路云环 孟宪敏 栾 红

光动力治疗对尖锐湿疣HPV DNA载量的影响

路云环 孟宪敏 栾 红

目的: 确定光动力治疗对尖锐湿疣(CA)人乳头瘤病毒(HPV)的影响。方法: 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ－PCR)检测65例CA患者光动力治疗前、治疗3次后HPV DNA拷贝数。随访3个月观察复发情况,并分析复发与HPV DNA载量的关系。结果: 3次治疗后HPV DNA拷贝数(3．10×103)较治疗前(5．12×106)显著下降(P＜0．05)；复发患者(12例)治疗前平均拷贝数(4．62× 107)高于未复发患者(6．75×104)(P＜0．05)。结论: 光动力治疗CA能显著降低HPV病毒载量；患者疣体中HPV DNA载量与复发有关。

尖锐湿疣； 人乳头瘤病毒； 光动力

尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起常见的性传播疾病,传统的治疗方法痛苦大、复发率高。光动力疗法是利用光动力反应进行疾病诊断和治疗的新技术,其选择性好,创伤小,疗效明确,治疗CA疗效好、安全性高、复发率低。我们采用实时荧光定量聚合酶链反应检测光动力治疗对65例CA患者HPV DNA载量的影响和其临床疗效,报道如下。

1 资料与方法

1．1 病例收集 65例CA患者,均选自我院皮肤科门诊就诊病人,临床上确诊为CA。所有患者入组前签署知情同意书,皮损用数码相机拍照存档,保存治疗前后的临床资料。男35例,女30例,年龄18～59岁,平均31．25岁,病程6天～7个月,平均4．3个月。65例患者男性皮损分布在龟头、包皮、系带、冠状沟、阴茎体、尿道口、阴囊及肛周；女性分布在大小阴唇、阴道口、会阴及肛周。男女皮损平均直径在1．5 cm以内,皮损数目在5个以内,皮损的颜色为鲜红色、暗红色、棕褐色、灰白色。形状有丘疹状、鸡冠状、乳头状、菜花状等。纳入标准:根据2000年卫生部性病专家咨询委员会制定的“性病诊疗规范和性病治疗推荐方案”诊断标准确诊。排除标准:患者免疫功能低下或长期服用免疫抑制剂；糖尿病患者；全身应用糖皮质激素治疗者；合并其他性传播疾病者；局部采用抗病毒药物治疗或物理治疗者；不能定期随访者。脱落标准:中途失访或未按要求完成治疗者。本课题参与者全部按要求完成了疗程。

1．2 主要仪器和试剂 仪器使用美国ABI 7300实时荧光定量PCR仪,XD－635AB型光动力治疗仪(桂林兴达光电医疗器械有限公司),试剂采用凯杰生物工程有限公司生产的人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒,5’－氨基酮戊酸(5－ALA,商品名:艾拉,上海复旦张江生物医药股份有限公司)。

1．3 方法 于治疗前及3次治疗后用组织钳夹取部分疣体组织或用棉拭子刮取原皮损部位皮屑,置入1 mL生理盐水的无菌试管中待检,常规预处理样本后－20℃保存,以备PCR检测型别。DNA抽提和PCR扩增:采用Real－time PCR(RT－PCR)方法,严格按说明书步骤操作。

艾拉光动力治疗:治疗前取材冻存,在疣体部位放置适当大小的脱脂棉,将溶液滴于脱脂棉,并覆于疣体上,范围覆盖至皮损周边2 cm内正常外观的皮肤黏膜,20%ALA外用避光封包3 h后,在暗室中采用光动力仪照射。波长:633 nm；能量100 J/cm2；照射距离10～15 cm；照射时间:20 min/部位,每周1次,共3周为1疗程。疗程结束后随访3个月。

疗效判定:复发判断(同时满足以下两条):①疣体经过治疗后消退,经过一段时间,在无其他HPV接触传染条件下又重新出现疣体；②重新出现的疣体一定是在原来感染HPV的部位。所有患者均在第3次光动力治疗后半个月、1个月、2个月、3个月进行门诊或电话随访,随访期间患者性生活时带安全套。

