硒化乳酸菌胞外多糖对小鼠腹腔巨噬细胞及肿瘤细胞内游离Ca2+的影响
2014-01-30潘道东曾小群
食品科学 2014年1期
刘 鹭,潘道东*,丁 琳,曾小群
(宁波大学海洋学院食品系,浙江 宁波 315211)
多糖是一种由单糖聚合而成的天然高分子化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中[1]。乳酸菌是食品级的益生菌,其在生长过程中产生大量胞外多糖。乳酸乳球菌乳亚种(Lactococcus lactissubsp.lactis)是一种革兰氏阳性菌,常被用于干酪生产。大量研究证实乳酸菌胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)具有免疫激活、抗肿瘤、降低血清胆固醇等作用[2-4]。硒是人体必需微量元素,适量补充硒元素可增强人体免疫能力[5]。通过化学修饰方法,亚硒酸钠和多糖反应后形成一种含有亚硒酸酯键的硒化多糖。该多糖低毒且可提高小鼠免疫能力[6]。
Ca2+作为细胞内信号参与信息传递,在生物体内具有广泛的作用,如突触适应、神经递质释放、肌肉收缩、细胞分化和死亡等。细胞内游离Ca2+浓度的变化可引发细胞内一系列的生理生化反应[7-9]。巨噬细胞作为机体免疫系统的重要组成部分,在特异性免疫应答及非特异性免疫防御中起着关键的作用[10]。为进一步探讨硒化乳酸菌胞外多糖的免疫功能,本实验利用激光共聚显微镜及Fluo-3/AM探针研究该多糖对巨噬细胞、SGC-7901胃癌细胞及Hela细胞内游离Ca2+浓度的变化,以期为开发一种多糖补硒添加剂提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与培养基
精制EPS及硒化EPS(硒含量169.228μg/g) 本实验室制备。
SGC-7901胃癌细胞、Hela细胞 武汉博士德生物工程有限公司;小牛血清 杭州四季青生物工程材料研究所;细菌脂多糖、Fluo-3/AM 美国Sigma公司;青霉素、链霉素、HEPES缓冲液 北京索莱宝科技有限公司;……
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