魏建国，杨大松，杨永平，王云月，李晓莉*

1云南农业大学植物保护学院;2 中国科学院昆明植物研究所 资源植物与生物技术所级重点实验室;3中国科学院昆明植物研究所 中国西南野生生物种质资源库;4 中国科学院青藏高原研究所昆明部，昆明 650201

血桐属(Macaranga)植物是广泛分布于热带地区的乔木或灌木，因其受伤后流出的汁液多呈现血红色而得名，全球分布的约有300 多种［1］，是大戟科中最大的属之一，中国境内记载的有16 种［2］。先前的研究表明异戊烯基及其衍生物取代的黄酮［3］和二苯乙烯［4］是该属典型的次生代谢产物，此外该属植物中也发现了一些三萜［3］和鞣质［5］类成分，这些次生代谢产物的新颖结构及其所表现的广泛药理活性，如抗肿瘤、抗糖尿病、抗氧化、抗炎等［3］，加上它们丰富资源储藏，使得血桐属得到越来越多天然产物化学研究者的关注。草鞋木(Macaranga henryi)又名鞋底叶树，是大戟科血桐属的植物，其根有毒，可用来治疗风湿骨痛，跌打损伤［6］。至今未见该种植物化学成分方面的研究报道，为了更好阐明其药效物质基础促进资源的合理开发利用，我们对草鞋木枝条中的化学成分进行研究，从90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中分离鉴定了8 个化合物，并对它们的提取分离和结构鉴定进行了报道。

1 仪器与材料

Finnigan MAT 90 型质谱仪，Bruker AM-400、DRX-500 和Avance Ⅲ600 型核磁共振仪，以TMS为内标测定;Agilent 1200 型高效液相色谱仪(DAD检测器)，硅胶G(200～300 目)及薄层色谱硅胶板GF254均为青岛海洋化工厂生产，Sephadex LH-20 为Amersham Biosciences 公司产品，RP-18 为Merck 公司产品，MCI 为三菱公司产品;TLC 检测采用荧光或者15%硫酸乙醇溶液处理后加热显色。

草鞋木于2012年采自云南省西双版纳自治州，由中国科学院昆明植物研究所杨永平研究员鉴定为草鞋木(Macaranga henryi)，标本保存于中国科学院昆明植物研究所标本馆。

2 提取与分离

草鞋木的干燥枝条22 kg，粉碎后用90%乙醇室温下浸泡提取3 次，每次3 天，合并提取液，减压浓缩得浸膏，加水混悬后用乙酸乙酯萃取3 次，减压浓缩得到乙酸乙酯部位149 g，用MCI 脱色处理后经硅胶柱梯度洗脱(氯仿∶丙酮9∶1 至1∶1)进行粗分，得到5 个部分(Fr.1～Fr.5)。Fr.1 经凝胶纯化后用RP-18 柱层析(甲醇∶水6∶4 至1∶0)分为三部分，第二部分经硅胶、凝胶柱层析反复分离纯化得化合物3(15 mg)和4(5 mg)，第三部分经硅胶柱(石油醚∶乙酸乙酯=4∶1)纯化后经87%甲醇-水HPLC半制备得化合物5 (4 mg)、6 (10 mg)和7 (2 mg);Fr.2 经凝胶、RP-18、氯仿-乙酸乙酯硅胶柱层析和薄层制备反复分离纯化的化合物1 (13 mg)和2 (7 mg);Fr.5 经氯仿-甲醇硅胶、凝胶反复分离纯化得化合物8 (9 mg)。

