姚 俊，喻 婵，靳竞男

（北京科技大学土木与环境工程学院环境与能源国际合作基地，北京100083）

多环芳烃（polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）是常见的一类环境污染物［1－2］，广泛分布于水体、空气及土壤中。由于其在环境中的半衰期较长和致癌、致畸、致突变的性质而日益受到人们的重视［3］。PAHs具有较低的水溶性［4］，高分子量的PAHs在环境中的存留时间较长，导致这类化合物在环境中很难被去除［5］。美国环保局在20世纪80年代初将16种未带分支的PAHs确定为环境中的优先控制污染物［6］。利用微生物去除环境中的PAHs因费用低、易操作及不造成二次污染而逐渐成为研究热点［7］。

作者从大港油田原油样品中筛选获得1株可以以芘（代表性PAHs）作为唯一碳源和能源进行生长的菌株，对其降解特性和降解产物进行了测定，进一步提出了该菌株对芘的降解代谢途径。

1 实验

1.1 样品及培养基

原油样品取自大港油田港西区块58－8－3＃油井。

无机盐培养基（g·L－1）［8］：（NH4）2SO43，KH2PO40.5，Na2HPO4·12H2O 1.26，MgSO4· 7H2O 0.54，FeCl3·6H2O 0.05，FeSO4·7H2O 0.03，MnSO4·H2O 0.015，ZnSO4·7H2O 0.024，CoCl2· 6H2O 0.366，调节pH值至7.2～7.4。固体培养基中添加2%的琼脂，121℃灭菌30min。

LB培养基（g·L－1）：胰蛋白胨10，酵母粉5，NaCl 10，调节pH值至7.0。固体培养基中添加2%的琼脂，121℃灭菌30min。

1.2 菌种筛选

将样品以2%的接种量接种于以芘为唯一碳源的无机盐培养基中，好氧条件下于28℃、180r·min－1摇床培养7d，相同条件下转接1次。采用稀释涂平板法涂于以芘为唯一碳源的无机盐固体培养基上，于28℃恒温摇床培养7d形成单菌落。挑取生长迅速、边缘整齐的菌落接入无机盐培养基中，摇瓶复筛，得到目的菌株。

1.3 芘降解菌株的鉴定

将目的菌株在28℃LB培养基中振荡培养至对数生长期，取1.5mL培养液以12 000r·min－1离心，收集菌体。……