陶兆燕，程媛，唐熠，谭亿民，李涓

·药理毒理·

高尿酸血症动物模型与时间的关系

陶兆燕1，程媛2，唐熠2，谭亿民2，李涓2

目的：通过喂食高蛋白高钙饲料建立鸡高尿酸血症模型，观察造模时间对该造模方法所建立的尿酸代谢障碍模型的影响。方法：选取100 d龄罗曼蛋鸡，在产蛋日龄前喂以高蛋白、高钙饲料，并限制进水量，建立鸡高尿酸血症模型；分别于造模第7 d、14 d、21 d检测血清尿酸值和粪便尿酸值。结果：造模第7 d、14 d、21 d，与空白组对照组比较，模型组粪便尿酸值均显著升高；造模第21 d，模型组血清尿酸值与空白组对照组比较具有显著性差异（P＜0.01）。结论：给鸡喂食高蛋白高钙饲料，在第21 d时血清尿酸值显著升高，说明造模成功，提示造模时间对该模型具有一定的影响。

高尿酸血症模型；鸡；造模时间

高尿酸血症(hypemricemia)是长期嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄减少所引起的一组异质性疾病[1]。近年来，由于经济发展和人们饮食结构改变，高蛋白、高果糖[2,3]和高嘌呤食物摄取增加，高尿酸血症的患病率正逐年上升，已成为威胁人类健康的重要疾病。为此，建立高尿酸血症动物模型，为研究该疾病发病机制和药理研究，具有非常重要的意义。本文通过喂食高蛋白高钙饲料建立鸡高尿酸血症模型，并观察造模时间对该造模方法所建立的尿酸代谢障碍模型的影响，希望能为以后进一步研究高尿酸血症的发病机理提供参考。

1 材料

1.1 实验动物

100日龄“罗曼蛋鸡”12只，体重(900±100)g，由成都正大畜禽有限公司提供；常规饲料由成都市新津希望饲料厂提供；造模饲料由四川省实验动物专委会养殖场提供，其中造模饲料(底料为常规饲料，补充鱼粉、骨粉)蛋白质含量大于20%、含钙量大于4%。

1.2 实验试剂

尿酸测定试剂盒，四川迈克生物科技股份有限公司生产，批号0812061。

2 方法

2.1 实验方法[4～6]

取100日龄罗曼蛋鸡12只，在实验室适应性喂养5 d后，称重，并按体重随机分为两组，即空白对照组和模型组，每组6只。空白对照组给予常规饲料，自由饮水。其余6只每天给予上述高蛋白、高钙饲料100 g进行造模，并且每只鸡每日控制进水量100 mL。于造模第7 d、14 d、21 d抽取鸡翅静脉血（取血方法：将鸡翅展开暴露翼根静脉, 7号针头以45°角刺破血管, 1.5 mL离心管收集流出的血液，完毕后压迫止血），取血前动物禁食8 h，2000 rpm离心10 min，分离血清，按试剂盒规定检测方法测定血清尿酸值。并于造模第7 d、14 d、21 d按相同的方法取鸡粪便1 g，并用3 mL蒸馏水稀释，3000 rpm离心10 min，取上清液按试剂盒规定检测方法测定粪便尿酸值。

2.2 统计学方法

结果以 ± 表示，SPSS13.0统计软件处理，计量资料符合正态分布，采用t检验，不符合者采用非参数检验秩和法分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 不同时期鸡血清尿酸值

结果显示，造模第7 d、第14 d，与空白对照组比较，模型组血清尿酸值无明显变化，说明喂食高蛋白、高钙饲料后，短时间内不能使血清中尿酸升高；造模第21 d，空白对照组比较，模型组血清尿酸值显著升高(P＜0.01)，说明此时造模成功。结果见表1、图1。

表1 实验不同时期鸡血清尿酸值测量结果 (，n = 6)

表1 实验不同时期鸡血清尿酸值测量结果 (，n = 6)

注：与空白对照组比较，** P＜0.01

组别

图1 实验不同时期鸡血清尿酸值

3.2 不同时期鸡粪便尿酸值

结果显示，造模第7 d、14 d、21 d，与空白对照组比较，模型组粪便尿酸值均显著升高(P＜0.01)，说明喂食高蛋白、高钙饲料后，任何时间段粪便中的尿酸值都会升高。结果见表2、图2。

表2 实验不同时期鸡粪便尿酸测量值(，n = 6)

表2 实验不同时期鸡粪便尿酸测量值(，n = 6)

注：与空白对照组比较，** P＜0.01

粪便尿酸值（μ mol．L-1）造模7 d 造模14 d 造模21 d空白对照组 853.50±135.89 880.21±199.52 928.33±673.07模型组 1746.17±214.64** 1978.93±344.51** 2130.07±459.35**组别

图2 实验不同时期鸡粪便尿酸值

4 讨论

高尿酸血症是长期嘌呤代谢障碍或(和)尿酸排泄减少所引起的一组异质性疾病，其发病原因主要是尿酸生成增多或排泄减少，导致尿酸在体内蓄积而使血中尿酸浓度升高。高尿酸血症诊断标准为男性血尿酸≥416 μmol．L-1(7.0mg/dL)，女性≥ 357 μmol．L-1(6.0mg/dL)[7]。现代研究已经明确高尿酸血症的发病与体内血尿酸水平的升高直接相关。尿酸是嘌呤代谢的产物，主要由细胞核酸代谢分解和其它嘌呤类化合物以及食物中的嘌呤核甘酸经酶的分解作用而来。并且大量研究表明血尿酸水平升高与肥胖、脂质代谢紊乱、糖尿病、动脉粥样硬化心血管疾病[8]等密切相关，已成为威胁人类健康的重要疾病。

