巩西玲

霍乱是由霍乱弧菌感染引发的一种流行广泛的甲类传染病。而霍乱弧菌是肠道传染病霍乱的病原体，被感染者可表现为剧烈呕吐、腹泻、脱水，甚至导致死亡［1］。该病的发病率及病死率很高，曾在世界范围内出现过多次大流行，对于霍乱的防治的关键在于对霍乱疫区的外环境标本进行及时监测。对霍乱弧菌做出快速、精准的检测是对霍乱预防、控制的主要方法。但其检测一直是困扰微生物检验工作的一个难题，尤其是外环境水质和食品中霍乱弧菌的检测，根据国内、外大量学者的研究，建立了许多有效的检测方法，并已作为目前临床的常用检测手段广泛应用。但霍乱弧菌在自然生存状态下的带菌量很少，常由于机制不清晰，同时，外环境标本掺杂大量其他菌群，从而导致霍乱弧菌的分离鉴定比较困难。常规培养法无法检出霍乱弧菌，为了有效提高外环境中霍乱弧菌的检出率，避免漏检的发生，我们采用荧光定量PCR检测方法，不仅提高了常规检测方法的灵敏度，而且可以有效避免聚合酶链反应(PCR)方法带来的假阳性。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般材料

1.1.1 样品来源 根据我市的霍乱病监测规定，将批发市场，农贸市场，餐厅暂养，销售的海、水产品共100份进行标本采集。

1.1.2 样品种类 所采集的标本100份共分5大类:包括鱼类 (20份):带鱼、黄瓜鱼、金钱鱼、鳝鱼、鲈鱼、鲫鱼、鲳鱼等;贝壳类 (20份):鲍鱼、牡蛎、蛏子、铁钉螺等;甲壳类 (20份):螃蟹、草虾、河虾等;蛙类 (20份):牛蛙、青蛙;水母类动物 (15份);甲鱼 (5份)。……