郭乃勇 仇国琴

（盐城市盐都区动物检疫站，江苏盐城 224001）

小型奶牛场布鲁氏菌病的流行病学及防治对策

郭乃勇 仇国琴

（盐城市盐都区动物检疫站，江苏盐城 224001）

通过采用虎红平板凝集试验法初检，试管凝集实验复检的方法对盐城市某个感染了布病的奶牛场检测，通过对奶牛场108头奶牛布病的检测，结果发现阳性奶牛数为8头。在现有的检测方法和淘汰处理的基础上，结合改进现有的检测方法，采取有效的措施控制和扑灭布病的发生。

布鲁氏菌病；流行病学；防制；对策

1 材料与方法

目前本实验室常用的方法是虎红平板凝集试验法（RBPT）和试管凝集法

1.1 虎红平板凝集试验

1.1.1 检测材料:布病虎红平板诊断液（购于中国农科所），玻璃平板，被检血样（盐城市某奶牛场）。

1.1.2 检测方法

（1）离心被检血样，10000转速离心5分钟，提取血清备用。

（2）洗净玻璃平板，干燥

（3）无菌环境下用30um移液器将虎红平板诊断液整齐滴于平板上

（4）用30ul移液器分别取步骤a 所提取被检血清与平板上虎红平板诊断液混合，静置三分钟

1.2 试管凝集试验

1.2.1 材料:稀释液，经虎红平板凝集试验检测呈阳性的血清，布病标准抗原（购于中国农科所），试管架，小试管及灭菌吸管等。

1.2.2 方法

（1）被检血清的稀释度：本次实验采用1：50，1：100，1：200，1：400四个稀释度.

（2）血清的稀释与抗原的加入：见表1

（3）出现50%以上的凝集的最高稀释度为血清的凝集价，试管充分振荡后，置37～38℃温箱中，22～24h后用比浊管进行比浊并记录结果（比浊管的制作：见表2）。

表1 试管凝集试验步骤

表2 比浊管的配制

2 实验结果

2.1 虎红平板凝集试验

反应后出现絮状沉淀颗粒的判为阳性。

本次实验检测的奶牛数为108头，检出布病阳性奶牛数为10头。

2.2 试管凝集试验

本次实验检测出阳性8头。

3 试验结果分析

表3 虎红平板凝集试验和试管凝集试验比较

通过用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对盐城地区采集的108份奶牛血清进行检测，其中用虎红平板凝集试验检出10份为阳性，检出率为9.3%，用试管凝集试验检出8份阳性，检出率为7.4%。虎红平板的敏特率、特异性分别为100%和98%。

4 小结与讨论

4.1 试验小结

我们先用虎红平板凝集试验法检出阳性血清，再用试管凝集法对这些阳性血清进行复检。从检测结果可以看出，发生阳性的奶牛比较集中，分析认为可能为某一奶牛感染后未及时检出进而向两旁传染造成。故及时进行迅速有效的检测十分重要。

4.2 布鲁氏菌病发病率持续上升的原因分析

（1）大力发展奶牛业，通过市场大流通，疫病有了更为广泛的流通主体。

（2）仪器设备不到位

仪器设备陈旧，检疫技术落后难以适应检疫任务。

（3）养殖户盲目购进淘汰奶牛，给当地养牛业带来了严峻的考验。

由于工作宣传力度不大，不全面，范围小，布鲁氏菌病的检疫工作未真正得到各级政府领导的重视，另外，一些养殖户对检疫的认识不够，对其目的和作用不理解，出于自身利益，在检疫人员进行检疫时不配合工作，甚至逃避检疫，甚至盲目购进淘汰奶牛，给彻底杜绝疫病的流行设置了极大的障碍。

4.3 防治对策

4.3.1 建立可靠快速的检测方法。传统方法的凝集试验（包括试管凝集试验、平板凝集试验）法检测率不高，假阳性率很高，在发达国家已基本上停止使用。取代的方法是缓冲布鲁氏菌抗原试验，包括卡片试验、虎红平板凝集试验（RBPT）、缓冲平板凝集试验（BBAT）。在国际贸易中，缓冲布鲁氏菌抗原试验是牛、羊、猪种布鲁氏菌病诊断的指定试验，作为筛选试验用。

4.3.2 采取有效的生物安全手段。推广以“检疫、免疫、捕杀病畜”的综合性防治措施，同时针对疾病流行的三个环节采取相应措施，

（1）管理传染源 对牧场、乳厂和屠宰场的牲畜定期卫生检查。检出的病畜，及时隔离治疗，必要时宰杀之。病畜的流产物及死畜必需深埋。对其污染的环境用20%漂白粉或10%石灰乳消毒。病畜乳及其制品必需煮沸消毒。皮毛消毒后还应放置三个月以上，方准其运出疫区。

病、健畜分群分区栏养，病畜用过的牧场需经三个月自然净化后才能供健康畜使用。

（2）切断传播途径 加强对畜产品的卫生监督，禁食病畜肉及乳品。防止病畜或患者的排泄物污染水源。对与牲畜或畜产品接触密切者，要进行宣传教育，做好个人防护。

（3）保护易感人群及健康家畜 除注意防护外，重要措施是进行菌苗免疫。

做好收购、调运、饲养、屠宰等各级检疫，如：在收购时发现可以病畜（如关节炎、睾丸炎、流产等）应进行隔离处理；在运输布鲁氏菌病患畜时，应按指定路线走，不得与当地畜群接触，防止传播等。

4.3.3 采取疫苗免疫和扑杀相结合的方法是目前控制疫病流行的有效方法。随着奶牛业的不断壮大与经济投入的不断增加，靠单纯的扑杀已经不现实，根据现行的生产管理制度可以了解到每年有20%的奶牛因为感染布鲁氏菌而被扑杀，这样造成的经济损失是极其巨大的。通过研究和不断的摸索，目前正在走上一条把使用疫苗和扑杀相结合的道路。