动物模型作为研究疾病发病机制和药理药效的一种方法在科学发展中有着重要的作用。从现有对高尿酸血症动物模型的研究来看，目前还没有公认的高尿酸血症动物模型。但已有研究证实，禽类与人的嘌呤核苷酸代谢途径相似，缺乏尿酸酶，都是以尿酸为终产物排出体外。从尿酸生成及代谢途径入手，使血清尿酸水平升高可增加它们的嘌呤吸收与生物合成以及减少尿酸降解和排泄，从而引发鸡高尿酸血症，其病理过程与人相似[9]。选用禽类作为高尿酸血症模型动物还能较确切的反映体内嘌呤核苷酸的代谢水平，且具有高尿酸血症水平持续稳定的优点[10]。

从文中表1和图1实验不同时期鸡血清尿酸值结果可以看出，造模第7 d和第14 d，与空白对照组比较，模型组血清尿酸值无明显变化，而造模第21 d，模型组血清尿酸值显著升高，由此推测采用喂食高蛋白高钙饲料建立高尿酸血症模型的方法受时间影响较大。但该实验结果与一些文献报道的造模7 d即可造成高尿酸血症模型[5]不符，发生此现象的原因可能是造模饲料成份、喂养方法及其它一些客观因素所致，具体原因还有待进一步研究。从表2、图2实验不同时期鸡粪便尿酸值可以看出，与空白对照组比较，各个时间段的鸡粪便尿酸值均显著升高，说明鸡食用高钙高蛋白饲料后由于其体内自身的调节代谢作用将大部分尿酸排出了体外。从上述结果及设想可以得出，通过喂食高蛋白高钙饲料建立的鸡高尿酸血症模型与造模时间有着密切的联系，即造模时间对能否造成高尿酸血症模型影响较大。同时，该造模方法对鸡粪便尿酸值也具有一定影响。此外，通过本实验的研究也在理论上和数据上为高尿酸血症的进一步研究提供了实验参考。

[1] 张超,曹克光,杨崇青.高尿酸血症及尿酸性肾病动物模型的建立及应用[J].实验动物科学与管理,1999,16(4):18.

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[3] Takahiko Nakagawa, HanboHu, Sergey Zharikov. A causal role foruric acid infructose-induced metabolic syndrome[J]. Am J Physiol RenalPhysio,2006,290:625.

[4] 黄国钧,黄勤挽.医药实验动物模型制作与应用[M].北京:化学工业出版社,2007:512.

[5] 周敏,雒晓鸣,张巍,等.痹清胶囊对鸡高尿酸血症模型尿酸代谢的影响[J].中国实验方剂学杂志,2006,12(12):35.

[6] 黄丽霞,张慧,黄承初,等.通痹祛风汤对鸡痛风病模型血尿酸代谢的影响[J]. 药物与临床,2008,(27):59.

[7] Feig DI,Kang DH,Johnson RJ．Uric acid and cardiovascular risk [J]．N Engl J Med，2008,359(17):1811.

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[9] 董纯武,顾耀志,吴祖立.鸡痛风病研究报告[J].中国兽医杂志, 1989,15 (2):24.

[10] 王勇,陈超.高尿酸血症动物模型研究进展[J].中华实用中西医杂志,2003,3(16):1978.

（责任编辑：陈思敏）

The relationships between animal model of hyperuricemia and time

TAO Zhao-yan1, CHENG Yuan2, TANG Yi2, TAN Yimin2, LI Juan2//(1. Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610075, China;2.Teaching Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 610072, China)

Objective:The chicken model of hyperuricemia was established by feeding high protein and high-calcium diet, and the effect of molding time on the establishment of uric acid metabolism disorder model was investigatedMethod:Roman laying hens of 100 days was selected, and fed high protein and high-calcium diet with limited the amount of water before the egg laying to establish the chicken model of hyperuricemia. At the molding time of 7d, 14d and 21d, the serum uric acid and fecal uric acid values were detected respectively.Result:At the molding time of 7d, 14d and 21d, compared with blank control group, the model group’s fecal uric acid values were all increased. At the molding time of 21d, the model group serum uric acid levels of had signifcant difference when compared with the blank control group.Conclusion:After the animal is fed with high protein highcalcium diet for 21 days, the serum uric acid values are signifcantly increased which indicate that the molding is succeed, and suggest that the molding time has a certain impact on the model.

Hyperuricemia model; Roman laying hens; molding time

R 285.5

A

1674-926X(2014)01-009-03

四川省科技厅科技基金（No.2009SZ0233）

1.成都中医药大学，四川 成都 610075；2. 成都中医药大学附属医院，四川 成都 610072

陶兆燕（1987-），女，四川泸州人，在读硕士研究生，主要从事中药药效与毒理研究Tel:13551079749 Email:taozhaoyan@126.com

李涓（1963-），女，重庆人，教授，主要从事药理学、中药药理学研究以及新药的开发研究Tel:13668162880 Email:Li062@126.com

2013-06-13