取多糖,并对提取工艺进行研究,以期为开发利用牡丹雄蕊多糖提供参考。
1 实验
1.1 材料、试剂与仪器
牡丹雄蕊,采集于青岛农业大学牡丹园,经青岛农业大学郑国生教授鉴定品种为“凤丹”。
石油醚、乙醇、浓硫酸、葡萄糖、丙酮、苯酚、乙醚等试剂均为分析纯。
微型植物粉碎机,天津泰斯特;超低温冰箱,日本SANYO;电子天平,德国Sartorius;恒温水浴锅,上海森信;超声细胞破碎仪,德国Hielscher;RE-52型旋转蒸发仪,上海亚荣;循环水式真空泵,浙江黄岩求精真空泵厂;U-2900型紫外可见分光光度计,日本HITACHI;高速离心机,Eppendorf。
1.2 标准曲线的绘制[11]
准确移取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60 mL、0.80mL、1.00mL、1.20mL、1.40mL、1.60mL的0.04mg·mL-1的葡萄糖标准溶液,分别置于10 mL试管中,加入适量蒸馏水至2.0mL,各加5%苯酚溶液1.0mL,振荡摇匀后滴加浓硫酸5.0mL,静置10min,摇匀,室温放置20min,于波长490nm处测定吸光度。以吸光度A为纵坐标、葡萄糖浓度c(μg· mL-1)为横坐标绘制标准曲线,拟合得回归方程:A=0.0139c-0.0117(R2=0.9983)。
1.3 牡丹雄蕊多糖的提取
1.3.1 工艺流程
牡丹雄蕊→阴干、粉碎→超声-冻融法破壁→石油醚脱脂→80%乙醇除还原糖和寡糖→热水提取→浓缩→95%乙醇沉淀→4 800r·min-1离心→沉淀冷冻干燥→粗多糖。……