3 结构鉴定

化合物1 无色油状液体，ESI-MS m/z:639［M+Na］+。1H NMR (500 MHz，CDCl3)δ:7.56 (1H，s，H-1)，5.65 (1H，d，J=4.0 Hz，H-7)，5.37 (1H，d，J=10.3 Hz，H-12)，4.01，3.95 (2H，ABq，J=12.9 Hz，H-20)，3.23 (1H，m，H-10)，3.22 (1H，m，H-8)，2.55，2.46 (2H，ABq，J=19.0 Hz，H-5)，2.29 (2H，dd，J=7.1，14.1 Hz，H-2')，2.12 (1H，m，H-11)，2.06 (3H，s，C-2")，1.73 (3H，s，H-19)，1.22 (3H，s，H-16)，1.18 (3H，s，H-17)，1.06 (1H，d，J=4.9 Hz，H-14)，0.85 (3H，d，J=6.5 Hz，H-18)，0.83 (3H，t，J=6.8 Hz，H-14');13C NMR(125 MHz，CDCl3)δ:209.0 (s，C-3)，173.7 (s，C-1')，173.7 (s，C-1")，160.7 (d，C-1)，140.6 (s，C-6)，132.9 (s，C-2)，129.2 (d，C-7)，78.3 (s，C-9)，76.6 (d，C-12)，73.7 (s，C-4)，68.0 (t，C-20)，65.7(s，C-13)，56.1 (d，C-10)，42.9 (d，C-11)，39.0(d，C-8)，38.6 (t，C-5)，36.2 (d，C-14)，34.6 (t，C-2')，31.9 (t，C-12')，29.7 (t，C-4')，29.6 (t，C-5')，29.5 (t，C-6'，7'，11')，29.3 (t，C-8'，9')，29.0 (t，C-10')，25.6 (s，C-15)，25.2 (t，C-3')，23.8 (q，C-16)，22.7 (t，C-13')，21.0 (q，C-2")，16.8 (q，C-17)，14.4 (q，C-18)，14.1 (q，C-14')，10.1 (q，C-19)。将以上波谱数据文献［7，8］中已报道的数据对比后将该化合物确定为12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)，这是该化合物碳谱数据的首次报道。此化合物为惕各烷型二萜，作为一种很强的PKC 激动剂具有很强的促癌活性，现已广泛用于肿瘤模型的造模。至今为止血桐属中仅报道了极少的二萜［3］成分，此化合物作为典型的惕各烷型二萜是该骨架在血桐属中的首次报道。惕各烷型二萜多具有明显的毒性，此类化合物的发现表明其可能是草鞋木毒性的物质基础。

化合物2 白色粉末，ESI-MS m/z:625 ［M +Na］+。1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:7.66 (1H，s，H-1)，6.94 (1H，s，H-5)，5.43 (1H，d，J=10.3 Hz，H-12)，4.40，4.28 (2H，ABq，J=15.1 Hz，H-20)，3.78 (1H，d，J=5.2 Hz，H-8)，3.28 (1H，d，J=2.4 Hz，H-10)，2.33 (2H，t，J=7.4 Hz，H-2')，2.10 (3H，s，H-22)，1.84 (1H，d，J=5.3 Hz，H-14)，1.82 (3H，d，J=1.4 Hz，H-19)，1.63 (2H，m，H-3')，1.20 (3H，s，H-16)，1.18 (3H，s，H-17)，0.94 (3H，d，J=6.3 Hz，H-18)，0.87 (3H，t，J=6.5 Hz，H-12');13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:205.2 (s，C-3)，201.1 (s，C-7)，173.8 (s，C-1')，173.6 (s，C-21)，159.9 (d，C-1)，148.4 (s，C-6)，137.0 (d，C-5)，135.0 (s，C-2)，76.0 (d，C-12)，75.6 (s，C-9)，73.0 (s，C-4)，65.6 (s，C-13)，62.3(t，C-20)，59.2 (d，C-10)，54.6 (d，C-8)，44.3 (d，C-11)，34.5 (t，C-2')，31.8 (t，C-10')，29.6 (d，C-14)，29.5 (t，C-4')，29.0– 29.4 (t，C-5'– 9')，25.3 (t，C-3')，25.1 (s，C-15)，23.5 (q，C-17)，22.6 (t，C-11')，21.0 (q，C-22)，16.7 (q，C-16)，14.3 (q，C-18)，14.1 (q，C-12')，10.3 (q，C-19)。以上波谱数据与文献［7］中报道的trigowiin A 基本一致，确定该化合物为trigowiin A。此化合物为含有5-烯-7-羰基结构片段的稀有的惕各烷二萜，具有该结构特点的惕各烷目前仅报道了4 个，因此该类型惕各烷二萜在血桐属中的发现及其已报道的抗病毒活性对于天然产物化学和资源的合理开发具有一定的价值。

