胡秋实，苏忠亮，李 江

（1.青岛科技大学化工学院，山东青岛266042；2.国家海洋局第一海洋研究所，山东青岛266061）

生活在极端环境中的微生物为了适应其生存环境，需要分泌特殊的酶类以及其它代谢产物，这些酶类和代谢产物所具有的特殊性质在工业生产中具有很大的应用价值［1－3］。

卡拉胶是从红藻细胞壁中提取的以重复的1，3－β－D－吡喃半乳糖和1，4－α－D－吡喃半乳糖二糖单元为基本骨架交互连接而成的亲水性线性硫酸多糖［4］，应用于食品、医药、化妆品等众多领域。卡拉胶寡糖主要由卡拉胶经酶降解得到，具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗凝血以及免疫调节等多种生物活性［5－8］，在医药领域的应用价值非常高。作者在此对印尼热泉和北极海水这两种极端环境的微生物产卡拉胶酶进行了研究。

1 实验

1.1 菌株与培养基

菌株分离自印尼热泉水样和北极海水水样，保存于国家海洋局海洋生物活性物质重点实验室超低温冰箱（－80℃）。

YN液体培养基（g·L－1）：蛋白胨3，酵母粉3，氯化钠3，蒸馏水配制。

YN固体培养基（g·L－1）：蛋白胨3，酵母粉3，卡拉胶15，琼脂粉15，氯化钠3，蒸馏水配制。

YN斜面固体培养基（g·L－1）：蛋白胨5，酵母粉1，琼脂粉15，氯化钠3，蒸馏水配制。

2216E液体培养基（g·L－1）：蛋白胨5，酵母粉1，陈海水配制。

2216E固体培养基（g·L－1）：蛋白胨5，酵母粉1，卡拉胶15，琼脂粉15，陈海水配制。

2216E斜面固体培养基（g·L－1）：蛋白胨5，酵母粉1，琼脂粉15，陈海水配制。

1.2 方法

1.2.1 富集培养

取印尼热泉／北极海水水样0.1mL，加至含有30 mL YN／2216E液体培养基的100mL三角瓶中，于55℃／10℃以150r·min－1培养24h／48h。

1.2.2 初筛

用无菌生理盐水适当稀释富集培养印尼热泉／北极海水菌液，取0.1mL稀释的菌液涂布于YN／2216E固体培养基平板中，于55℃／10℃恒温培养24 h／48h；……