张 艳，王金鸿，吕亚莉，菅复春，张龙现，宁长申

（河南农业大学牧医工程学院，郑州 450002）

六种试剂盒提取血液基因组DNA效果比较

张 艳，王金鸿，吕亚莉，菅复春，张龙现，宁长申

（河南农业大学牧医工程学院，郑州 450002）

为筛选一种高效、快捷的血液基因组DNA提取试剂盒，采集24份新鲜西藏绵羊血液样本，选用6种市售商业化试剂盒（LifeFeng柱式试剂盒DK601和非柱式试剂盒DK602，康为世纪非柱式试剂盒CW0544和柱式试剂盒CW0546，上海生工非柱式试剂盒SK8224和柱式试剂盒SK8254）,比较所提DNA的浓度、纯度、得率以及对嗜吞噬细胞无形体16S rRNA进行巢式PCR扩增，综合评价不同试剂盒DNA提取效果。结果表明，应用LifeFeng柱式试剂盒DK601提取的DNA浓度和纯度均最高，得率较高，分别达到75.63 ng/μL、1.894（OD260/OD280）、18.91 ng/μL；且嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因的PCR扩增条带清晰度最优。因此，LifeFeng DK601可作为提取绵羊血液基因组DNA及嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）病原鉴定的首选试剂盒。

DNA提取试剂盒；血液基因组DNA；PCR

聚合酶链式反应（PCR）是一种重要的分子生物学诊断技术［1-2］，而该技术依赖于高质量的DNA样本。因此，提取到高质量、纯度好、结构完整的DNA对于分子生物学试验至关重要。目前除了经典的苯酚氯仿抽提法、异丙醇沉淀法外，还建立了玻璃珠吸附法、三乙醇胺月桂基硫酸盐法、盐析法等DNA提取方法［3］。不同DNA提取方法具有不同的特点。

依据相关的DNA提取原理，目前已开发出了数量众

多的DNA提取试剂盒。如基于异丙醇沉淀法，上海LifeFeng、北京康为世纪、上海生工等国内著名的生物技术公司分别推出了以DK602、CW0544、SK8224等为主的试剂盒。……