化合物3 白色粉末，1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:5.23 (1H，br s，H-12)，4.56 (1H，br s，H-6)，3.16 (1H，t，J=8.7 Hz，H-3)，1.32 (3H，s，H-25)，1.29 (3H，s，H-26)，1.17 (3H，s，H-24)，1.09(3H，s，H-27)，1.07 (3H，s，H-23)，0.86 (6H，s，H-29，30)，0.83 (3H，s，H-28);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:144.3 (s，C-13)，122.0 (d，C-12)，79.1(d，C-3)，68.6 (d，C-6)，55.5 (d，C-5)，47.9 (d，C-9)，47.2 (d，C-18)，46.8 (t，C-19)，42.1 (s，C-14)，40.7 (t，C-1)，40.7 (t，C-7)，39.5 (s，C-4)，39.0(s，C-8)，37.1 (t，C-22)，36.3 (s，C-10)，34.7 (t，C-21)，33.3 (q，C-29)，32.4 (s，C-17)，31.1 (s，C-20)，28.3 (q，C-28)，27.9 (q，C-23)，27.3 (t，C-2)，26.9 (t，C-16)，26.1 (t，C-15)，26.0 (q，C-27)，23.6 (q，C-30)，23.4 (t，C-11)，18.3 (q，C-26)，17.0 (q，C-25)，16.9 (q，C-24)。以上波谱数据与文献［9］中报道的daturadiol 基本一致，确定该化合物为daturadiol。

化合物4 白色粉末，1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:5.27 (1H，br s，H-12)，3.69 (1H，m，H-2β)，3.62 (3H，s，-OCH3)，3.01 (1H，d，J=9.5 Hz，H-3α)，2.86 (1H，m，H-18)，1.12，1.03，0.97，0.92，0.90，0.82，0.71 (3H × 7，s，H-23–27，29，30);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:178.3 (s，C-28)，143.8 (s，C-13)，122.1 (d，C-12)，83.9 (d，C-3)，68.9 (d，C-2)，55.2 (d，C-5)，51.5 (q，-OCH3)，47.5 (d，C-9)，46.6 (s，C-17)，46.0 (t，C-1)，45.8 (t，C-19)，41.8 (s，C-14)，41.2 (d，C-18)，39.8 (s，C-8)，39.6 (s，C-4)，38.4 (s，C-10)，33.8(t，C-21)，33.1 (q，C-29)，32.5 (t，C-7)，32.3 (t，C-22)，30.7 (s，C-20)，28.5 (q，C-23)，27.6 (t，C-15)，25.9 (q，C-27)，23.6 (q，C-30)，23.4 (t，C-16)，23.0 (t，C-11)，18.3 (t，C-6)，16.8 (q，C-26)，16.7 (q，C-24)，16.6 (q，C-25)。以上波谱数据与文献［10］中报道的methyl maslinate 基本一致，确定该化合物为methyl maslinate。

化合物5 白色粉末，1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:6.17 (1H，s，H-6)，4.33 (1H，m，H-3)，1.18 (3H，s，H-19)，0.92 (3H，d，J=6.5 Hz，H-21)，0.86 (3H，t，J=7.5 Hz，H-29)，0.83 (3H，d，J=7.1 Hz，H-27)，0.81 (3H，d，J=6.9 Hz，H-26)，0.71 (3H，s，H-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:199.5 (s，C-7)，171.5 (s，C-5)，119.6 (d，C-6)，68.7 (d，C-3)，55.9 (d，C-14)，55.5 (d，C-17)，53.7 (d，C-9)，45.7 (d，C-24)，42.1 (s，C-13)，41.5 (t，C-4)，39.4 (t，C-12)，39.1 (s，C-10)，36.2(t，C-1)，36.1 (d，C-20)，34.1 (d，C-8)，33.8 (t，C-2)，33.8 (t，C-22)，29.1 (d，C-25)，28.1 (t，C-16)，26.0 (t，C-23)，24.1 (t，C-15)，23.0 (t，C-28)，21.0(t，C-11)，19.8 (q，C-26)，19.0 (q，C-27)，18.6(q，C-21)，18.2 (q，C-19)，11.9 (q，C-29)，11.8(q，C-18)。以上波谱数据与文献［11］中报道的(24R)-3β-hydroxy-24-ethylcholest-5-en-7-one 基本一致，确定该化合物为(24R)-3β-hydroxy-24-ethylcholest-5-en-7-one。

