沈 欣，赵宗平，李德凤，宗桂珍，何 伟

(1.中国中医科学院中药所，北京 100700；2.西安千禾药业有限责任公司，西安 710065)

致康胶囊是由西安千禾药业有限责任公司生产的中药制剂，由大黄、黄连、三七、白芷、阿胶、龙骨(煅)、白及、醋没药、海螵蛸、茜草、龙血竭等14味中药组成，其气微香、味辛凉、微苦，具有清热凉血止血、化瘀生肌定痛的功效，可用于创伤性出血、呕血、崩漏及便血等。该处方是在七厘散、腐尽生肌散等经典名方基础上根据临床经验和实验研究而组成，临床用于妇科、内科、外科各种出血性疾病，均有较好的疗效和修复功能。临床应用表明，本药具有明显的止血、促进组织修复、消炎的功效，围绕以上功效，本试验拟以大鼠应激性胃溃疡动物试验进一步探讨其药效及作用机制。

1 目的

致康胶囊对大鼠水浸拘束法致胃黏膜损伤的药理作用。

2 材料

2.1 动物

SDSPF级雄性大鼠70只，体质量200～220 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司(许可证号SCXK(京)2012-0001)。

2.2 饲料

购自北京市科澳协力饲料有限公司(产品许可证号SCXK(京)2009-0012，产品批号12093211，生产日期2012909)。

2.3 动物饲养

试验期间动物饲养于中国中医科学院中药研究所动物房(实验设施许可证SYXK(京)2008-0023)。动物房为屏障系统，人工光照，12 h明暗周期，温度控制在20～22℃范围，相对湿度为40～70%，换气次数15次/h。动物饲养于金属大鼠饲养笼，每笼10只。用500 mL塑料饮水瓶盛装纯净水供动物随意饮用，每日更换新鲜饮水。

2.4 药物

致康胶囊由西安千禾药业有限责任公司提供(批号20120611);奥美拉唑镁肠溶片由阿斯利康制药有限公司提供(批号1206079，生产日期2011年12月，有效期至2014年11月)。

2.5 试剂

甲醛，北京北化精细化学品有限责任公司(批号20080820)。

2.6 仪器

卡尺，香港丰量国际集团有限公司(型号ELECTRONIC DIGITAL CALLIPER， 0～150 mm)；血流测定仪、PeriCam PSI激光散斑血流视频监测系统，瑞典产。

3 方法

3.1 动物分组

健康CD大鼠按体质量随机分6组，即空白对照组、模型组、奥美拉唑镁(5 mg/kg)、致康胶囊(680 mg/kg)、致康胶囊(340 mg/kg)、致康胶囊(170 mg/kg)，致康高、中、低剂量相当于人临床用量11、5.5、2.7 倍，人临床用量以每日3次，每次12粒为标准。对照组10只，其余各组均为12只。

3.2 给药

分组当日开始口服灌胃给药，空白对照组与模型组口服蒸馏水，剂量10 ml/kg，每日1次，连续4 d。

3.3 造模

动物于实验前1 d禁食不进水12 h，末次给药后1 h将大鼠固定于金属制作的小铁笼内，置于20℃恒温水中，水淹至剑突6 h。从水中取出大鼠擦干皮肤、麻醉，动物仰卧位固定，剖开腹部皮肤肌肉，暴露胃部，沿胃大弯剪开胃部，用大头针将胃黏膜固定在隔板上。用PeriCam PSI激光散斑血流视频监测系统，观察胃黏膜血流量情况，距离12.5 cm，1帧/s，分辨率0.12 mm，监测时间2 min。取胃并沿胃大弯剪开，放入10%甲醛溶液固定，次日展开胃壁，观察并计数胃黏膜的出血点，测量各个溃疡的长度，求其总和，作为溃疡指数进行统计。将胃送病理做病理学检查。

3.4 观测指标

胃血流量：动物仰卧位固定，剖开腹部皮肤肌肉，暴露胃部，沿胃大弯剪开胃部，用大头针将胃黏膜固定在隔板上。用PeriCam PSI激光散斑血流视频监测系统，观察胃黏膜血流量情况，距离12.5 cm，1帧/s，分辨率0.12 mm，监测时间2 min。数据采集： 直线连接固定胃黏膜的大头针，确定测量区域，取开始测量1 min至1.5 min，约30 s的测量值作为胃黏膜灌注量，并计算单位面积的胃黏膜灌注量。

