鄢 进 （武汉大学基础医学院，湖北 武汉430071；复旦大学生命科学院，上海200433）

陈金中，王臻臻，夏 鹏 （复旦大学生命科学院，上海200433）

黎七雄 （武汉大学基础医学院，湖北 武汉430071）

蛋白酶体能抑制细胞凋亡，而蛋白酶体抑制剂MG132诱导人血管内皮细胞凋亡［1－3］。PSMA3基因在Bim凋亡调节蛋白起什么作用，有何影响，目前尚未见文献报道。因此，本研究的主要目的是探究PSMA3基因在Bim蛋白中的调节作用，研究PSMA3调节Bim蛋白对细胞凋亡的影响，阐明蛋白酶体与细胞凋亡的关系，为研究蛋白酶体抑制剂有效的刺激或诱导细胞Bim的表达水平上调，为疾病的治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要药品及试剂 QIAquick的胶回收试剂盒，由德国的Qiagen公司提供；QIAquiekPCR的纯化试剂盒，由德国的Qiagen公司提供；硝基纤维素膜 （Hybond－C），由美国Amersham Pharmacia Biotech公司提供；常规质粒的快速提取的试剂盒，由北京博大泰克生物基因技术有限责任公司提供；DNA片段／PCR产物的快速纯化以及回收试剂盒，由北京博大泰克生物基因技术有限责任公司提供。

使用的电泳各项试剂均系Bio－Rad产品；纯化蛋白使用的琼脂糖凝胶珠Ni－NTTA由Novegen公司提供；DNA与蛋白Markers由New England Biolabs公司提供；各种内切酶如EeoRI、BamHI、Xhol、Hindlll等，T4DNA的连接酶，由英国Biolab公司提供；过硫酸胺，由美国Sigma公司提供；考马斯亮蓝的R250／G250，由美国AMRESCO公司提供；兔抗人的bimL的多克隆抗体，由美国Santa Cruz公司提供；兔抗人的PSMA3的多克隆抗体，由美国Santa Cruz公司提供；分析纯，Tris碱，由美国Boehringer Mannheim公司提供；Dulbecco's modified Eagle's medium （DMEM）由美国 Gibco公司提供；其他的常用试剂是国产分析纯试剂dNTPs，由上海生工生物工程公司提供。分子量蛋白标准，由中国科学院上海生化所提供；……