刘琴 陈美玲 高晓艳 凌娅

HPLC法测定肾炎片中芦丁的含量

刘琴 陈美玲 高晓艳 凌娅

目的建立肾炎片中芦丁的含量测定方法。方法采用水浴回流提取, 高效液相色谱法(HPLC)测定法, 用C18柱, 以乙腈-甲醇-0.4%醋酸溶液(16:6:78)为流动相, 检测波长：360 nm。结果用50%乙醇水浴回流30 min的方法提取肾炎片中芦丁, HPLC法测定芦丁含量, 精密度RSD为1.1%, 重复性RSD为1.2%, 加样回收率为99.6%。结论采用回流提取HPLC法测定肾炎片中芦丁方法可行。

肾炎片；芦丁；高效液相色谱法

肾炎片处方由一枝黄花、车前草、马鞭草、白前、白茅根、葫芦壳六种药材组成, 具有清热解毒、 利水消肿的功效。用于急慢性肾炎和泌尿道感染等症。现行质量标准为部颁标准《中药成方制剂》第6册WS3-B-1152-92-2005, 无含量测定项。为更好控制产品质量, 对本品中芦丁进行含量测定方法的研究。参考目前同类制剂测定芦丁含量的方法［1,2］, 本文采用HPLC对肾炎片中芦丁含量进行研究。

1 仪器与试药

1.1仪器 高效液相色谱仪(Agilent 1100), UV2401 PC型紫外-可见分光光度计, C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm Agilent)。

1.2试药 肾炎片来源于江苏康缘药业股份有限公司, 芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所；乙腈、甲醇为色谱纯, 水为自制超纯水, 冰醋酸、95%乙醇、无水甲醇、无水乙醇为分析纯。

2 方法学考察与结果

2.1色谱条件 色谱柱为Phenomenex luna C18(250 mm× 4.6 mm, 5 μm)；流动相：乙腈-甲醇-0.4%醋酸溶液(16:6:78)［3］；检测波长360 nm；柱温30℃。

2.2对照品溶液的制备 精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品2.931 mg, 置100 ml容量瓶中, 加甲醇溶解, 并稀释至刻度, 摇匀, 即得, 浓度为29.31 μg/ml。

2.3供试品溶液的制备［3］精密称取3 g, 置250 ml平底烧瓶中, 精密加入50%乙醇50 ml, 水浴回流30 min提取, 放冷,再称定重量, 用50%乙醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 取续滤液, 即得。……