朱玉霞，孙丽莎，杨 矫，陈 秋

(成都中医药大学附属医院，成都610075)

胰岛素的主要靶器官是肝脏、骨骼肌及脂肪组织，主要生理效应包括其介导的葡萄糖摄取及处理、促进蛋白质和脂肪合成、抑制糖异生、抑制脂肪分解和酮体生成等。为了探讨蜕皮甾酮对2型糖尿病大鼠肝细胞胰岛素信号转导分子基因与蛋白表达的影响，2010年3～10月，我们在前期进行的蜕皮甾酮改善大鼠胰岛素抵抗的实验基础上，应用免疫组化技术与RT-PCR方法分别检测胰岛素信号转导分子胰岛素受体底物2(IRS-2)的蛋白及mRNA表达水平，旨在探讨蜕皮甾酮胰岛素增敏的分子机制。

1 材料与方法

1.1 材料 6周龄雄性Wistar大鼠42只，体质量130～170 g，由重庆医科大学实验动物中心提供。普通饲料为我院实验动物中心配制的常规饲料，总热量为12.61 kJ/g;高脂饲料参照文献［1］喂养前1周临时配制，-20℃保存，总热量为20.53 kJ/g。葡萄糖检测试剂盒(氧化酶法，重庆医科大学临床学院检验科)，胰岛素测定试剂盒(放免法，中国原子能研究院)，免疫组化染色试剂盒(北京中山生物技术有限公司)。PCR扩增仪(美国PE)，紫外分光光度计(日本岛津制作所)，电泳仪(美国Bio-Rad公司)，MUVB-20凝胶成像分析系统(美国Ultralum公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物分组与模型制作 14只大鼠用普通饲料喂养(正常组);28只用高脂饲料喂养1个月后，空腹状态下一次性腹腔注射STZ 25 mg/kg诱导2型糖尿病大鼠模型［1］。第7天检测空腹血糖(FPG)和胰岛素(FINS)，以 FPG≥7.0 mmol/L、胰岛素敏感性(采用钳夹试验评估)降低为成模标准。将造模成功的25只大鼠随机分为模型组13只和治疗组12只，分别给予高脂饲料喂养、高脂饲料+蜕皮甾酮灌胃治疗。……