1．4 统计学方法 采用SPSS 11．5版软件对数据进行统计分析。采用对数平均值法计算HPV DNA平均拷贝数,治疗前后比较采用t检验,复发率的比较采用χ2检验。

2 结果

2．1 治疗结果 3次治疗后65例患者临床疣体基本消退,达到临床治愈。治疗后随访半个月复发6例,1个月复发5例,2个月复发1例,3个月复发0例,总复发率18．4%。

2．2 光动力治疗前后HPV DNA载量关系 治疗前65例CA患者HPV DNA拷贝数明显高于治疗3次后,差异有统计学意义(P＜0．05),见表1。

表1 光动力治疗前后HPV DNA病毒载量比较

2．3 HPV DNA载量与复发的关系 65例随访的CA患者中,53例未复发组治疗前HPV DNA病毒载量为6．75×104,12例复发组治疗前HPV DNA载量为4．62 ×107。两组比较具有统计学差异(P＜0．05)。

3 讨论

光动力是在患处使用光敏剂,用特定波长、能量的光照射特定时间,可有效杀灭靶细胞,达到治疗目的。光动力治疗HPV感染主要是破坏含有病毒的角质形成细胞和使没有包裹的病毒颗粒灭活,导致病毒在早期感染阶段被抑制。本资料结果显示65例CA患者用光动力治疗3次后,皮损组织中HPV DNA载量明显下降,与治疗前相比有显著性差异。提示光动力治疗有良好的清除HPV的作用。

CA的复发是临床上很棘手的问题。导致其复发的因素很多,可能主要与宿主完整的细胞免疫系统平衡失调或缺陷有关。1在感染性疾病中,病原体的致病力与病原体的数量和毒力有直接关系,病原体数量的异常增多将影响CA症状是否出现。本研究显示:未复发组治疗前HPV DNA病毒载量与复发组比较有统计学差异,说明病毒载量在CA的复发中起到一定的作用。这与文献2－4报道一致。因此在CA的治疗中应强调早期抗病毒治疗,特别是对于高病毒载量的患者,进行正规的治疗和随访,使病毒载量尽可能下降,从而达到减少复发的目的。

1吕成国．尖锐湿疣159例复发因素分析．医学信息,2008,22 (9):1637．

2车雅敏,王家璧．人乳头瘤病毒DNA载量与尖锐湿疣复发的相关性．中国医学科学院学报,2004,10:558－561．

3张天璐,车雅敏,纪岩文．尖锐湿疣患者HPV型别及DNA载量与复发的关系．山东医药,2009,49(40):25－27．

4蒋艺,吴洋,许宏岳．尖锐湿疣患者治疗前后人乳头瘤病毒核酸的荧光定量分析．中华皮肤科杂志,2007,5(40):129－131．

(收稿:2014－01－21 修回:2014－03－13)

Effect of photodynam ic therapy on HPV DNA load in condyloma acum inatum tissue

LU Yun-huan,MENG Xian-m in,LUAN Hong,Department of Dermatology,Liaocheng People's Hospital,Liaocheng 252000

Objective:To determine the effect of photodynamic therapy on human papilloma virus(HPV) DNA load in the lesion of condyloma acuminatum(CA)．Methods:The number of HPV DNA copy in 65 patientswith(CA)were detected by Real－time fluorescence quantitative polymerase chain reaction(FQ－PCR) before the treatmentand after3 times treatment．The patientswere followed－up for relapse after 3months treatment,The correlation between the relapse and thenumber ofHPV DNA copywereanalyzed．Results:The average HPV DNA copy number was(5．12×106)before the treatment and the HPV DNA copy number was (3．10×103)after the treatment,with a significant difference(P＜0．05)．A total of12 patients were relapsed．The average HPV DNA copy number in the relapsed patientswas(4．62×107)before the treatment,which was higher than(6．75×104)in the non－relapsed patients before the treatment(P＜0．05)．Conclusion:Photodynamic therapy can significantly reduce HPV load in the lesion of CA．The recurrence of CA was correlated with the HPV－DNA load before the treatment．

condyloma acuminatum；human papilloma virus；photodynamic therapy

山东省聊城市人民医院皮肤科,252000