化合物6 白色粉末，ESI-MS m/z:449 ［M +Na］+。1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:5.69 (1H，s，H-6)，5.16 (1H，dd，J=15.1，8.6 Hz，H-22)，5.01(1H，dd，J=15.1，8.6 Hz，H-23)，3.69 (1H，m，H-3)，1.20 (3H，s，H-19)，1.02 (3H，d，J=6.6 Hz，H-21)，0.84 (3H，t，J=7.8 Hz，H-29)，0.81 (3H，d，J=7.2 Hz，H-26)，0.79 (3H，d，J=7.4 Hz，H-27)，0.69 (3H，s，H-18);13C NMR (100 MHz，CDCl3)δ:202.3 (s，C-7)，165.1 (s，C-5)，138.1(d，C-22)，129.4 (d，C-23)，126.0 (d，C-6)，70.5(d，C-3)，54.6 (d，C-17)，51.2 (d，C-24)，50.0 (d，C-9)，49.9 (d，C-14)，45.3 (d，C-8)，42.8 (s，C-13)，41.8 (t，C-4)，40.2 (d，C-20)，38.5 (s，C-10)，38.2 (t，C-12)，36.3 (t，C-1)，31.8 (d，C-25)，31.1(t，C-2)，29.0 (t，C-16)，26.4 (t，C-15)，25.3 (t，C-28)，21.4 (q，C-26)，21.2 (q，C-27)，21.0 (t，C-11)，19.0 (q，C-21)，17.3 (q，C-19)，12.2 (q，C-29)，12.1 (q，C-18)。以上波谱数据与文献［12］中报道的3β-羟基豆甾-5，22-二烯-7-酮基本一致，确定该化合物为3β-羟基豆甾-5，22-二烯-7-酮基。

化合物7 白色粉末，1H NMR (400 MHz，CDCl3)δ:6.26 (1H，m，H-3)，6.19 (1H，d，J=9.7 Hz，H-4)，5.69 (1H，s，H-6)，1.20 (3H，s，H-19)，0.92 (3H，d，J=6.4 Hz，H-21)，0.84 (3H，t，J=7.8 Hz，H-29)，0.83 (3H，d，J=7.4 Hz，H-27)，0.81 (3H，d，J=6.9 Hz，H-26)，0.68 (3H，s，H-18);13C NMR (150 MHz，CDCl3)δ:203.0 (s，C-7)，161.4 (s，C-5)，137.0 (d，C-3)，127.9 (d，C-6)，124.4 (d，C-4)，54.9 (d，C-17)，50.9 (d，C-14)，49.8 (d，C-9)，46.2 (d，C-8)，46.0 (d，C-24)，43.8(s，C-13)，39.1 (t，C-12)，36.5 (s，C-10)，36.4 (d，C-20)，34.1 (t，C-22)，33.0 (t，C-1)，29.2 (d，C-25)，28.8 (t，C-16)，26.6 (t，C-15)，26.3 (t，C-23)，23.6 (t，C-2)，23.2 (t，C-28)，21.4 (t，C-11)，20.0 (q，C-27)，19.2 (q，C-26)，19.1 (q，C-21)，16.8 (q，C-19)，12.2 (q，C-18)，12.1 (q，C-29)。以上波谱数据与文献［13］中报道的stigmasta-3，5-dien-7-one 基本一致，确定该化合物为stigmasta-3，5-dien-7-one。

化合物8 白色粉末，ESI-MS m/z:441 ［M +Na］+。1H NMR (400 MHz，acetone-d6)δ:7.13 (2H，s，4，4'-OH)，6.68 (4H，s，H-2，2'，6，6')，4.66 (2H，d，J=4.0 Hz，H-7，7')，4.22 (2H，dd，J=6.8，8.9 Hz，H-9a，9'a)，3.84 (2H，d，J=3.6 Hz，H-9b，9'b)，3.81 (12H，s，3，3'，5，5'-OCH3)，3.09 (2H，m，H-8，8');13C NMR (125 MHz，acetone-d6)δ:148.7(s，C-3，3'，5，5')，136.1 (s，C-4，4')，133.2 (s，C-1，1')，104.4 (d，C-2，2'，6，6')，86.8 (d，C-7，7')，72.3 (t，C-9，9')，56.6 (q，3，3'，5，5'-OCH3)，55.3(d，C-8，8')。以上波谱数据与文献［14］中报道的丁香脂素基本一致，确定该化合物为丁香脂素。

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