胃溃疡长度及指数：取胃并沿胃大弯剪开，放入10%甲醛溶液固定，次日展开胃壁，观察并计数胃黏膜的出血点，测量各个溃疡的长度，求其总和作为溃疡指数进行统计。

胃病理学检查： 10%的福尔马林固定大鼠胃组织，将固定好的胃组织取材修块后，经梯度乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋后，切片(厚度4 μm)并进行HE染色。用光学显微镜进行病理组织学检查。

3.5 统计学方法

4 结果

4.1 致康胶囊对大鼠应激性胃溃疡的影响

阳性药、致康胶囊3个剂量组均能明显减少胃黏膜溃疡指数及长度，3个剂量组呈现一定的量效关系，说明本品能明显减轻应激试验造成的胃黏膜损伤。

表1 致康胶囊对大鼠应激性胃溃疡的影响(水浸法)

注：与模型组比较:*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001

4.2 致康胶囊对模型动物胃形态学变化影响

空白对照组胃黏膜层有少量出血，未见黏膜坏死脱落；模型组、阳性药组及各剂量给药组可见不同程度的胃黏膜出血，黏膜上皮坏死脱落形成糜烂，但未累及黏膜肌层，黏膜下层亦可见不同程度的出血，部分动物胃壁肌层可见出血。与空白对照组比较，模型组胃黏膜的各种病变差异有统计学意义；与模型组比较，阳性药及致康胶囊各给药组胃黏膜的各种病变差异有统计学意义。

4.3 致康胶囊对模型动物胃血流量的影响

奥美拉唑镁、致康胶囊3个剂量组均能明显增加大鼠应激性胃溃疡模型中胃黏膜单位面积的血流量，致康胶囊高、中剂量组能明显增加胃黏膜灌注量，3个剂量组呈现一定的量效关系，说明本品能明显增加模型动物的胃黏膜血流量，调节胃黏膜血流的分布状况，通过增加胃黏膜血流量，有效保护胃黏膜，通过维护和重建黏膜微循环而保护胃黏膜细胞的完整性。

表2 致康胶囊对大鼠胃黏膜出血病变比较

表3 致康胶囊对大鼠胃黏膜坏死脱落病变比较

表4 致康胶囊对大鼠黏膜下层出血病变比较

表5 致康胶囊对大鼠应激性胃溃疡模型中胃黏膜血流量的影响作用

注：与模型组比较:*P<0.05，**P<0.01

5 结论

应激性胃溃疡是以炎性糜烂、浅表溃疡及胃肠道出血为特征的急性胃黏膜病变，是内分泌系统和自主神经系统功能紊乱导致胃肠运动、分泌功能失调造成的急性溃疡模型，病理表现为胃腺部黏膜呈弥漫性水肿，部分黏膜充血，广泛出血或形成血痂，血痂与胃黏膜结合牢固，大鼠胃黏膜的完整性被破坏，上皮细胞坏死，毛细血管破裂出血及渗出，胃黏膜表面微绒毛呈现明显水肿，毛细血管内有微血栓形成，从而导致胃黏膜微循环障碍，胃黏膜屏障受

损，胃黏膜对胃酸和胃蛋白酶分泌增加失去抵抗力引起急性胃黏膜病变。本试验可观察到，本药具有明显的防治应激性胃溃疡的作用，且有一定的量效关系。具体表现在可明显减轻水浸应激胃溃疡模型大鼠胃黏膜损伤程度，减轻胃黏膜充血、水肿、糜烂等作用。光镜下的形态学改变亦可证实，对急性胃黏膜损伤具有保护作用，增强胃黏膜的防御机制，对防治应激性胃溃疡有一定疗效和优势。

同时近年来研究表明，胃、十二指肠病变处黏膜下血流的减少是这些病变的基本原因之一，病变部位的糜烂、溃疡发病因素中黏膜下血供减少比胃酸更为重。本研究结果中，致康胶囊可增加胃黏膜血供及调节胃黏膜血流的分布状况，通过增加胃黏膜血流量有效保护胃黏膜，通过维护和重建黏膜微循环而保护胃黏膜细胞的完整性。

以上结果表明，本药具有以下较明显的药理作用：(1)保护胃黏膜作用。可明显降低急性损伤对模型动物胃黏膜损伤程度；(2)止血作用。减少因胃黏膜损伤引起的毛细血管破裂出血及血痂形成；(3)改善病损部位血液微循环障碍作用。可增加胃黏膜血供及调节胃黏膜血流的分布状况，保护和重建黏膜微循环；(4)修复作用。可明显减轻病损部位的病理损伤。

上述药理作用为本药治疗和防护消化系统黏膜损伤、保障和重建局部微循环、加强血运供应、调节黏膜保护机制等功效提供了一定的实验理论基础。

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