曾 檀 ，霍丹群 ，程辉跃 ，周祥敏

(1.重庆大学生物工程学院，重庆 400030;2.重庆市食品药品检验所，重庆 401121; 3.重庆市药物过程与质量控制工程技术研究中心，重庆 401121)

米格列奈是继瑞格列奈、那格列奈后第3个新型非磺酰脲类口服降糖药，是苯丙氨酸的衍生物。其水合钙盐为米格列奈钙，最早由日本橘生药品工业株式会社合成，于2004年在日本首次上市，2010年在中国取得了制剂的药品批准文号。米格列奈主要是通过抑制胰腺β细胞膜上三磷酸腺苷(ATP)依赖型K+通道，促进Ca2+内流，从而增加细胞内Ca2+浓度，促进胰岛素分泌，发挥降血糖的作用，与传统磺酰脲类药物相比，具有起效快、持续时间短、安全性高、耐受性好等优点[1]。在其产品合成及精制过程中，使用了有机溶剂甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿。为控制产品质量，笔者参照药典相关规定[2]，采用顶空毛细管气相色谱法同时测定了上述5种有机溶剂，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 7890N型气相色谱仪(安捷伦科技有限公司)，配有FID检测器。乙醇(上海振兴化工一厂，批号200909288)，乙酸乙酯(天津市福晨化学试剂厂，批号20120412)，氯仿(重庆川东集团有限公司，批号20120901)，甲醇(批号20120729)、二氯甲烷(批号20111109)、二甲亚砜(批号20120813)均为成都市科龙化工试剂厂产品，均为分析纯;米格列奈钙(市售品)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:DB－624弹性石英毛细管柱(0.32 mm×30 m，1.8 μm);进样口温度:200 ℃;检测器:FID，温度:250 ℃;柱温:采用程序升温，初始温度40℃，保持8 min，然后以45℃ /min升至220℃，保持3 min;载气(N2)流速:1.0 mL/min;空气流速:350 mL/min;氢气流速:35 mL/min;分流比:10∶1;顶空温度:80℃;平衡时间:30min;进样体积:1.0mL。在此条件下，色谱图见图1。

图1 气相色谱图

2.2 溶液配制

分别称取甲醇约 600 mg、乙醇约1 000 mg、二氯甲烷约120mg、乙酸乙酯约1 000mg、氯仿约12mg，精密称定，置200mL容量瓶中，用二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。分别精密量取上述对照品贮备液10mL，置100mL容量瓶中，用二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL，置20mL顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。精密称取米格列奈钙样品1.0 g，置20mL顶空瓶中，加二甲亚砜10mL，密封，振摇使溶解，作为供试品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:精密量取对照品贮备液 5.0，7.5，10.0，12.5，15.0 mL，分别置 100 mL 容量瓶中，加二甲亚砜稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液Ⅰ～Ⅴ。取对照品溶液Ⅰ～Ⅴ各10mL，分别置20mL顶空瓶中，加盖密封，于80℃平衡30min后取顶空气进样，记录色谱图。以峰面积 Y为纵坐标、质量浓度 X(μg/mL)为横坐标进行线性回归。结果见表1。可见，表明在测定限度范围的50%至150%区间内，各组分的线性关系良好。

表1 各溶剂回归方程与线性范围(n=5)

最小检出浓度确定:在拟订的试验条件下，逐级稀释对照品贮备液，根据溶剂在色谱仪上的响应值与仪器噪音的比值，以S/N为3计算，甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、氯仿5种残留溶剂最低检出质量浓度分别为 3.0，1.5，2.0，0.4，0.3 μg/mL。

精密度试验:取对照品溶液，共6份，分别置20mL顶空瓶中，加盖密封，依法测定。结果甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和氯仿峰面积的 RSD 分别为 4.1%，3.9%，4.6%，5.2%和 9.7%(n=6)。

回收率试验:取已测定含量的样品1.0 g，共9份，精密称定，置 20mL 顶空瓶中，分别加入对照品贮备液 0.8，1.0，1.2mL(分别相当于测定限度的80%，100%，120%)，各3份，加二甲亚砜至10mL，加盖密封后，依法测定。结果见表2。

重复性试验:取样品约1.0 g，精密称定，置20mL顶空瓶中，加二甲亚砜20mL，密封，依法测定。结果乙醇含量为0.04%，RSD为1.3%(n=6)，甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和氯仿均未检出。

2.4 样品含量测定

取样品约1.0 g，精密称定，置20mL顶空瓶中，加二甲亚砜20mL，密封，依法测定。3批样品中甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和氯仿均未检出，乙醇含量分别为0.04%，0.04%，0.03%。

表2 各溶剂回收率试验结果(n=9)

3 讨论

本品在甲醇、乙醇中易溶，在水中不溶。经试验，以二甲亚砜为溶剂，在80℃加热30min条件下，样品能达到气液平衡，故选用二甲亚砜作为溶剂。ECD检测器较FID检测器更适合二氯甲烷和氯仿的检测，但考虑到实际工作中FID检测器应用更普遍，且在拟订的条件下，二氯甲烷和氯仿的检出限能满足测定要求，故仍选用FID检测器检测。

[1]Sunga Y，Gonoi T，Shibasaki T，etal.The effects of mitiglinide(KAD 1229)，a new anti－diabetic drug，on ATP－sensitive K+channels and insulin secretion:comparison with the sulfonylureas and neteglinide[J].Eur JPharmacol，2001，431(1):119 － 125.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:附录61－附录65.